HumanCellDesign構建了EndoC-BH1、EndoC-BH3、EndoC-βH5、GLTxEndoC-βH5、HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。通過多輪次優化改良,獲得的功能胰腺B細胞,無限接近天然人源胰島B細胞,其胰島素分泌功能與天然細胞類似,基于PDX1/NKX6.1關鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上,在2.8mM和11mM葡萄糖劑量下表現出10倍的胰島素分泌反應,對GLP-1R激動劑、Exendin-4刺激產生明顯增強,且可實現批量化生成,實現穩定供應。此外,HumanCellDesign開發系列人源胰島B細胞模型EndoC-BH5的同時,開發了配套的細胞培養試劑,可用于細胞培養和后續相關實驗。EndoC-BH1 和增殖的 EndoC-BH5 細胞分別在 Opti-B1 和 Ulti-b1 培養基中的 BCoat涂層塑料板上培養。GLTx糖尿病細胞模型無菌環境操作
Human cell design成立于 2001年,總部位于法國,專注于人源細胞模型開發,以助力科研和生物醫藥企業的發展。其中可作為糖尿病細胞模型的EndoC-BH5,EndoC-BH3,EndoC-BH1等人源胰島B細胞為其優勢產品,這些人源胰島B細胞誘導產生的胰島素接近于天然胰島細胞分泌的胰島素量。人源胰島B細胞模型構建技術性文章早期發表于2011年,相關文章總引用量達到600+,人源胰島B細胞模型已經被全球200多家生物醫藥和生命科研機構作為糖尿病細胞模型使用。Human cell design(HCD)糖尿病細胞模型強大且永生化全世界有超過 5 億成年人患有糖尿病,糖尿病細胞模型可用于研究胰腺內分泌細胞功能、糖尿病機制和研究策略。
糖尿病細胞模型應用概括如下:1、細胞因子介導的糖尿病炎癥反應(一/二型糖尿病):胰島β細胞保護機制研究,胰島β細胞炎癥反應研究,誘導胰島β細胞炎癥反應化合物篩選2、T細胞介導的胰島細胞殺傷實驗(一型糖尿病):胰島β細胞保護機制研究,T細胞抑制機制,β細胞和T細胞作用機制研究3、葡萄糖脂毒性研究:胰島β細胞鑒定marker,胰島β細胞功能性marker,胰島β細胞糖脂化合物研究4、篩選胰島素分泌促進藥物:促胰島素分泌藥物篩選,功能機制研究,干細胞zhi liao糖尿病參照對比5、基于高通量篩選的siRNA靶標驗證和篩選:高通量胰島β細胞靶點鑒定和篩選,糖尿病疾病模型構建,促胰島素分泌藥物篩選6、干細胞zhi liao糖尿病:參照對比
根據從嚙齒動物β細胞獲得的數據來看,葡萄糖轉運蛋白SLC2A2頭次被認為是葡萄糖感知的主要決定因素,而后來的研究表明,葡萄糖激酶(GLK)是主要決定因素。在人類β細胞中,GLK被認為是葡萄糖感知的主要決定因素。為了克服這些限制,在HumanCellDesign中生成了新的β細胞系。EndoC-βH1是通過將表達SV40LT的慢病毒載體轉導到人類胎兒胰腺芽中來開發的。隨后將轉導的芽移植到SCID小鼠體內,生成的表達SV40LT的細胞增殖并形成胰島素瘤。EndoC-B h1是一種永生細胞系,可進行反復的復蘇凍融,有效節約成本。
在EndoC-βH5細胞中檢測到所有對β細胞身份和功能重要的轉錄因子的表達。與成人b細胞相比,EndoC-βH5細胞中的表達水平相似(FOXA2、MNX1、NKX2.2)或更高(HOPX、MAFB、NEUROD1、PAX6、PDX1)。GLIS3、NKX6.1和MAFA在EndoC-βH5細胞中以較低水平表達EndoC-βH5細胞中表達與胰島素分泌相關的受體,包括腎上腺素(ADRA2A)、脂肪酸(FFAR1、FFAR3)、GABA(GABRB3)、胰hao xue tang素(GCGR)、生長抑素(SSTR2)和腸jiang xue tang素受體,例如胰gao xue tang素樣受體肽-1(GLP1R)和胃抑制多肽(GIPR)。重要的是,EndoC-βH5細胞中的GLP1R、GIPR和GCGR比EndoC-bH1細胞中更豐富。IFNg 和 IL1b 處理細胞 24 小時后進行 RNA-seq 以檢查 EndoC-BH5 細胞對細胞因子的反應性。GMP糖尿病細胞模型功能性驗證
糖尿病細胞模型怎么進行細胞復蘇?GLTx糖尿病細胞模型無菌環境操作
人原代β細胞的可用性有限,從人胰島制劑中純化β細胞具有挑戰性。在嚙齒類動物中,β細胞系自20世紀70年代初以來就已經可用,并且在研究β細胞功能方面非常有用。然而,嚙齒動物的β細胞并不是研究人類β細胞的理想選擇,因為人類和嚙齒動物的β細胞在許多方面彼此不同。例如,在嚙齒類動物中,胰島素由2個基因編碼,而在人類中,只有1個基因編碼。嚙齒動物和人類β細胞的功能差異是由于葡萄糖轉運和磷酸化在葡萄糖感知中的相對作用不同。GLTx糖尿病細胞模型無菌環境操作