Human Cell Design 開發了創新且安全的人類β細胞系生產方法。首先,將每個轉導的人類胎兒胰腺芽移植到 2 或 3 只 SCID 小鼠的腎被膜下,因為該部位是人類胰腺發育的允許部位。在 6 到 8 個月內,所有移植的小鼠都發生了原發性胰島素瘤,這導致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比,原發性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發性胰島素瘤中這些高度血管化的區域分離,用在大鼠胰島素啟動子控制下表達 hTERT 的慢病毒進行轉導,并移植到其他 SCID 小鼠中。這些小鼠在 2 至 3 個月內出現低血糖,胰島素陽性細胞大量擴增。這種體內擴增有助于維持大量增殖的胰島素細胞,并允許定義允許的培養條件,在這種條件下,可以在體外建立永生化細胞系。Human Cell Design(HCD)開發了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong Liu產生功能的人類β細胞系。在胰島素啟動子的控制下,用表達 SV40LT 的慢病毒載體轉導人類胎兒胰腺芽。糖尿病研究中較好的胰島B細胞模型?即用型功能性B細胞糖尿病細胞模型廠家直采且穩定供應
HumanCellDesign構建了EndoC-BH1、EndoC-BH3、EndoC-βH5、GLTxEndoC-βH5、HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。通過多輪次優化改良,獲得的功能胰腺B細胞,無限接近天然人源胰島B細胞,其胰島素分泌功能與天然細胞類似,基于PDX1/NKX6.1關鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上,在2.8mM和11mM葡萄糖劑量下表現出10倍的胰島素分泌反應,對GLP-1R激動劑、Exendin-4刺激產生明顯增強,且可實現批量化生成,實現穩定供應。此外,HumanCellDesign開發系列人源胰島B細胞模型EndoC-BH5的同時,開發了配套的細胞培養試劑,可用于細胞培養和后續相關實驗。進口糖尿病細胞模型胰腺B細胞基因特異性表達糖尿病細胞模型EndoC-BH5 細胞聚集并形成球體,這些球體是大小和形狀均質。
EndoC-βH5細胞dai biao了一種獨特的可儲存且隨時可用的人類胰腺β細胞模型,具有高度穩健和可重復的特征。因此,此類細胞與β細胞功能的研究、新藥的篩選和驗證以及疾病模型的開發相關。RNAseq研究已經證實了β細胞轉錄因子和功能標記物(包括腸促胰島素受體)的豐富表達,并且細胞因子誘導炎癥途徑以及抗原加工和呈遞的基因表達特征。同時表達EndoC-βH5細胞的修飾HLA-A2可以引發特異性A2同種異體反應性CD8T細胞ji huo。Human cell design 構建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。
EndoC-βH5細胞是一種新型人類胰腺β細胞解決方案,可用于開發人類糖尿病模型以及藥物篩選和驗證平臺,產生流程為:DNA構建,慢病毒載體產生,人胎兒胰腺外植體與pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒載體共轉導,移植到SCID小鼠的腎囊下,導致八個月后形成胰島素瘤,從而獲得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5細胞分別在Opti-β1和Ulti-b1培養基中的βCoat涂層塑料板上培養。使用胰蛋白酶(0.05%)每7天繁殖一次細胞。流式細胞術分析表明所有EndoC-βH5細胞均呈胰島素陽性,并且在絕大多數細胞中檢測到PDX1和NK6.1表達(分別為92.3%和90%)。EndoC-βH5細胞在涂層塑料上形成小的貼壁簇。EndoC-B h1表達了許多B細胞特異性標記,而沒有任何其他胰腺細胞類型標記的實質性表達。
HCD利用人胎兒胰腺組織中的靶向Zhong Liu發生開發了永生化人β細胞系,其中使用慢病毒載體整合了兩個轉基因,SV40大T抗原(SV40-LT)和人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)兩種轉基因均在β細胞特異性大鼠胰島素啟動子(RIP)的控制下表達。***代細胞,名為EndoC-βH1,以組成型方式表達SV40LT和hTERT,而在第二代EndoC-βH2和EndoC-βH3中,這些轉基因可在loxP介導的CRE重組后被切除,位點位于慢病毒骨架的3'LTR。EndoC-βH5細胞是通過使用表達可切除的SV40LT和hTERT的慢病毒載體對人胎兒胰腺進行靶向Zhong Liu發生而獲得的。EndoC-BH1細胞每百萬細胞含有0.48 μg胰島素。陜西糖尿病細胞模型中國區總代理商
全球200+學術與制藥實驗室測試和批準了Huamn cell design(HCD)的糖尿病細胞模型。即用型功能性B細胞糖尿病細胞模型廠家直采且穩定供應
Human Cell Design 的產品不僅限于人源胰島β細胞模型,還包括各種配套的細胞培養試劑和實驗方案。這些產品經過嚴格的質量控制和驗證,確保在各種實驗條件下都能表現出色。通過與科研機構和生物醫藥企業的緊密合作,HCD 不斷改進其產品和服務,以滿足不斷變化的研究需求,推動科學進步。總結來說,Human Cell Design 以其技術和創新能力,在人源細胞模型領域樹立了榜樣。其開發的人源胰島β細胞模型不僅為糖尿病研究提供了強有力的支持,還為藥物開發和細胞治療帶來了新的希望。隨著技術的不斷進步和應用的不斷擴展,HCD 將繼續致力于推動人源細胞模型的前沿研究,為人類健康事業做出更大的貢獻。即用型功能性B細胞糖尿病細胞模型廠家直采且穩定供應