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來源: 發布時間:2022年11月07日

外泌體的分離對于理解它們的作用機制和它們在生物醫學科學中的應用是至關重要的。一些實驗室已經成功地利用諸如超離心法、超濾法、層析法、基于聚合物的沉淀法和抗體偶聯磁珠的親和捕獲等技術分離外泌體。已有研究表明,密度梯度離心法可以分離出比較純凈的外泌體。1983年外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發現,但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物。然而比較近幾年,人們發現這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質和核酸,能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能。這些發現點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。比較近的研究發現外泌體在很多生理病理上起著重要的作用。外泌體提取鑒定分離實驗平臺,認準南京英瀚斯。青??孔V的外泌體電鏡

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外泌體鑒定分為三個層面:透射電鏡(transmission electron microscope,TEM)、Nanosight粒徑、蛋白標志物。透射電鏡分辨率為0.1~0.2nm,適合外泌體雙層囊膜超微結構觀察,可觀測樣本中是否存在外泌體樣結構(通常為茶托型或一側凹陷的半球形),同時可測量外泌體大小。外泌體表面存在特異性標志物分子,如CD9、CD81、CD63等。以琳生物可以提供Western blot和流式細胞術的鑒定結果。外泌體(Exosome)參與細胞之間的交流,物質的運輸以及正常生理過程的維持、還與許多疾病息息相關。青海靠譜的外泌體電鏡外泌體檢測服務-價格低-周期短-數據清晰。

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外泌體中包含mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等多種RNA分子,不同類型細胞所分泌的外泌體包含的RNA分子不同,這些RNA分子以外泌體為載體進入靶細胞后,會通過不同的機制對靶細胞產生影響。通過高通量測序技術分析外泌體RNA分子差異,是對外泌體RNA功能研究的有效手段。英瀚斯生物在提取高純度外泌體總RNA分子基礎上,為外泌體研究提供專業高通量測序服務,采用全新文庫構建技術,可獲得mRNA、lncRNA、circRNA及miRNA等豐富信息,***提升外泌體研究深度及廣度。

外泌體提取試劑盒,市場上已出現各種商業化的外泌體提取試劑盒,有的是通過特殊設計的過濾器過濾掉雜質成分,有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進行分離純化,也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。這些試劑盒不需要特殊設備,隨著產品不斷更新換代,提取效率和純化效果逐漸提高,因而逐漸取代超速離心法并推廣開來,并可進一步從外泌體中獲得想要的蛋白質或者RNA分子,方便快速,因而受到大多數人的歡迎,并發表了不少高質量的文章!外泌體存在于人類或動物的各種體液中。

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外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是外泌體提取比較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時發現外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統一的鑒定標準,也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準備工作繁雜,耗時,量少。四是免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進行下一步的實驗。五是PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態完整,純度比較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細胞共培養和體內注射。2016.9《ScientificReports》雜志發表了該方法比較新數據,表明PS法可提取相當高純度的外泌體外泌體鑒定透射電鏡,英瀚斯生物。青海靠譜的外泌體電鏡

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外泌體是一個高度異質性的群體,具有獨特的誘導復雜生物學反應的能力。外泌體的異質性可以根據其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來概念化。這些特征的不同組合導致了外泌體的復雜異質性。外泌體可能作為細胞之間物質和信號通訊的途徑,不同的細胞通過分泌攜帶不同組分的外泌體實現細胞間通訊,這些外泌體被受體細胞吸收,通過物質交換或釋放內含物實現物質和信號的交流。例如,KRAS突變表達誘導的致*信號通過大胞飲作用促進人胰腺*細胞外泌體攝取青??孔V的外泌體電鏡

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