無血清培養基中通常需要添加一些額外的組分，才能幫助細胞貼壁生長，包括以下幾大類物質：1）促貼壁物質：一般為細胞外基質，如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子，對許多細胞的繁殖和分化，起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化，這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2）促生長因子：針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質，有些是許多細胞必不可少的，如胰島素。3）酶抑制劑：培養貼壁生長的細胞，需要用胰酶消化傳代，在無血清培養基中需含酶抑制劑，以終止酶的消化作用，達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4）結合蛋白和轉運蛋白：常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大，可增加培養基的粘度，保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無血清培養基都含有牛血清白蛋白。5）微量元素：硒是常見的。RPMI 1640 培養基含有生物素、 維生素 B12 以及 PABA，這些成分是 Eagle’s MEM 和DMEM所不具備的。廣東正規細胞培養基檢測

    1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史，細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養條件。天然培養基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基，如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優點是營養成分豐富，培養效果良好，但缺點是成分復雜，來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。河北正規細胞培養基供應商家Fischer’s培養基含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養中所必要的一種營養，但其在溶液中不安定，會自發降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞危害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定，不會自發的降解。細胞運用其機制是：在細胞培訓時，細胞會日益向培養液中獲釋一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細胞會將這兩種水解產物吸收運用。細胞運用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養方針相像，連續的將低濃度水準的L-谷氨酰胺加入到培養液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成剩余的氨，更有利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩爾的L-谷氨酰胺，適用于所有的細胞，幾乎無須適應，并且可以延長細胞的培養時間，縮減傳代次數，即節約了時間也節省了錢財。與添加L-谷氨酰胺的培養基中培訓的細胞相比之下，活性減低得更慢。延滯期稍為延長的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時間。NEAA（非須要氨基酸），是在MEM培養基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能下降細胞培育時細胞自身生產非須要氨基酸的副作用，有效性推動細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據研究需。

生物藥物生產過程中，DMEM 培養基扮演著關鍵角色。在單克隆抗體生產環節，科研人員利用 DMEM 培養基培養雜交瘤細胞，使其大量增殖并分泌高純度的單克隆抗體。在疫苗生產方面，DMEM 培養基用于培養病毒抗原，如流感疫苗生產中，通過在 DMEM 培養基中培養流感病毒，獲取足夠的病毒抗原，進而制備出安全有效的流感疫苗。此外，一些重組蛋白藥物的生產也依賴 DMEM 培養基培養的細胞，這些細胞在培養基提供的營養環境下，高效表達出具有***價值的重組蛋白，為患者帶來希望。RPMI-1640是改進型的McCoy ‘s 5A培養基，使用碳酸氫鹽緩沖系統。

    Ham’sF-12營養混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）是由Ham在1969年以Ham’sF-10營養混合物為基礎設計而成的，初用于CHO細胞的無血清培養。Ham’sF-12常作為無血清培養的基礎培養液，在低血清含量下時，特別適合單細胞培養和克隆化培養，添加血清后也廣泛應用于細胞和原代細胞的培養，如大鼠肝細胞、大鼠前列腺上皮細胞、軟骨細胞、大鼠成肌細胞、雞胚胎細胞等。此外，Ham’sF-12與DMEM等體積混合后，得到的DMEM/F12培養基營養更為豐富，使用更為較廣。NEAA（非必須氨基酸），是在MEM培養基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細胞培養時細胞自身生產非必須氨基酸的副作用，有效促進細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據研究需要，隨意調節葡萄糖的濃度，方便快捷。高糖型培養基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養以及疫苗的生產，例如利用CHO細胞表達EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養。 Leibovitz’s L-15培養基的緩沖系統由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成，代替了傳統的碳酸氫鈉緩沖系統。海南細胞培養基供應商

靈活適配血清/無血清培養，DMEM/F12助力定制化實驗方案。廣東正規細胞培養基檢測

CMRL培養基是由康諾特醫學研究室（ConnaughtMedicalResearchLaboratories）設計出來的，初用于L細胞（Earle）的無血清培養。CMRL培養基添加馬血清或小牛血清后，特別適用于猴腎細胞的克隆培養以及其他哺乳動物細胞系的培養。本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分，但不含蛋白質、脂類或任何生長因子，故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。注意事項本產品經過濾除菌，使用時應注意無菌操作，避免污染；為保持本產品的比較好使用效果，請勿進行凍融處理；本產品用于科研或進一步研究使用，不用于診斷和。廣東正規細胞培養基檢測

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