HCD利用人胎兒胰腺組織中的靶向Zhong Liu發生開發了永生化人β細胞系,其中使用慢病毒載體整合了兩個轉基因,SV40大T抗原(SV40-LT)和人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)兩種轉基因均在β細胞特異性大鼠胰島素啟動子(RIP)的控制下表達。***代細胞,名為EndoC-βH1,以組成型方式表達SV40LT和hTERT,而在第二代EndoC-βH2和EndoC-βH3中,這些轉基因可在loxP介導的CRE重組后被切除,位點位于慢病毒骨架的3'LTR。EndoC-βH5細胞是通過使用表達可切除的SV40LT和hTERT的慢病毒載體對人胎兒胰腺進行靶向Zhong Liu發生而獲得的。糖尿病細胞模型接近原代成人 B 細胞,是更好地了解人類 B 細胞生理學和開發糖尿病新療法的重要模型。浙江糖尿病細胞模型參考文獻
Human Cell Design 的細胞模型不僅在基礎研究中發揮重要作用,還在新藥開發和臨床前研究中具有重要應用價值。通過這些高質量的細胞模型,科學家們能夠更好地理解糖尿病的病理機制,篩選出具有潛力的新藥物,并驗證其在細胞水平上的療效。這些細胞模型為糖尿病zhi liao的創新提供了新的希望。Human Cell Design 的科學家們通過不斷的實驗和優化,成功開發出了一系列高效的人源胰島β細胞模型。這些模型不僅在胰島素分泌方面表現出色,還能夠在不同的實驗條件下穩定生長,為研究人員提供了可靠的實驗工具。HCD 的細胞模型已經在全球多個實驗室中被廣泛應用,為糖尿病研究和治療帶來了新的可能。廣東EndoC-BH3糖尿病細胞模型糖尿病細胞模型—EndoC-BH5 細胞是 EndoC-BH 細胞家族中的較新細胞。
糖尿病患者的數量不斷增長,凸顯了對生理相關且易于獲得的人類胰腺β細胞模型的需求,這些模型可以加速對疾病機制的理解和新藥的開發,在糖尿病研究方面具有巨大潛力。EndoC-βH5細胞是EndoC-bH人類胰腺β細胞家族中較新一代的細胞,EndoC-βH5細胞聚集并形成球體,這些球體是大小和形狀均質。EndoC-βH5細胞可直接作為冷凍驗證的功能性人類β細胞使用,因此可以隨時使用。EndoC-βH5細胞在迄今為止測試的所有功能測定中均表現良好,且表現出強大的標準化和批次間的再現性,可以進行可靠的數據解釋。細胞以劑量依賴性方式響應葡萄糖而分泌胰島素,并且腸jiang xue tang素進一步增強葡萄糖刺激的胰島素分泌。
EndoC-βH5細胞是一種新型人類胰腺β細胞解決方案,可用于開發人類糖尿病模型以及藥物篩選和驗證平臺,產生流程為:DNA構建,慢病毒載體產生,人胎兒胰腺外植體與pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒載體共轉導,移植到SCID小鼠的腎囊下,導致八個月后形成胰島素瘤,從而獲得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5細胞分別在Opti-β1和Ulti-b1培養基中的βCoat涂層塑料板上培養。使用胰蛋白酶(0.05%)每7天繁殖一次細胞。流式細胞術分析表明所有EndoC-βH5細胞均呈胰島素陽性,并且在絕大多數細胞中檢測到PDX1和NK6.1表達(分別為92.3%和90%)。EndoC-βH5細胞在涂層塑料上形成小的貼壁簇。糖尿病細胞模型真實模擬胰島B細胞分泌,且分泌性強。
Humancelldesign(HCD)開發了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong Liu產生功能的人類β細胞系。在胰島素啟動子的控制下,用表達SV40LT的慢病毒載體轉導人類胎兒胰腺芽。然后將轉導的芽移植到SCID小鼠體內,使其發育成成熟的胰腺組織。分化后,新形成的表達sv40lt的β細胞增殖并形成胰島素瘤。然后用人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)轉導β細胞,移植到其他SCID小鼠體內,在體外擴增生成細胞系。其中一種細胞系,EndoC-βH1,表達了許多β細胞特異性標記,而沒有任何其他胰腺細胞類型標記的實質性表達。在葡萄糖或其他胰島素分泌劑的刺激下,細胞分泌胰島素,細胞移植逆轉了化學誘導的小鼠糖尿病。GLP1R 和 GIPR 介導的信號增強葡萄糖刺激 EndoC-BH5 細胞的胰島素分泌。II型糖尿病糖尿病細胞模型慢病毒載體構建方法
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根據嚙齒動物β細胞獲得的數據,葡萄糖轉運蛋白SLC2A2被認為是葡萄糖感知的主要決定因素,而后來的研究表明,葡萄糖激酶(GLK)是主要決定因素。在人類β細胞中,GLK被認為是葡萄糖感知的主要決定因素。為了克服這些限制,在HumanCellDesign中生成了新的β細胞系。EndoC-βH1是通過將表達SV40LT的慢病毒載體轉導到人類胎兒胰腺芽中來開發的。隨后將轉導的芽移植到SCID小鼠體內,生成的表達SV40LT的細胞增殖并形成胰島素瘤。人源胰島B細胞模型對于與胰島相關的代謝疾病研究,包括糖尿病,糖尿病炎癥, 針對GLP-1R的Exendin4等類似藥物開發有重要作用。通過干細胞誘導B細胞產生的胰島B細胞存在純度較低,缺乏成熟胰島B細胞功能等問題。通過捐贈組織的胰腺B細胞提取,存在供應量較低,明顯批次效應,耗時較長等問題。使用糖尿病動物模型進行研究會比糖尿病細胞模型成本更高昂,周期更長。浙江糖尿病細胞模型參考文獻