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武漢無需染色紡錘體提高冷凍保存效率

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025年04月12日

在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,卵母細(xì)胞冷凍保存技術(shù)作為輔助生殖技術(shù)的重要組成部分,近年來取得了進(jìn)展。尤其是針對(duì)成熟卵母細(xì)胞紡錘體的冷凍保存研究,不僅關(guān)乎女性生育能力的保存,還涉及到遺傳學(xué)的穩(wěn)定性和安全性。成熟卵母細(xì)胞,即處于第二次減數(shù)分裂中期(MII期)的卵母細(xì)胞,其內(nèi)部包含一個(gè)高度復(fù)雜且精細(xì)的紡錘體結(jié)構(gòu)。紡錘體由微管組成,這些微管通過動(dòng)態(tài)變化,將染色體緊密地聯(lián)系在一起,并確保在細(xì)胞分裂過程中染色體的正確分離。成熟卵母細(xì)胞的紡錘體對(duì)溫度變化和機(jī)械刺激極為敏感,這使得其冷凍保存過程充滿了挑戰(zhàn)。紡錘體的研究有助于揭示細(xì)胞分裂過程中的不對(duì)稱性和極化現(xiàn)象。武漢無需染色紡錘體提高冷凍保存效率

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紡錘體觀測(cè)儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道,成熟的卵母細(xì)胞含有1個(gè)極體,也就是***極體。IVF加入精子后,精子會(huì)穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子,隨著時(shí)間的推移,~6小時(shí)后卵子的紡錘體會(huì)將染色單體拉向兩極,進(jìn)而排出第二極體,再往后大約加精后9~16小時(shí),雌雄原核會(huì)出現(xiàn),而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對(duì)于那些沒有受精的卵子,到了原核出現(xiàn)的時(shí)間窗發(fā)現(xiàn)沒有受精時(shí)再去補(bǔ)救ICSI,往往錯(cuò)過了卵子的比較好受精時(shí)間,因?yàn)闆]有受精的卵子會(huì)在體外老化,即使受精,胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以,我們?cè)诩泳蟮?~6小時(shí),通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精,**的增加了那些受精障礙患者的受精率,也避免了卵子的老化。當(dāng)然,偶爾也會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤補(bǔ)救。文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救,實(shí)驗(yàn)組用紡錘體觀測(cè)儀觀察并統(tǒng)計(jì)紡錘體的數(shù)目,82.7%含有一個(gè)紡錘體,17.3%含有兩個(gè)紡錘體,并對(duì)含有一個(gè)紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI;而對(duì)照組并未用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體,只對(duì)未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,降低多原核受精比率。武漢成熟卵母細(xì)胞紡錘體價(jià)格紡錘體的異常可能導(dǎo)致染色體無法正確分離,形成多倍體或單倍體細(xì)胞。

武漢無需染色紡錘體提高冷凍保存效率,紡錘體

秋水仙素為什么會(huì)使有絲分裂的細(xì)胞停滯于中期如果用秋水仙素處理有絲分裂的細(xì)胞,紡錘體會(huì)迅速消失,細(xì)胞停滯在有絲分裂中期,染色體無法分離成兩組。用秋水仙堿進(jìn)行誘導(dǎo),從而將細(xì)胞阻斷在細(xì)胞分裂中期,也是誘導(dǎo)細(xì)胞周期同步化的重要方法之一。真核細(xì)胞周期可分為4個(gè)時(shí)期,分別是G1期、S期、G2期和M期。在細(xì)胞周期調(diào)控中主要有3個(gè)控制點(diǎn),***個(gè)控制點(diǎn)在G1期,決定細(xì)胞能否進(jìn)入S期;第二個(gè)控制點(diǎn)在G2期,決定細(xì)胞能否進(jìn)入有絲分裂期;第三個(gè)控制點(diǎn)在M期,決定細(xì)胞是否已經(jīng)準(zhǔn)備好將復(fù)制好的染色體拉向兩極。CDK(周期蛋白依賴性蛋白激酶)對(duì)細(xì)胞周期運(yùn)行起著**性調(diào)控作用,CDK與不同時(shí)期的周期蛋白結(jié)合會(huì)在特定周期起調(diào)節(jié)作用。cyclinA、cyclinB是在M期起調(diào)節(jié)功能的兩種主要周期蛋白。細(xì)胞周期運(yùn)轉(zhuǎn)到分裂中期后,在后期促進(jìn)復(fù)合物(APC)的作用下,M期cyclinA和cyclinB通過泛素化途徑迅速降解,Cdkl活性喪失,細(xì)胞周期便從M期中期向后期轉(zhuǎn)化。APC活性變化是細(xì)胞周期由分裂中期向后期轉(zhuǎn)換的關(guān)鍵因素,其活性受到多種因素的綜合調(diào)節(jié),紡錘體組裝檢查點(diǎn)是其重要的調(diào)控因素。紡錘體組裝不完全,或所有動(dòng)粒不能被動(dòng)粒微管全部捕捉,則APC不能被***。

紡錘體觀測(cè)儀的工作原理和應(yīng)用紡錘體觀測(cè)儀利用光線經(jīng)過雙折射性的物體時(shí)產(chǎn)生的光程差,對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行動(dòng)態(tài)及無創(chuàng)觀察。通過偏振光顯微鏡,可以觀察到紡錘體與細(xì)胞其他部分的對(duì)比,從而定位紡錘體的位置。這種技術(shù)可以在不傷害卵子的前提下,即時(shí)反應(yīng)細(xì)胞狀態(tài),避免在ICSI注射時(shí)損壞紡錘體?13。紡錘體觀測(cè)儀在試管嬰兒中的應(yīng)用效果?提高受精率?:使用紡錘體觀測(cè)儀可以顯著提高受精率。在觀察到紡錘體的卵子中,正常受精率***高于未觀察到紡錘體的卵子(83.3% VS 77.2%)?1。?降低多原核受精比率?:使用紡錘體觀測(cè)儀可以***降低多原核受精比率,從而提高胚胎的質(zhì)量?4。?避免紡錘體損傷?:在ICSI注射過程中,通過定位紡錘體的位置,可以避免對(duì)紡錘體的損傷,減少染色體異常的風(fēng)險(xiǎn)?13。紡錘體在細(xì)胞分裂末期逐漸解體,為細(xì)胞質(zhì)分裂做準(zhǔn)備。

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胞質(zhì)膜在動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞分裂結(jié)束時(shí),母細(xì)胞在一個(gè)被稱為“胞質(zhì)分裂”的過程中分裂成兩個(gè)子細(xì)胞和分區(qū)隔離的染色體。有絲分裂紡錘體控制胞質(zhì)膜上的“胞質(zhì)分裂”事件,但連接這兩個(gè)宏觀結(jié)構(gòu)的機(jī)制一直不清楚。MarkPetronczki及其同事提供了一個(gè)結(jié)構(gòu)和功能分析結(jié)果,他們發(fā)現(xiàn)**紡錘體蛋白(紡錘體中間區(qū)域和中間體中的一個(gè)蛋白復(fù)合物)是有絲分裂紡錘體與胞質(zhì)膜間所缺失的聯(lián)系環(huán)節(jié),這個(gè)聯(lián)系環(huán)節(jié)確保“胞質(zhì)分裂”過程的***結(jié)果。本文作者還發(fā)現(xiàn),**紡錘體蛋白的MgcRac***亞單元中的一個(gè)區(qū)域?yàn)橐粋€(gè)“系繩”,它連接到胞質(zhì)膜中的磷酸肌醇脂質(zhì)上。[4]紡錘體的功能異常可能導(dǎo)致細(xì)胞分裂錯(cuò)誤,引發(fā)遺傳疾病。香港偏光成像紡錘體Hoechst染料

紡錘體由微管組成,其動(dòng)態(tài)變化調(diào)控著細(xì)胞分裂的進(jìn)程。武漢無需染色紡錘體提高冷凍保存效率

哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞的紡錘體由微管組成,這些微管結(jié)構(gòu)精細(xì)且高度動(dòng)態(tài),對(duì)溫度、滲透壓和機(jī)械力等外界因素極為敏感。在冷凍過程中,紡錘體容易因冰晶形成、滲透壓變化或機(jī)械損傷而遭到破壞,導(dǎo)致染色體分離異常,進(jìn)而影響卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量。選擇合適的冷凍保護(hù)劑是減少紡錘體損傷的關(guān)鍵。然而,不同濃度的冷凍保護(hù)劑對(duì)紡錘體的影響各異,且不同哺乳動(dòng)物種類之間也存在差異。因此,需要通過大量實(shí)驗(yàn)來優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方,以大限度地保護(hù)紡錘體的完整性。武漢無需染色紡錘體提高冷凍保存效率

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