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GMP糖尿病細胞模型流氏分析和免疫熒光分析

來源: 發布時間:2024年12月07日

Humancelldesign(HCD)開發了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong Liu產生功能的人類β細胞系。在胰島素啟動子的控制下,用表達SV40LT的慢病毒載體轉導人類胎兒胰腺芽。然后將轉導的芽移植到SCID小鼠體內,使其發育成成熟的胰腺組織。分化后,新形成的表達sv40lt的β細胞增殖并形成胰島素瘤。然后用人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)轉導β細胞,移植到其他SCID小鼠體內,在體外擴增生成細胞系。其中一種細胞系,EndoC-βH1,表達了許多β細胞特異性標記,而沒有任何其他胰腺細胞類型標記的實質性表達。在葡萄糖或其他胰島素分泌劑的刺激下,細胞分泌胰島素,細胞移植逆轉了化學誘導的小鼠糖尿病。更多關于Human Cell Design相關產品信息,歡迎咨詢AlibioBuy!表達 EndoC-BH5 的 HLA-A2 重新利用抗yan藥物或發現 I 類抗原肽加工和呈遞的抑制劑,其細胞因子反應與原發性類似。GMP糖尿病細胞模型流氏分析和免疫熒光分析

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Humancelldesign(HCD)開發了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong Liu產生功能的人類β細胞系。在胰島素啟動子的控制下,用表達SV40LT的慢病毒載體轉導人類胎兒胰腺芽。然后將轉導的芽移植到SCID小鼠體內,使其發育成成熟的胰腺組織。分化后,新形成的表達sv40lt的β細胞增殖并形成胰島素瘤。然后用人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)轉導β細胞,移植到其他SCID小鼠體內,在體外擴增生成細胞系。其中一種細胞系,EndoC-βH1,表達了許多β細胞特異性標記,而沒有任何其他胰腺細胞類型標記的實質性表達。在葡萄糖或其他胰島素分泌劑的刺激下,細胞分泌胰島素,細胞移植逆轉了化學誘導的小鼠糖尿病。更多產品信息,歡迎咨詢AlibioBuy!藥物開發使用糖尿病細胞模型操作指南怎么開展糖尿病研究?

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人源胰島B細胞模型對于與胰島相關的代謝疾病研究,包括尿病,糖尿病炎癥, 針對GLP-1R的Exendin4等類似藥物開發有重要作用。通過干細胞誘導B細胞產生的胰島B細胞存在純度較低,缺乏成熟胰島B細胞功能等問題。道過捐贈組織的胰腺B細胞提取,存在供應量較低,明顯批次效應,耗時較長等問題。使用糖尿病動物模型進行研究會比糖尿病細胞模型成本更高昂,周期更長。Human cell design 構建了EndoC-BH1,En-doC-BH3,EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2〖ndoC-βH5等一系列的胰島R細胞模型。通過多輪次優化改良,獲得的功能胰牌B細胞,無限接近天然人源胰島B細胞,其胰島素分泌功能與天然細胞類似,基于PDX1/KX6.1關鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上(左圖),在2.8nand11 my葡萄糖劑量下表現出10倍的胰島素分泌反應(右圖),對GLP-1R激動劑,Exendin4刺激產生明細那反饋,且可實現批量化生成,實現穩定供應。

在EndoC-βH5細胞中檢測到所有對β細胞身份和功能重要的轉錄因子的表達。與成人b細胞相比,EndoC-βH5細胞中的表達水平相似(FOXA2、MNX1、NKX2.2)或更高(HOPX、MAFB、NEUROD1、PAX6、PDX1)。GLIS3、NKX6.1和MAFA在EndoC-βH5細胞中以較低水平表達EndoC-βH5細胞中表達與胰島素分泌相關的受體,包括腎上腺素(ADRA2A)、脂肪酸(FFAR1、FFAR3)、GABA(GABRB3)、胰haoxuetang素(GCGR)、生長抑素(SSTR2)和腸jiangxuetang素受體,例如胰gaoxuetang素樣受體肽-1(GLP1R)和胃抑制多肽(GIPR)。重要的是,EndoC-βH5細胞中的GLP1R、GIPR和GCGR比EndoC-bH1細胞中更豐富.糖尿病細胞模型可用于胰島B細胞的靶標識別和炎癥研究。

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EndoC-βH1使用慢病毒介導的基因轉移從人類胎兒胰腺中產生功能性β細胞,這些胰腺處于發育的早期階段,即9至11周,這段時間與β細胞分化的開始相吻合(33)。整合的轉基因SV40LT受大鼠胰島素啟動子控制,在胰島素陽性細胞中特異性表達。通過使用這種靶向方法,SV40LT在新形成的β細胞中表達,同時這些細胞頭次產生胰島素。因此,我們成功地模仿了用于產生功能性嚙齒動物β細胞系的轉基因方法(7,8,34),用于從人胎兒胰腺中開發功能性人β細胞系統.表達 EndoC-BH5 的 HLA-A2表示了免疫學研究的一個有價值的模型和潛在篩選平臺。EndoC-BH1糖尿病細胞模型參考文獻

糖尿病細胞模型—EndoC-BH5 細胞響應葡萄糖以動態方式分泌胰島素,并且 GIP 和 GLP-1 類似物進一步增強分泌。GMP糖尿病細胞模型流氏分析和免疫熒光分析

HCD是通過將人類胎兒胰腺芽移植到SCID小鼠的腎被膜下進行β細胞系的構建的。通過多輪次優化改良,獲得的功能胰腺β細胞,無限接近天然人源胰島β細胞,其胰島素分泌功能與天然細胞類似,基于PDX1/NKX6.1關鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上,在2.8mM和11mM葡萄糖劑量下表現出10倍的胰島素分泌反應,對GLP-1R激動劑、Exendin-4刺激產生明顯增強,且可實現批量化生成,實現穩定供應。Human cell design成立于 2001年,專注于人源細胞模型開發,以助力科研和生物醫藥企業的發展。其中可作為糖尿病細胞模型的EndoC-BH5,EndoC-BH3,EndoC-BH1等人源胰島B細胞為其優勢產品。更多產品信息,歡迎咨詢AlibioBuy!GMP糖尿病細胞模型流氏分析和免疫熒光分析

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