對(duì)卵子進(jìn)行評(píng)估:胚胎學(xué)家指出:有紡錘體出現(xiàn)的卵母細(xì)胞有較高的受精率和胚胎發(fā)育率,也就是說(shuō)紡錘體的存在與否,可以用來(lái)評(píng)價(jià)卵母細(xì)胞胞漿的成熟度。因此胚胎學(xué)家有三次通過(guò)紡錘體對(duì)我們的卵子進(jìn)行評(píng)估的機(jī)會(huì): (1)胚胎學(xué)家可以利用偏振光顯微鏡對(duì)卵子的紡錘體進(jìn)行觀察,通過(guò)定量分析數(shù)據(jù)對(duì)卵子進(jìn)行分級(jí),挑選出正常分裂的卵子,也就是出現(xiàn)紡錘體的卵子,進(jìn)而提高試管嬰兒的受精率。 (2)胚胎學(xué)家還可以通過(guò)紡錘體來(lái)確定體外培養(yǎng)成熟卵子(IVM)的成熟期,進(jìn)而為體外成熟卵子進(jìn)行評(píng)估,***提高試管嬰兒的受精率和胚胎發(fā)育率。 (3)由于紡錘體對(duì)環(huán)境溫度的改變非常敏感。溫度降至25℃時(shí),只需要10分鐘的時(shí)間,就會(huì)紡錘體造成不可逆的損傷。所以冷凍復(fù)蘇過(guò)程中溫度改變很有可能對(duì)卵母細(xì)胞紡錘體和染色體造成損傷。因此胚胎學(xué)家可以應(yīng)用紡錘體成像幫助選擇復(fù)蘇后具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,進(jìn)而可以提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率。
綜上所述,通過(guò)***細(xì)胞的紡錘體成像技術(shù)可以避免輔助生殖技術(shù)對(duì)卵母細(xì)胞紡錘體的損傷,有助于選擇具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,有利于提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率,利用更科學(xué)的方式,將讓求子路的終點(diǎn)不再那么遙遠(yuǎn)。 紡錘體在細(xì)胞分裂過(guò)程中經(jīng)歷明顯的形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。上海偏光成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿
卵母細(xì)胞冷凍保存主要采用兩種方法:慢速冷凍法和玻璃化冷凍法。相較于傳統(tǒng)的慢速冷凍法,玻璃化冷凍法因其更高的解凍存活率和妊娠成功率而逐漸成為主流技術(shù)。玻璃化冷凍法的基本原理是將含有生物樣本的溶液在極短的時(shí)間內(nèi)(如幾分鐘內(nèi))冷卻至液氮溫度,使溶液在凝固點(diǎn)以下形成無(wú)冰晶的半固體或固體狀態(tài)。這種方法避免了冰晶形成對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞,從而減少了冷凍損傷。在卵母細(xì)胞冷凍保存中,玻璃化冷凍法通過(guò)優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的濃度和冷凍速率,使卵母細(xì)胞在冷凍過(guò)程中保持其結(jié)構(gòu)的完整性。偏光成像紡錘體Hoechst染料紡錘體在細(xì)胞分裂中的功能受到細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境的共同影響。
構(gòu)成紡錘體的是紡錘絲還是星射線(xiàn)
人教版《生物·必修1·分子與細(xì)胞》第6章在講述有絲分裂時(shí),關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞紡錘體形成的區(qū)別是這樣描述的:植物細(xì)胞是從細(xì)胞的兩極發(fā)出紡錘絲,形成一個(gè)梭形的紡錘體。而動(dòng)物細(xì)胞是在兩極的中心粒周?chē)l(fā)出大量的星射線(xiàn),兩組中心粒之間的星射線(xiàn)形成了紡錘體。而在《生物·必修2·遺傳與進(jìn)化》第2章以哺乳動(dòng)物精子形成過(guò)程為例講述減數(shù)分裂過(guò)程時(shí),又用了“紡錘絲”這一表述。同一套教材,前后表述不一致,讓教師的教學(xué)和學(xué)生的學(xué)習(xí)都產(chǎn)生了困惑。“紡錘絲”一詞的由來(lái)是因?yàn)榧忓N體微管在電子顯微鏡下呈絲狀,在浙科版教材中即為這樣表述,且不論動(dòng)物細(xì)胞還是植物細(xì)胞都用“紡錘絲”。不管是紡錘絲還是星射線(xiàn),都是教材編寫(xiě)者為了學(xué)生更好地理解和學(xué)習(xí)“紡錘體微管”這一名詞。
冷凍電鏡技術(shù)(Cryo-EM)近年來(lái)在結(jié)構(gòu)生物學(xué)領(lǐng)域取得了重大突破,也為紡錘體卵冷凍研究提供了新的視角。通過(guò)將生物樣品冷凍至極低溫并在電子顯微鏡下進(jìn)行觀察和成像,冷凍電鏡能夠揭示生物大分子的高分辨率結(jié)構(gòu),包括紡錘體微管等精細(xì)結(jié)構(gòu)。這一技術(shù)不僅克服了傳統(tǒng)電鏡技術(shù)對(duì)樣品制備的嚴(yán)格要求,還能夠在接近生理狀態(tài)下觀察紡錘體的形態(tài)和功能,為無(wú)損觀察紡錘體提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。無(wú)損觀察紡錘體技術(shù)能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)變化,從而準(zhǔn)確評(píng)估冷凍保存的效果。通過(guò)對(duì)比冷凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性,研究者可以?xún)?yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方和濃度,以及改進(jìn)冷凍程序,減少冷凍損傷,提高解凍后卵母細(xì)胞的存活率和發(fā)育潛能。研究紡錘體有助于理解細(xì)胞分裂的分子機(jī)制。
盡管成熟卵母細(xì)胞紡錘體冷凍保存技術(shù)取得了進(jìn)展,但仍面臨一些挑戰(zhàn)。首先,冷凍損傷仍然是制約其臨床應(yīng)用的主要問(wèn)題之一。盡管玻璃化冷凍法能夠在一定程度上減少冷凍損傷,但仍無(wú)法完全避免。其次,冷凍保存后的卵母細(xì)胞在體外受精和胚胎發(fā)育過(guò)程中的表現(xiàn)仍存在不確定性。這可能與冷凍過(guò)程中紡錘體和染色體的損傷有關(guān),也可能與冷凍保護(hù)劑的殘留毒性有關(guān)。此外,法律倫理問(wèn)題也是卵母細(xì)胞冷凍保存技術(shù)面臨的一大挑戰(zhàn)。不同國(guó)家和地區(qū)對(duì)卵母細(xì)胞冷凍保存的法律和倫理規(guī)定各不相同,這在一定程度上限制了該技術(shù)的普及和應(yīng)用。紡錘體形成的精確性對(duì)于維持生物體遺傳穩(wěn)定性至關(guān)重要。香港成熟卵母細(xì)胞紡錘體液晶偏光補(bǔ)償器
紡錘體在細(xì)胞分裂中的功能受到嚴(yán)格的時(shí)間和空間控制。上海偏光成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿
紡錘體是如何形成的(2)
動(dòng)粒微管連接染色體動(dòng)粒與位于兩極的中心體。在有絲分裂前期,一旦核被膜解聚,由相反兩個(gè)方向的中心體伸出的動(dòng)粒微管就會(huì)隨機(jī)地與染色體上的動(dòng)粒結(jié)合而俘獲染色體,微管**終附著在動(dòng)粒上,動(dòng)粒微管把染色體和紡錘體連接在一起。在細(xì)胞分裂期的后期,分開(kāi)后的染色單體被拉向兩極。染色體移動(dòng)由兩個(gè)相互獨(dú)立且同步進(jìn)行的過(guò)程所介導(dǎo),分別為過(guò)程A和過(guò)程B。在過(guò)程A中,在連接微管和動(dòng)粒的馬達(dá)蛋白的作用下,動(dòng)粒微管解聚縮短,在動(dòng)粒處產(chǎn)生的拉力使染色體移向兩極。極間微管是從一個(gè)中心體伸出的某些微管與從另一個(gè)中心體伸出的微管相互作用,阻止了它們的解聚,從而使微管結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定,兩套微管的這種結(jié)合形成了有絲分裂紡錘體的基本框架,具有典型的兩極形態(tài),產(chǎn)生這些微管的兩個(gè)中心體稱(chēng)為紡錘極,這些相互作用的微管被稱(chēng)為極間微管。在有絲分裂后期過(guò)程B中,極間微管的伸長(zhǎng)和相互間的滑行使紡錘極向兩極方向移動(dòng)。星體微管從中心體向周?chē)瘦椛錉罘植迹谟薪z分裂后期過(guò)程B中,每一紡錘極上向外伸展的星體微管發(fā)出向外的力,拉動(dòng)兩個(gè)紡錘極向兩極方向移動(dòng)。
上海偏光成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿
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