Human Cell Design 開發(fā)了創(chuàng)新且安全的人類β細(xì)胞系生產(chǎn)方法。首先，將每個轉(zhuǎn)導(dǎo)的人類胎兒胰腺芽移植到 2 或 3 只 SCID 小鼠的腎被膜下，因為該部位是人類胰腺發(fā)育的允許部位。在 6 到 8 個月內(nèi)，所有移植的小鼠都發(fā)生了原發(fā)性胰島素瘤，這導(dǎo)致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比，原發(fā)性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發(fā)性胰島素瘤中這些高度血管化的區(qū)域分離，用在大鼠胰島素啟動子控制下表達(dá) hTERT 的慢病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)，并移植到其他 SCID 小鼠中。這些小鼠在 2 至 3 個月內(nèi)出現(xiàn)低血糖，胰島素陽性細(xì)胞大量擴(kuò)增。這種體內(nèi)擴(kuò)增有助于維持大量增殖的胰島素細(xì)胞，并允許定義允許的培養(yǎng)條件，在這種條件下，可以在體外建立永生化細(xì)胞系。Human Cell Design（HCD）開發(fā)了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong Liu產(chǎn)生功能的人類β細(xì)胞系。在胰島素啟動子的控制下，用表達(dá) SV40LT 的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)人類胎兒胰腺芽。糖尿病細(xì)胞模型EndoC-BH5 細(xì)胞以穩(wěn)健且可重復(fù)的方式分泌胰島素以響應(yīng)葡萄糖刺激。Human cell design（HCD）糖尿病細(xì)胞模型一站式采購

糖尿病細(xì)胞模型應(yīng)用概括如下：1、細(xì)胞因子介導(dǎo)的糖尿病炎癥反應(yīng)（一/二型糖尿病）：胰島β細(xì)胞保護(hù)機(jī)制研究，胰島β細(xì)胞炎癥反應(yīng)研究，誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞炎癥反應(yīng)化合物篩選2、T細(xì)胞介導(dǎo)的胰島細(xì)胞殺傷實驗（一型糖尿?。阂葝uβ細(xì)胞保護(hù)機(jī)制研究，T細(xì)胞抑制機(jī)制，β細(xì)胞和T細(xì)胞作用機(jī)制研究3、葡萄糖脂毒性研究:胰島β細(xì)胞鑒定marker，胰島β細(xì)胞功能性marker，胰島β細(xì)胞糖脂化合物研究4、篩選胰島素分泌促進(jìn)藥物：促胰島素分泌藥物篩選，功能機(jī)制研究，干細(xì)胞zhi liao糖尿病參照對比5、基于高通量篩選的siRNA靶標(biāo)驗證和篩選：高通量胰島β細(xì)胞靶點鑒定和篩選，糖尿病疾病模型構(gòu)建，促胰島素分泌藥物篩選6、干細(xì)胞zhi liao糖尿?。簠⒄諏Ρ壬綎|胰島制劑糖尿病細(xì)胞模型糖尿病細(xì)胞模型EndoC-BH5 細(xì)胞以 1e2 105 細(xì)胞/孔接種到 BCoat包被的8 孔 IBIDI 室載玻片上。

在胰島細(xì)胞刺激中，基礎(chǔ)和高D-葡萄糖條件之間的刺激指數(shù)為11.6±1.8。通過應(yīng)用不引起胰島素分泌的L-葡萄糖(20mM)或完全阻斷D-葡萄糖誘導(dǎo)的鉀通道開放劑二氮嗪(100mM)，驗證了胰島素分泌對D-葡萄糖的特異性。胰島素分泌以D-葡萄糖濃度依賴性方式增加，從0mMD-葡萄糖時的68.827.3增加到16.7mMD-葡萄糖時的679.2±39.5ng/h/10⁶細(xì)胞。胰島素分泌增加Zui快的是5.5至8mMD-葡萄糖，分別有204.7±51.3和414.9±94.8ng/h/10⁶細(xì)胞。Human cell design 構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細(xì)胞模型。通過多輪次優(yōu)化改良，獲得的功能胰腺B細(xì)胞，無限接近天然人源胰島B細(xì)胞，其胰島素分泌功能與天然細(xì)胞類似，基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗證的細(xì)胞均一性達(dá)到90%以上（左圖），在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(yīng)（右圖），對GLP-1R激動劑， Exendin4刺激產(chǎn)生明細(xì)那反饋， 且可實現(xiàn)批量化生成，實現(xiàn)穩(wěn)定供應(yīng)。

HCD是通過將人類胎兒胰腺芽移植到SCID小鼠的腎被膜下進(jìn)行β細(xì)胞系的構(gòu)建的。通過多輪次優(yōu)化改良，獲得的功能胰腺β細(xì)胞，無限接近天然人源胰島β細(xì)胞，其胰島素分泌功能與天然細(xì)胞類似，基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗證的細(xì)胞均一性達(dá)到90%以上，在2.8mM和11mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(yīng)，對GLP-1R激動劑、Exendin-4刺激產(chǎn)生明顯增強(qiáng)，且可實現(xiàn)批量化生成，實現(xiàn)穩(wěn)定供應(yīng)。Human cell design成立于 2001年，專注于人源細(xì)胞模型開發(fā)，以助力科研和生物醫(yī)藥企業(yè)的發(fā)展。其中可作為糖尿病細(xì)胞模型的EndoC-BH5,EndoC-BH3,EndoC-BH1等人源胰島B細(xì)胞為其優(yōu)勢產(chǎn)品。糖尿病細(xì)胞模型人源胰島B細(xì)胞已經(jīng)進(jìn)行了功能性驗證。

EndoC-βH1細(xì)胞移植到小鼠體內(nèi)可以逆轉(zhuǎn)化學(xué)誘導(dǎo)的糖尿病，EndoC-βH1細(xì)胞每百萬細(xì)胞含有0.48μg胰島素，至少80代穩(wěn)定表達(dá)許多特異性β細(xì)胞標(biāo)記物，沒有任何其他胰腺細(xì)胞類型標(biāo)記物的大量表達(dá)。EndoC-βH1有潛力成為深入研究人類β細(xì)胞和藥物篩選的獨特工具，同時也是測試糖尿病替代細(xì)胞療法的有用臨床前模型。糖尿病細(xì)胞模型，EndoC-βH1、EndoC-βH3、EndoC-βH5等細(xì)胞dai biao了大規(guī)模藥物發(fā)現(xiàn)的獨特工具，為糖尿病細(xì)胞替代療法提供了臨床前模型。表達(dá) EndoC-BH5 細(xì)胞的修飾 HLA-A2 引發(fā)特異性 A2 同種異體反應(yīng)性 CD8 T 細(xì)胞。全球糖尿病細(xì)胞模型胰腺B細(xì)胞基因特異性表達(dá)

糖尿病細(xì)胞模型可用于胰島B細(xì)胞增殖、分化、去分化、凋亡研究。Human cell design（HCD）糖尿病細(xì)胞模型一站式采購

EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等細(xì)胞可在體外在葡萄糖劑量刺激下產(chǎn)生正常的胰島素分泌反應(yīng)，對GLP-1R/GLP-1等胰島素刺激因子產(chǎn)生正常響應(yīng)，可以響應(yīng)細(xì)胞因子刺激，表達(dá)HLA-A2等T細(xì)胞受體，因此可用于糖尿病炎癥相關(guān)等多種藥物開發(fā)實驗。EndoC-BH5細(xì)胞可批量穩(wěn)定生產(chǎn)，因此可以進(jìn)行基于siRNA的高通量篩選研究中，用于鑒定出潛在的2型糖尿病藥物靶點。另外，Humancelldesign根據(jù)法國生物倫理立法收集人類胎兒組織，獲得法國生物醫(yī)學(xué)局（巴黎）的批準(zhǔn)，批準(zhǔn)號為PFS08-005。Human cell design（HCD）糖尿病細(xì)胞模型一站式采購