外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調節外泌體膜與受體細胞的融合,有文獻報道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現于早期以及回收的核內體中,RAB7 和 RAB9主要出現于晚期的核內體?,F有大量的研究發現外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯蛋白(包括膜聯蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸的四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9))、熱休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33(結腸上皮細胞來源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源)、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素(不成熟的樹突狀細胞)。外泌體研究整體解決方案_英瀚斯生物。山西值得信賴的外泌體價格
外泌體由細胞在正常和病理條件下釋放。攜帶幾種類型的貨物分子,如核酸和蛋白質,因此,被認為是至關重要的生物標志物的發現對于臨床診斷。載有腫瘤特異性RNA的外泌體被用作**診斷的生物標志物,外泌體蛋白被認為是多種疾病的潛在生物標志物,包括**、肝臟疾病和腎臟疾病。它們含有多種生物標志物,如TSG101、帶電荷的多泡體蛋白2a(CHMP2A)、RAS相關蛋白Rabb-11b(RAB11B)、CD63和CD81蛋白和脂類,包括膽固醇、鞘磷脂、神經酰胺和磷脂酰絲氨酸。外泌體的大分子成分在細胞功能和病理狀態中發揮重要作用,如炎癥、免疫反應、血管生成、細胞死亡、神經退行性疾病和**。浙江專業的外泌體電鏡不容錯過的外泌體(Exosome)研究方法,南京英瀚斯生物。
外泌體和微囊泡的區別在于其生成的方式不同。從晚期內體來源產生的細胞外囊泡稱為外泌體,從細胞膜直接出芽產生的細胞外囊泡稱為微囊泡。二者的大小也有所不同,外泌體的粒子直徑在40~100nm范圍,微囊泡的粒子直徑在100~1,000nm,但有報道發現也存在直徑較小的微囊泡,所以無法明確從粒子大小來區分二者。外泌體是健康細胞和*細胞均可釋放的小膜泡,***存在于人體的血液、乳汁、尿液以及唾液等多種體液中,其種類和數量與機體的生理狀態息息相關。
外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是外泌體提取比較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時發現外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統一的鑒定標準,也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準備工作繁雜,耗時,量少。四是免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進行下一步的實驗。五是PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態完整,純度比較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細胞共培養和體內注射。2016.9《ScientificReports》雜志發表了該方法比較新數據,表明PS法可提取相當高純度的外泌體外泌體檢測服務,一站式生物外泌體檢測服務平臺。
外泌體的臨床應用:1.在疾病診斷中的應用潛能:外泌體存在于所有的生物體液中,并由所有細胞分泌,這使得外泌體在液體活檢中具有吸引力,可用于縱向取樣跟蹤疾病進展。外泌體的生物發生可以捕獲復雜的細胞外和細胞內分子,可用于***的、多參數的診斷檢測。外泌體的表面蛋白也有助于其免疫捕獲和富集。外泌體診斷應用的重點疾病包括心血管病、影響***系統的疾病和**。這項努力正在迅速擴展到肝臟、腎臟和肺部的其他疾病。2.在疾病***中的應用潛能:外泌體向病變細胞運送功能物質的特性有利于它們作為***載體。與脂質體相比,外泌體的免疫***率低。此外外泌體已被證實且具有良好的耐受性,無明顯副作用外泌體組學_外泌體測序 南京英瀚斯生物。重慶專門做外泌體價格
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外泌體表面有其特異性標記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以***普及。外泌體是大多數細胞分泌的40 - 150nm的膜泡,存在于細胞培養基、血漿、血清、唾液、尿液、羊水和惡性腹水等生物液體中。外泌體檢測可找英瀚斯生物,測序、電鏡、粒徑分析都可做。山西值得信賴的外泌體價格