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福州去外泌體胎牛血清品牌

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023年01月14日

胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、無(wú)菌檢驗(yàn)陰性。5、支原體檢驗(yàn)陰性。6、細(xì)菌內(nèi)的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒陰性。8、大腸桿菌噬菌體陰性。9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長(zhǎng)曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個(gè)/ml,細(xì)胞倍增時(shí)間≤15h克隆率≥85%。血清的主要作用是提供促接觸和生長(zhǎng)因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。福州去外泌體胎牛血清品牌

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胎牛血清融化方法:只要2.5個(gè)小時(shí),溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過(guò)程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時(shí)間,而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。血清融化過(guò)程中,蛋白質(zhì)會(huì)比水先融化。冰塊底部亮亮的細(xì)絲就是融化中的蛋白,血清在培養(yǎng)細(xì)胞中,比較重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過(guò)程中較大限度地保留因子的活性,就變得非常重要。回憶一下,細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),要保持細(xì)胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個(gè)半小時(shí),4℃過(guò)夜需要大約10個(gè)小時(shí)(冰箱一般設(shè)2-8℃,所以各實(shí)驗(yàn)室融化時(shí)間會(huì)稍有出入)。福州去外泌體胎牛血清品牌胎牛血清在無(wú)菌條件下要經(jīng)過(guò)0.1微米膜三重過(guò)濾,要進(jìn)行一系列的檢測(cè)。

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胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開(kāi)1厘米左右的切口進(jìn)行插管,插好管后打開(kāi)血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個(gè)潔凈房間內(nèi)的瓶中。采的血瓶采的血前經(jīng)干烤滅菌(180℃2小時(shí))后,按無(wú)菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時(shí)放入37℃恒溫箱備用。采的血前先晃動(dòng)瓶?jī)?nèi)生理鹽水,使其充分濕潤(rùn)瓶壁后倒出,再進(jìn)行采的血并加塞封口。將采的血后的瓶放37℃恒溫室2小時(shí),再放入4℃冷庫(kù)4小時(shí)以備離心。

胎牛血清的意義:胎牛血清是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血,豐富的生長(zhǎng)發(fā)育因子,胎牛血清非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng),胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基,胎牛血清起到為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)、支持、保護(hù)的作用。好的的胎牛血清是讓細(xì)胞“快樂(lè)成長(zhǎng)”的必備營(yíng)養(yǎng)物,但劣質(zhì)的胎牛血清,也可能會(huì)成為導(dǎo)致細(xì)胞死亡的“定時(shí)炸雷”。因此,挑選需要擦亮們的雙眼。蛋白含量,總蛋白含量:胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,可能說(shuō)明牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻入水或者其他溶劑。血紅蛋白含量:標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。免疫球蛋白:免疫球蛋白的數(shù)值能側(cè)面反映出時(shí)的牛齡情況,新生牛血清中容易檢出IgM,IgG的含量也偏高,胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。

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如何挑選好的胎牛血清:好的胎牛血清是實(shí)驗(yàn)的成功的前提是所有實(shí)驗(yàn)人做細(xì)胞培養(yǎng)的共識(shí),如何挑選好的胎牛血清,可以從以下幾個(gè)方面著手。1.外觀,好的血清應(yīng)是透明清亮,土黃色或棕黃色,無(wú)沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說(shuō)明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若棕紅色,說(shuō)明,血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說(shuō)明牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。3、血紅蛋白,標(biāo)準(zhǔn)為不高于,20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。4、pH國(guó)產(chǎn)血清,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān)。胎牛血清加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。福州去外泌體胎牛血清品牌

胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。福州去外泌體胎牛血清品牌

細(xì)胞培養(yǎng)是很多下游實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),細(xì)胞培養(yǎng)的好壞會(huì)直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功和穩(wěn)定,而胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)的主要試劑對(duì)實(shí)驗(yàn)的重要性不言而喻!胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因?yàn)樘ヅN催M(jìn)食過(guò)母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。福州去外泌體胎牛血清品牌

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