Ham’sF-12營(yíng)養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)是由Ham在1969年以Ham’sF-10營(yíng)養(yǎng)混合物為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)而成的,初用于CHO細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)。Ham’sF-12常作為無(wú)血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液,在低血清含量下時(shí),特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),添加血清后也廣泛應(yīng)用于細(xì)胞和原代細(xì)胞的培養(yǎng),如大鼠肝細(xì)胞、大鼠前列腺上皮細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、大鼠成肌細(xì)胞、雞胚胎細(xì)胞等。此外,Ham’sF-12與DMEM等體積混合后,得到的DMEM/F12培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)更為豐富,使用更為較廣。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需要,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長(zhǎng)快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。 MEM培養(yǎng)基含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,主用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),修改后也可用于其他細(xì)胞培養(yǎng)。海南正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)
1.細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,參與細(xì)胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強(qiáng),適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來(lái)自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點(diǎn)是營(yíng)養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜,來(lái)源受限且制作過(guò)程復(fù)雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。江蘇iclean細(xì)胞培養(yǎng)基檢測(cè)Ham’s F-12常作為無(wú)血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液,添加血清后也廣泛應(yīng)用于ai細(xì)胞和原代細(xì)胞的培養(yǎng)。
Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),同時(shí),用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成,有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定,適合用于非CO2平衡環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細(xì)胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代(如胚胎和成人組織)細(xì)胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營(yíng)養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會(huì)自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。
DMEM 培養(yǎng)基具備多種實(shí)用配方,以滿足不同細(xì)胞的生長(zhǎng)需求。其中,高糖型(葡萄糖濃度 4500mg/L)和低糖型(葡萄糖濃度 1000mg/L)為常見(jiàn)。高糖型 DMEM 培養(yǎng)基猶如為代謝旺盛的細(xì)胞量身定制,為其提供充足的能量來(lái)源,促使細(xì)胞快速生長(zhǎng)、增殖,尤其適用于像腫瘤細(xì)胞這類生長(zhǎng)迅猛、對(duì)能量需求高的細(xì)胞。而低糖型 DMEM 培養(yǎng)基則更契合代謝較為緩慢的細(xì)胞,為它們營(yíng)造溫和穩(wěn)定的生長(zhǎng)環(huán)境,保障細(xì)胞正常代謝與功能維持,在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,科研人員可依據(jù)細(xì)胞特性靈活選用合適配方。RPMI 1640 培養(yǎng)基含有生物素、 維生素 B12 以及 PABA,這些成分是 Eagle’s MEM 和DMEM所不具備的。
Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營(yíng)養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進(jìn)型,在Ham’sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞。針對(duì)***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,**適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn),研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時(shí)(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測(cè)。此外,一些無(wú)血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為預(yù)防微生物污染**常用的***,其中,青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,對(duì)革蘭陽(yáng)性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成,對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌均有效,但對(duì)革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染。 針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。浙江RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠
TNM-FH昆蟲培養(yǎng)基不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長(zhǎng)因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無(wú)血清添加物使用。海南正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)
Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營(yíng)養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進(jìn)型,在Ham’sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞。針對(duì)較廣的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營(yíng)養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會(huì)自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。 海南正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)
深圳市華晨陽(yáng)科技有限公司是一家致力于核酸檢測(cè)、分子診斷、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、病毒檢測(cè)等產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體的國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)。公司擁有二十多項(xiàng)專利,部分專利已經(jīng)轉(zhuǎn)化應(yīng)用于市場(chǎng)。產(chǎn)品主要應(yīng)用于基因檢測(cè)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、生物制藥、大型甲等醫(yī)院、出入境檢驗(yàn)檢疫、診斷試劑、疾控機(jī)構(gòu)、刑偵法醫(yī)鑒定等。近年來(lái),公司不斷加大自主研發(fā)投入,積極引進(jìn)人才和技術(shù),并與國(guó)內(nèi)外多家科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所以及三甲醫(yī)院、基因檢測(cè)公司、疾病預(yù)防控制中心等科研機(jī)構(gòu)有著緊密合作,促進(jìn)人類健康產(chǎn)業(yè)大發(fā)展。
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