如何挑選適合細胞生長的胎牛血清?原代或是正常細胞株建議使用BI特級胎牛血清,對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用特級胎牛血清,或胚胎干細胞胎牛血清。由于血清有批間差異,細胞種類不同,我們建議客戶購買前可先申請試用樣品,通過篩選得到滿意的血清批號,之后根據項目需求可進行批量囤貨,以保證該項目所需血清質量的一致性,可排除不同批號血清對于實驗帶來的影響。如何正確保存胎牛血清?需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請勿超過1個月,若一次無法用完一瓶,建議將血清無菌分裝并冷凍。血清提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。杭州標準級胎牛血清多少錢
胎牛血清融化:胎牛血清在融化過程中,瓶子里冰塊的底部你會看見亮亮的蛋白絲在下沉,如同蜂蜜溶于水時的亮線,這就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔點高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。(回想一下高級冰淇淋和大棒冰的區別,你懂得!)試想,如果采用4℃過夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大約需要10小時左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此時就很容易有一些蛋白飽和析出,(大多是脂蛋白和纖連蛋白),這就是血清融化中產生沉淀的重要原因之一。杭州標準級胎牛血清多少錢倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,請不要超過一個月。
胎牛血清:解凍胎牛血清時,請按照規定的的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。解凍胎牛血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。請勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會變得混濁,同時胎牛血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響胎牛血清的質量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。
胎牛血清都有哪些重要的指標:一、內的毒性,內的毒性是革蘭氏陰性菌的細胞壁外壁層上的特有成分。當細菌死亡自溶或粘附在其它細胞時,才表現其毒性。內的毒性直接參與細胞凋亡,血清中內的毒性含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內的毒性含量過高,會直接導致細胞提前老化。國際上規定,胎牛血清的級別,應以內的毒性水平的高低來確定,其中,特級胎牛血清的內的毒性應<10EU/ml。二、血紅蛋白含量,胎牛血清的顏色會根據血紅蛋白含量的不同表現出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細胞培養用血清的標準是血紅蛋白含量不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高;反之,數值越低。實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響。這個指標的意義在于能體現出采的血過程的嚴謹規范程度,良好的操作能降低血清的溶血。血清的主要作用是提供基本營養物質、提供和各種生長因子、提供結合蛋白。
胎牛血清:胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。胎牛血清在細胞培養方面通常優于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界,與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養細胞發生交叉反應的風險也較低,是理想的細胞生長補充劑。所有胎牛血清均在當地獸醫部門的監督下從注冊的出口屠場采集,符合國際動物協會要求。血清的保存應該注意:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。杭州標準級胎牛血清多少錢
胎牛血清經自然層析、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體。杭州標準級胎牛血清多少錢
胎牛血清在細胞培養中的作用:1.提供對維持細胞指數生長的Hormone,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結合或調節它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到釋放毒性作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。7.參與細胞凍存。在細胞培養中,胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%~20%(常見為10%)的。具體到不同試驗,應依據文獻報導,或細胞類型或基礎培養基的成分來確定較佳濃度。胎牛血清應在-20℃儲存,運輸應干冰冷鏈運輸,避免反復凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優良品質。杭州標準級胎牛血清多少錢
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