培養基制備技術:一、玻璃器皿的清洗:在制備培養基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況,經過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經過滅菌等準備就緒后,才能使用。1、新購的玻璃器皿:除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業鹽酸中數小時,使游離的堿性物質除去,再以流水沖凈。對容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉動容器使其內部表面均沾有鹽酸,數分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。2、用過的玻璃器皿:凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時沖洗,吸取過化學試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經過適當消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。液體培養基在靜止的條件下,在菌體或培養細胞的周圍,形成透過養分的壁障,養分的攝入受到阻礙。云南培養基消毒 培養基制備儀
殺毒滅菌方式主要有三種類型:⑴高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數耐熱培養基。⑵煮沸滅菌法方式:此方法可用于含有不耐高溫物質的培養基。⑶過濾除菌方式:過濾除菌,采用無菌技術定量添加培養基。血液和可以用無菌技術抽取并加入冷卻至約五十度的培養基中。當培養基中含有不耐熱物質時可以使用此方法。培養基倒入平板:將滅菌溶化的培養基冷卻至五十度后,倒入無菌干燥的培養皿中。微生物培養基制備的溫度不能太高,否則培養皿內蓋容易形成過多的冷凝水。云南培養基消毒 培養基制備儀選擇性培養基是指根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基。
培養基的稱量和溶解:小心稱量所需量的脫水合成培養基(必要時佩戴口罩或在通風柜中操作,以防吸入含有有毒物質的培養基粉末),先加入適量的水,充分混合(注意避免培養基結塊),然后加水至所需的量后適當加熱,并重復或連續攪拌使其快速分散,必要時應完全溶解。含瓊脂的培養基在加熱前應浸泡幾分鐘。注意:培養基的加熱溶解或高溫滅菌盛放使用的容器不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時攪動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。
微生物培養基:根據微生物類型和培養基的組成,微生物培養基通??梢苑譃椋合薅ㄅ囵B基、復雜培養基、選擇性培養基和富集培養基。在確定的培養基中,確切的化學成分是已知的。這些類型的培養基通常由純生化物質組成,通常用于研究微生物的較低營養需求。相比之下,復雜介質的確切化學成分尚不清楚。復雜介質培養基類型通常包含生物來源的試劑,例如酵母提取物和蛋白胨,其中確切的化學成分未知。復雜培養基通常提供多種生長因子,有助于未知和挑剔的細菌物種的培養。平板培養基要除去冷凝水,否則將影響平板分離培養效果。
培養平板培養基是被用于獲得微生物純培養的很常用的固體培養基形式。云南培養基消毒 培養基制備儀
固體斜面培養基配制:培養基各成份的混合和溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,較后必須加以補足。培養基pH的初步調正:因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養基各成分完全溶解后,應進行PH的初步調正。云南培養基消毒 培養基制備儀
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