然后將轉導的芽移植到SCID小鼠體內，使其發育成成熟的胰腺組織。分化后，新形成的表達sv40lt的β細胞增殖并形成胰島素瘤。然后用人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)轉導β細胞，移植到其他SCID小鼠體內，在體外擴增生成細胞系。其中一種細胞系，EndoC-βH1，表達了許多β細胞特異性標記，而沒有任何其他胰腺細胞類型標記的實質性表達。在葡萄糖或其他胰島素分泌劑的刺激下，細胞分泌胰島素，細胞移植逆轉了化學誘導的小鼠糖尿病。Human cell design 構建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。糖尿病細胞模型—EndoC-BH5 細胞是 EndoC-BH 細胞家族中的較新細胞。高質量糖尿病細胞模型開展葡萄糖脂毒性研究

Humancelldesign（HCD）通過將永生化轉基因hTERT和SV40大T以及單純皰疹病毒-1胸苷激酶整合基因轉移至人胎兒胰腺中，產生EndoC-βH5細胞。擴增后使用CRE ji huo去除永生化轉基因，并使用更昔洛韋消除剩余的未切除細胞，所得細胞作為可立即使用的EndoC-βH5細胞進行分發。EndoC-βH5已經成功進行了轉錄組、免疫學和的功能測定。即用型EndoC-βH5細胞顯示出高效的葡萄糖依賴性胰島素分泌。歐洲四個du li實驗室觀察并再現了強勁的10倍胰島素分泌指數。EndoC-βH5細胞響應葡萄糖以動態方式分泌胰島素。GLP1R和GIPR介導的信號增強葡萄糖刺激EndoC-βH5細胞的胰島素分泌。進口糖尿病細胞模型法國生物醫學局批準糖尿病細胞模型EndoC-BH5 細胞以 1e2 105 細胞/孔接種到 BCoat包被的8 孔 IBIDI 室載玻片上。

HCD 的科學家們通過不斷的實驗和優化，成功開發出了一系列高效的人源胰島β細胞模型。這些模型不僅在胰島素分泌方面表現出色，還能夠在不同的實驗條件下穩定生長，為研究人員提供了可靠的實驗工具。HCD 的細胞模型已經在全球多個實驗室中被廣泛應用，為糖尿病研究和治療帶來了新的可能。HumanCellDesign的EndoC-BH5細胞系通過先進的基因編輯技術，成功模擬了天然胰島細胞的功能和結構。這些細胞不僅能夠在高葡萄糖環境下表現出胰島素分泌反應，還能夠響應不同的胰島素刺激劑，模擬人體胰島細胞的生理狀態。這些細胞模型為科學家們提供了寶貴的研究資源，推動了糖尿病研究的進展。

在胰島細胞刺激中，基礎和高D-葡萄糖條件之間的刺激指數為11.6±1.8。通過應用不引起胰島素分泌的L-葡萄糖(20mM)或完全阻斷D-葡萄糖誘導的鉀通道開放劑二氮嗪(100mM)，驗證了胰島素分泌對D-葡萄糖的特異性。胰島素分泌以D-葡萄糖濃度依賴性方式增加，從0mMD-葡萄糖時的68.827.3增加到16.7mMD-葡萄糖時的679.2±39.5ng/h/10⁶細胞。胰島素分泌增加Zui快的是5.5至8mMD-葡萄糖，分別有204.7±51.3和414.9±94.8ng/h/10⁶細胞。Human cell design 構建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。通過多輪次優化改良，獲得的功能胰腺B細胞，無限接近天然人源胰島B細胞，其胰島素分泌功能與天然細胞類似，基于PDX1/NKX6.1關鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上（左圖），在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現出10倍的胰島素分泌反應（右圖），對GLP-1R激動劑， Exendin4刺激產生明細那反饋， 且可實現批量化生成，實現穩定供應。法國Human cell design專注于糖尿病細胞模型研究，提供接近于天然胰島細胞的胰島細胞系。

HumanCellDesign構建了EndoC-BH1、EndoC-BH3、EndoC-βH5、GLTxEndoC-βH5、HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。通過多輪次優化改良，獲得的功能胰腺B細胞，無限接近天然人源胰島B細胞，其胰島素分泌功能與天然細胞類似，基于PDX1/NKX6.1關鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上，在2.8mM和11mM葡萄糖劑量下表現出10倍的胰島素分泌反應，對GLP-1R激動劑、Exendin-4刺激產生明顯增強，且可實現批量化生成，實現穩定供應。此外，HumanCellDesign開發系列人源胰島B細胞模型EndoC-BH5的同時，開發了配套的細胞培養試劑，可用于細胞培養和后續相關實驗。GLP1R 和 GIPR 介導的信號增強葡萄糖刺激 EndoC-BH5 細胞的胰島素分泌。廣東EndoC-bH細胞家族糖尿病細胞模型

EndoC-BH1 和增殖的 EndoC-BH5 細胞分別在 Opti-B1 和 Ulti-b1 培養基中的 BCoat涂層塑料板上培養。高質量糖尿病細胞模型開展葡萄糖脂毒性研究

EndoC-βH5細胞是一種新型人類胰腺β細胞解決方案，可用于開發人類糖尿病模型以及藥物篩選和驗證平臺，產生流程為：DNA構建，慢病毒載體產生，人胎兒胰腺外植體與pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒載體共轉導，移植到SCID小鼠的腎囊下，導致八個月后形成胰島素瘤，從而獲得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5細胞分別在Opti-β1和Ulti-b1培養基中的βCoat涂層塑料板上培養。使用胰蛋白酶（0.05%）每7天繁殖一次細胞。流式細胞術分析表明所有EndoC-βH5細胞均呈胰島素陽性，并且在絕大多數細胞中檢測到PDX1和NK6.1表達（分別為92.3%和90%）。EndoC-βH5細胞在涂層塑料上形成小的貼壁簇。高質量糖尿病細胞模型開展葡萄糖脂毒性研究