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來源: 發(fā)布時(shí)間:2023年10月25日

培養(yǎng)基的pH值對微生物的生長和繁殖有著重要的影響,因此有時(shí)候培養(yǎng)基會按照pH值的范圍進(jìn)行分類。中性培養(yǎng)基的pH值約為7.4,這種培養(yǎng)基適合于大多數(shù)微生物的生長繁殖,例如生長基(Nutrient Agar)就是一種中性培養(yǎng)基。酸性培養(yǎng)基的pH值在5.5到6.5之間,適用于某些菌株,如乳酸桿菌、酸性乳桿菌等。堿性培養(yǎng)基的pH值超過7.0,是為了培養(yǎng)生長于高pH環(huán)境的微生物,例如氫氧化物耐受乙酸桿菌等。預(yù)裝培養(yǎng)基還可以根據(jù)其使用目的進(jìn)一步分類。細(xì)菌富集培養(yǎng)基:細(xì)菌富集培養(yǎng)基的目的是收集低濃度的微生物,通常在自然樣品中存在非常少量的微生物,因此必須富集到足夠的量,才能進(jìn)行接下來的試驗(yàn)。這種培養(yǎng)基通常添加有各種營養(yǎng)物質(zhì),以刺激微生物的生長。培養(yǎng)基中的各種成分會被微生物不同速率地利用,因此需要在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間點(diǎn)更新培養(yǎng)基以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。50%乳酸鈉溶液

培養(yǎng)基

天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低,除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外,也適于用來進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如。高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng),但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來進(jìn)行有關(guān)微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。50%乳酸鈉溶液某些培養(yǎng)基會在特定環(huán)境下產(chǎn)生特定的表型變化,例如MacConkey培養(yǎng)基生成紅色菌落表示腸道桿菌的存在。

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干粉培養(yǎng)基的制備與使用:干粉培養(yǎng)基制備的關(guān)鍵是控制成分比例準(zhǔn)確和混合均勻。首先按照制備配方精確稱量所需成分,然后在無菌條件下將其混合均勻,并在高真空下凍干得到干粉培養(yǎng)基。在使用前,將所需量的干粉培養(yǎng)基加入無菌蒸餾水中,經(jīng)過充分?jǐn)嚢韬图訜釡缇蠹纯墒褂谩8煞叟囵B(yǎng)基的使用方法和液體培養(yǎng)基類似。首先將制備好的培養(yǎng)基倒入滅菌好的培養(yǎng)皿、試管、瓶子等容器中,然后接種微生物,放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,不同微生物對于溫度、氧氣、CO2 等環(huán)境條件的要求是有所不同的,需要選擇相應(yīng)的恒溫箱和合適的培養(yǎng)條件。

在保存干粉培養(yǎng)基時(shí)還需要注意以下注意事項(xiàng):盡可能縮減干粉培養(yǎng)基長時(shí)間不間斷存儲。因?yàn)殚L時(shí)間不使用,尤其是室溫下,會受到光照、濕度等自然環(huán)境的影響,溫濕度波動,會產(chǎn)生不穩(wěn)定的物理與化學(xué)效應(yīng),導(dǎo)致化學(xué)反應(yīng)發(fā)生,細(xì)菌及其他微生物生長。在保存時(shí)使用密封包裝進(jìn)行,使其隔絕空氣和水分及其他微生物的進(jìn)入。及時(shí)檢查干粉培養(yǎng)基的保質(zhì)期,避免超過保質(zhì)期的使用,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。準(zhǔn)確記錄干粉培養(yǎng)基的配方,標(biāo)簽上應(yīng)說明干粉培養(yǎng)基的名稱、生產(chǎn)日期、有效期,混合使用指導(dǎo),以方便日后使用。培養(yǎng)基也有不同的形態(tài),可以是液體、半固體或固體形式。

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在使用預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí),裝有培養(yǎng)基的容器需要以適當(dāng)?shù)臏囟却鎯Γ灰獙⑵浔┞对陉柟庀禄蛟诟邷丨h(huán)境中存儲。因?yàn)闇囟冗^高會致使培養(yǎng)基變質(zhì),影響實(shí)驗(yàn)效果。而溫度過低則會導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢,也會影響實(shí)驗(yàn)效果。因此在使用前需要查看培養(yǎng)基的理想存儲條件,進(jìn)行妥善的保存。當(dāng)使用預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí),需要進(jìn)行無菌操作。先用手或棉花球蘸上醫(yī)用酒精、經(jīng)冷卻壓縮器或火燒消毒的鐵鉆區(qū)外部表面消毒,再取樣放入容器或燒杯中。在轉(zhuǎn)移前,需要仔細(xì)消毒取樣的容器或燒杯,以保證懸浮在空氣中的細(xì)菌和病毒不會在樣品中繁殖,造成別樣的影響。在有些情況下,培養(yǎng)基還需要進(jìn)行一些化學(xué)處理。50%乳酸鈉溶液

在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)通常還需要添加藥物,以防止細(xì)菌污染。50%乳酸鈉溶液

培養(yǎng)基的使用方法:

培養(yǎng)基是在實(shí)驗(yàn)室中用于生物體(如細(xì)菌、細(xì)胞、***或植物)生長和繁殖的營養(yǎng)物質(zhì)。不同類型的生物體需要特定類型的培養(yǎng)基,因此在使用培養(yǎng)基之前,您需要了解您所研究的生物體的需求。下面是一般情況下使用培養(yǎng)基的一般步驟:準(zhǔn)備培養(yǎng)基:根據(jù)您所研究的生物體的要求,準(zhǔn)備適當(dāng)類型的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基可以購買現(xiàn)成的,也可以根據(jù)配方自己制備。消毒:將培養(yǎng)基通過濾器或高溫高壓滅菌,以確保培養(yǎng)基中沒有其他微生物的污染。此步驟非常重要,以避免在培養(yǎng)過程中引入外來微生物。培養(yǎng)容器準(zhǔn)備:將消毒過的培養(yǎng)基倒入適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)容器中,如瓊脂培養(yǎng)皿、試管或培養(yǎng)瓶。根據(jù)需要,可以在培養(yǎng)容器中加入其他物質(zhì),如***或營養(yǎng)物質(zhì)。接種生物體:將您想要培養(yǎng)的生物體轉(zhuǎn)移到準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基中。這可以通過不同的方法實(shí)現(xiàn),例如用鐵環(huán)劃過細(xì)菌培養(yǎng)物表面、將細(xì)胞懸浮液滴入培養(yǎng)基中等。確保在操作過程中保持無菌條件,以避免外來微生物的污染。培養(yǎng)條件:根據(jù)您所研究的生物體的要求,設(shè)置適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件,如溫度、濕度和光照。將培養(yǎng)容器放置在合適的培養(yǎng)設(shè)備中,如恒溫箱、培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室中。培養(yǎng)觀察:在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間間隔內(nèi)觀察培養(yǎng)基中的生物體生長情況。 50%乳酸鈉溶液

標(biāo)簽: 菌種菌株
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