牛血清是細胞培養中用量較為大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數生長的,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到醫治作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾。泰州標準級胎牛血清銷售公司
血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養物質、提供和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和生長因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。每100ml人血清含有蛋白質6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不會凝固。有免疫,維持酸堿平衡和滲透壓的作用,血清蛋白質亦可儲備供給機體蛋白質不足時的應用。人和動物的血清常用以進行各種血清學試驗,幫助診斷疾病。含抗體的血清可作為預防或醫治疾病之用。泰州標準級胎牛血清銷售公司血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年。
非正規胎牛血清的產品會存在很多的問題:疫區來源,無合格質檢使胎牛血清存在生物學污染:支原體、噬菌體、病毒、原蟲等,會直接影響實驗的結果和穩定。工藝不規范,導致采集的原血放置時間過長或操作不當導致溶血,血液中血細胞裂解,血清顏色呈紅色或暗紅色,這樣的血清含有許多胞內產物,里面很多物質都會對細胞有刺激作用,影響實驗的穩定性和數據的真實性。血清批次不穩定,添加來補?很多不法商販拿到低廉的疫區原料血清進行加工生產,為了保障血清的培養效果會對血清進行處理,較為常見的是添加、轉鐵蛋白、BSA、生長因子等,還有的會和新生牛血清、培養基等勾兌,更有甚者用的根本就不是牛血清,此類操作對所有生物學實驗都有巨大的影響。
血清的保存應該注意:血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點"。經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染,一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
血清為何要熱滅活,有必要對所有血清都滅活嗎?如何正確的進行滅活?加熱可以滅活補體系統。啟動的補體系統參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學研究中,培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅清。實驗顯示,熱滅清對大多數的細胞而言是不需要的,對于非必須的細胞來說血清滅活對于細胞生長只有微小甚至無任何作用,還可能造成生長速率降低,沉淀物還會明顯增多,不利于細胞觀察。因此,若非必須,不需要對血清進行滅活處理。將需要進行處理的血清置于56℃水浴30min,建議加放空白對照(同體積水)使用溫度計測溫,以測得溫度為56℃時為計時起始點,加熱中可不時輕度旋轉混勻血清。胎牛血清的細菌內有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。泰州標準級胎牛血清銷售公司
血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成。泰州標準級胎牛血清銷售公司
小牛血清和胎牛血清有何區別與注意事項?來源不同:胎牛血清 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清采自出生10至14 天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、及其他活性物質等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ,應先將血清至于2-8℃冰箱,并經常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應按用量分裝并于-20℃保存,避免反復凍融。泰州標準級胎牛血清銷售公司