RNA提取注意事項(xiàng)：1、組織樣本要盡可能的新鮮，避免反復(fù)凍融。2、提取時(shí)組織要充分研磨，組織量不宜過(guò)少，更不宜過(guò)多。3、加入裂解液后應(yīng)給予充分的孵育時(shí)間，使樣本充分裂解。4、在用Trizol法提取時(shí)，分層后吸取上清的原則是“寧愿少吸，不能多吸”，千萬(wàn)不能提取到中間層，否則會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的基因組DNA污染。5、洗滌時(shí)洗滌液應(yīng)充分浸潤(rùn)到管壁的四周，確保洗滌徹底。6、柱式提取法，洗滌完后除了對(duì)柱子進(jìn)行空離后，還應(yīng)當(dāng)將吸附柱置于超凈臺(tái)內(nèi)吹風(fēng)5~10min，使有機(jī)溶劑充分揮發(fā)干。7、柱式法較后洗脫時(shí)候，當(dāng)加入DEPC水后還應(yīng)孵育3~5min，或者提前將DEPC水加熱至60℃，可提高洗脫得率。傳統(tǒng)的Trizol裂解異丙醇沉淀法較后RNA是用DEPC水溶解沉淀，則應(yīng)當(dāng)給予適當(dāng)溶解時(shí)間，并用泵頭不斷吹吸離心管底部。主要取決于離心柱對(duì)核酸的吸附能力。上海唐山RNA提取試劑

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒：1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過(guò)程中去除干擾物的技術(shù)，已成功用于葡萄，中草藥等多糖含量高的樣品，成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開(kāi)發(fā)了糖類(lèi)清理劑，PCR壓制物清理劑，核酸提取優(yōu)化劑，樣品核酸穩(wěn)定劑，RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品。2、適用材料普遍：尤其適合解決多醣多酚，色素等次級(jí)代謝物豐富的植物樣本難題。昆蟲(chóng)RNA柱式提取試劑盒特點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單快速，處理一個(gè)樣品只需要約十分鐘。RNA純度高，平均OD260/280一般都在2.0左右，能夠有效去除大多數(shù)昆蟲(chóng)中的多糖污染。適用于各種昆蟲(chóng)組織，每100mg組織能提取到20～30μg總RNA。唐山正規(guī)RNA提取試劑廠家供應(yīng)血漿/血清RNA提取試劑盒：高效去除植物組織中的色素、酚類(lèi)等雜質(zhì)，提取RNA的純度高，產(chǎn)量大。

RNA提取注意事項(xiàng)：所有實(shí)驗(yàn)所用的泵頭、離心管等消耗品均要使用RNase-free的；整個(gè)過(guò)程要在無(wú)RNase污染的條件下進(jìn)行，通常可以在無(wú)菌操作臺(tái)中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并用75%的酒精進(jìn)行擦拭殺菌，如有必要也可在實(shí)驗(yàn)前噴灑一些商用的RNase壓制劑；所有相關(guān)溶液的配制要使用RNase-free水或DEPC水(包括75%酒精也需要用無(wú)水乙醇與DEPC水配制)；溶液的配制使用移液器進(jìn)行操作，切勿使用量筒等中間器皿；研缽、研棒、鑷子、剪刀等用錫箔紙包好后，200℃干熱滅菌4h；實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一定要戴手套和口罩；異丙醇、氯仿、乙醇等試劑要使用未開(kāi)封的，或者開(kāi)封之后直接分裝至小容量離心管的，以避免多次使用的交叉污染；

RNA提取濃度不高或質(zhì)量不佳原因及解決辦法：1、RNA降解：可能是提取樣本本身降解，或者是在提取過(guò)程中導(dǎo)致的降級(jí)；應(yīng)當(dāng)盡可能使用新鮮樣本進(jìn)行RNA提取，采集的樣本應(yīng)當(dāng)及時(shí)置于液氮或者-80℃冰箱凍存，并減少反復(fù)凍融。在RNA提取過(guò)程中應(yīng)當(dāng)使用RNase/DNasefree的吸頭、離心管及其他材料，提取過(guò)程盡可能的快，提取后的RNA應(yīng)置于冰盒上并及時(shí)放于-80凍存。如提取后的RNA需要進(jìn)行凝膠電泳檢測(cè)，則應(yīng)提取好后立刻進(jìn)行電泳，電泳緩沖液應(yīng)更換新配制的。2、鹽及有機(jī)溶劑殘留：提取試劑中含有酚及胍鹽，洗滌液中含有乙醇，在提取過(guò)程中裂解液吸棄不徹底，洗液沒(méi)有充分晾干導(dǎo)致的，殘留的鹽及有機(jī)溶劑對(duì)后續(xù)的逆轉(zhuǎn)錄和PCR均存在不同程度的壓制作用，因此在提取過(guò)程中應(yīng)充分去除組織裂解液，洗滌時(shí)應(yīng)充分，使管壁四周均能被洗滌到，另外管子空離和吹風(fēng)是必須的步驟，會(huì)進(jìn)一步降低有機(jī)物殘留。總RNA提取試劑：適用于植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細(xì)胞等樣品中提取總RNA。

拭子RNA提取試劑的選擇？應(yīng)有較高的提取得率。對(duì)離心柱法而言，拭子核酸得率的高低，主要取決于離心柱對(duì)核酸的吸附能力、洗脫能力以及裂解液的裂解消化能力。離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好、裂解液細(xì)胞裂解能力強(qiáng)、洗脫液洗脫能力好，核酸的提取得率就高。反之，如果離心柱硅膠膜吸附能力不好，裂解液和洗脫液沒(méi)有經(jīng)過(guò)很好的優(yōu)化，RNA的提取得率就不高。至于RNA提取得率的確定，我們可以使用紫外分光光度法，但是不能作為判斷得率的單獨(dú)標(biāo)準(zhǔn)，較好還是要做個(gè)PCR或熒光定量。RNA提取試劑注意事項(xiàng)：需自備氯仿，異丙醇，DEPC，75%乙醇(DEPC水配制)，和DEPC水。溫州南昌RNA提取試劑

RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。上海唐山RNA提取試劑

RNA提取：預(yù)備工作（1）塑料制品：盡量使用一次性無(wú)菌塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品，如沒(méi)有開(kāi)封使用過(guò)，通常不必再處理。處理的步驟如下：O在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強(qiáng)的劇毒物，須在通風(fēng)櫥中小心使用）O將待處理的塑料制品放入一個(gè)可以高溫滅菌的容器中，注入DEPC-H2O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過(guò)夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中，將裝有DEPC-H2O處理過(guò)的塑料制品的容器以鋁箔封口，高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥，置潔凈處備用。（2）玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時(shí)以上。上海唐山RNA提取試劑