購買回來的血清都是冰凍狀態,使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態下慢慢進行,待溶解完成,我們觀察到的胎牛血清會表現出黃色或紅色。并不是越紅越好,也不是越黃越好,淡黃色到淡紅色才是比較正常的顏色范圍。很多培養細胞的寶寶會發現進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質量問題。那么,血清中可能出現的沉淀物是什么?纖維蛋白,它是經常出現的較大的沉淀物,可以達到1-2mm,可以用肉眼觀察到。磷酸鈣,它也是常見的一種沉淀物,通常會使血清出現渾濁,并且在37℃培養的時候會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點,這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動,因此經常被誤認為是微生物污染。膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質,它們也是血清中出現沉淀物的常見原因。關于細胞生長,其實很多試驗以及經驗表明沉淀物不會影響細胞培養,當然血清生產商也是這樣說的。血清可提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質。武漢優等胎牛血清報價
細胞培養中出現黑點是污染嗎?如何處理?一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養細胞生長的狀態,黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;血清質量不好,反復凍融的結果;配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長;配制培養基的水質、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點;培養原代細胞中出現小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。武漢優等胎牛血清報價胎牛血清起酸堿度緩沖液作用。
血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
血清的保存應該注意:熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中須規則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物明顯增多,而且還會影響血清的質量,補體參與反應有:細胞毒作用,平滑肌細胞收縮,肥大細胞和血小板釋放組胺,增強吞噬作用,促進淋巴細胞和巨噬細胞發生化學趨化和活化。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。胎牛血清的無菌檢驗:陰性;支原體檢驗: 陰性;細菌內有毒的 ≤5(EU/ml)。
胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛(通常5-8個月胎齡),之后對未發育完全的胎牛的心臟穿刺取血,完成的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天內的小牛,而且它們的發育相對于胎牛而言更加完全。國產血清因為原料供應等原因,通常會選8個月以上,或足月剛出生的小牛取血,把它定義為類胎牛血清。但我們知道這時血清里的生長因子已經完全不同于胚胎發育時的生長因子。甚至于現在很多國產廠家已經把這類血清完全歸類于胎牛血清,貼上胎牛血清的標簽,賣著胎牛價格,卻只起著新生牛的作用。市場上進口胎牛血清較多,真正好的胎牛血清并不多。血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。武漢優等胎牛血清報價
新牛血清取自出生24小時之內的新生牛。武漢優等胎牛血清報價
血清的常見問題:保存方法,血清應保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。解凍方法:將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。避免產生沉淀物:解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。武漢優等胎牛血清報價
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