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來源: 發布時間:2024年07月22日

表達HLA-A2的EndoC-βH5-HLA-A2系是通過每105細胞使用100ngp24衣殼蛋白與pTRIPDU3CMVHLA-A2IRESPURO慢病毒轉導EndoC-βH5來產生的。在1mg/ml嘌呤霉素存在下將細胞擴增三周以選擇轉導的細胞。為了完全成熟,將EndoC-βH5和EndoC-βH5-HLA-A2細胞再培養3周,并用5mM他莫昔芬和0.5mM更昔洛韋處理,以切除永生化基因并選擇切除的細胞。使用胰蛋白酶(25300e054)收集所得細胞,表達EndoC-βH5細胞的修飾HLA-A2引發同種異體反應性T淋巴細胞ji huo,概括了1型糖尿病中涉及的一些自身免疫機制。糖尿病細胞模型EndoC-BH5 細胞以 1e2 105 細胞/孔接種到 BCoat包被的8 孔 IBIDI 室載玻片上。浙江糖尿病細胞模型廠家技術指導

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EndoC-βH5細胞是一種新型人類胰腺β細胞解決方案,可用于開發人類糖尿病模型以及藥物篩選和驗證平臺,產生流程為:DNA構建,慢病毒載體產生,人胎兒胰腺外植體與pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒載體共轉導,移植到SCID小鼠的腎囊下,導致八個月后形成胰島素瘤,從而獲得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5細胞分別在Opti-β1和Ulti-b1培養基中的βCoat涂層塑料板上培養。使用胰蛋白酶(0.05%)每7天繁殖一次細胞。流式細胞術分析表明所有EndoC-βH5細胞均呈胰島素陽性,并且在絕大多數細胞中檢測到PDX1和NK6.1表達(分別為92.3%和90%)。EndoC-βH5細胞在涂層塑料上形成小的貼壁簇。重慶糖尿病細胞模型品質保障糖尿病細胞模型人B細胞系,用慢病毒載體整合了SV40大T抗原 (SV40-LT) 和人端粒酶逆轉錄酶(hTERT) 兩種轉基因。

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Humancelldesign(HCD)開發了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong Liu產生功能的人類β細胞系。在胰島素啟動子的控制下,用表達SV40LT的慢病毒載體轉導人類胎兒胰腺芽。然后將轉導的芽移植到SCID小鼠體內,使其發育成成熟的胰腺組織。分化后,新形成的表達sv40lt的β細胞增殖并形成胰島素瘤。然后用人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)轉導β細胞,移植到其他SCID小鼠體內,在體外擴增生成細胞系。其中一種細胞系,EndoC-βH1,表達了許多β細胞特異性標記,而沒有任何其他胰腺細胞類型標記的實質性表達。在葡萄糖或其他胰島素分泌劑的刺激下,細胞分泌胰島素,細胞移植逆轉了化學誘導的小鼠糖尿病。

HumanCellDesign(HCD)是專門從事人源胰島β細胞系構建和開發的公司。人源胰島β細胞模型構建技術性文章早期發表于2011年,相關文章總引用量達到600+,人源胰島β細胞模型已經被全球200多家生物醫藥和生命科研機構作為糖尿病細胞模型使用。HCD較具代表性的細胞系有EndoC-BH1,EndoC-BH3,EndoC-BH5,GLTxEndoC-BH5,HLA-A2EndoC-BH5等,細胞系可作為糖尿病細胞模型和糖尿病替代細胞zhi liao模型使用。Human cell design 構建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。EndoC-BH1細胞每百萬細胞含有0.48 μg胰島素。

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這些小鼠在 2 至 3 個月內出現低血糖,胰島素陽性細胞大量擴增。這種體內擴增有助于維持大量增殖的胰島素細胞,并允許定義允許的培養條件,在這種條件下,可以在體外建立永生化細胞系。Human Cell Design(HCD)開發了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong liu產生功能的人類β細胞系。在胰島素啟動子的控制下,用表達 SV40LT 的慢病毒載體轉導人類胎兒胰腺芽。Human Cell Design 開發了創新且安全的人類β細胞系生產方法。首先,將每個轉導的人類胎兒胰腺芽移植到 2 或 3 只 SCID 小鼠的腎被膜下,因為該部位是人類胰腺發育的允許部位。在 6 到 8 個月內,所有移植的小鼠都發生了原發性胰島素瘤,這導致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比,原發性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發性胰島素瘤中這些高度血管化的區域分離,用在大鼠胰島素啟動子控制下表達 hTERT 的慢病毒進行轉導,并移植到其他 SCID 小鼠中。糖尿病細胞模型怎么進行細胞復蘇?全球糖尿病細胞模型官方代理

表達 EndoC-BH5 的 HLA-A2 重新利用抗yan藥物或發現 I 類抗原肽加工和呈遞的抑制劑,其細胞因子反應與原發性類似。浙江糖尿病細胞模型廠家技術指導

Human Cell Design 的細胞模型不僅在基礎研究中發揮重要作用,還在新藥開發和臨床前研究中具有重要應用價值。通過這些高質量的細胞模型,科學家們能夠更好地理解糖尿病的病理機制,篩選出具有潛力的新藥物,并驗證其在細胞水平上的療效。這些細胞模型為糖尿病zhi liao的創新提供了新的希望。Human Cell Design 的科學家們通過不斷的實驗和優化,成功開發出了一系列高效的人源胰島β細胞模型。這些模型不僅在胰島素分泌方面表現出色,還能夠在不同的實驗條件下穩定生長,為研究人員提供了可靠的實驗工具。HCD 的細胞模型已經在全球多個實驗室中被廣泛應用,為糖尿病研究和治療帶來了新的可能。浙江糖尿病細胞模型廠家技術指導

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