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Korthof培養基基礎

來源: 發布時間:2023年06月21日

預裝培養基是一種快速而方便的微生物培養技術,通常在無菌的紙板或管中提供。它們已經含有必要的營養成分,可以直接使用于微生物,從而將實驗室的培養基制備時間從幾個小時縮短到幾分鐘。此外,預裝培養基通常具有長期的穩定性,可以存儲數月甚至數年而不影響到較終的微生物培養結果。雖然預裝培養基可以提供必要的營養成分,但它們不能提供微生物所需要的所有物質。一些微生物需要特定的營養成分,如果預裝培養基缺少這些必要成分,它們將無法生長和繁殖。此外,某些微生物需要特定的肥料和環境條件來繁殖,而預裝培養基通常無法滿足這些要求。生長細胞需要的營養物質包括碳源、氮源、微量元素和維生素等。Korthof培養基基礎

培養基

天然培養基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養基。例如。牛肉膏蛋白胨培養基、麥芽汁培養基和LB培養基等。常用的天然有機營養物質包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養基成本較低,除在實驗室經常使用外,也適于用來進行工業上大規模的微生物發酵生產。合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計而配制的培養基。例如。高氏1號培養基和查氏培養基等。合成培養基有一定的配方,配制合成培養基時重復性強,但與天然培養基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,一般適于在實驗室用來進行有關微生物營養需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。Korthof培養基基礎液體培養基是一種含有營養物質的液體,它是用于生物實驗室中細胞培養的一種基礎實驗材料。

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培養基的分類有幾種呢?按培養基組成物質的化學成分區分:1.天然培養基,天然培養基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養基。例如。牛肉膏蛋白胨培養基、麥芽汁培養基和LB培養基等。2.組合培養基,合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計而配制的培養基。例如。高氏1號培養基和查氏培養基等。3.半組合培養基 ,指一類主要以化學試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養基。例如,馬鈴薯蔗糖培養基。

胰島素(Insulin)作用普遍,包括調節脂肪和蛋白質的代謝以及促進細胞生長等。胰島素功能的發揮源于其對細胞的作用,進而引起組織乃至機體的整體反應。一般可將胰島素在細胞水平的作用分為三大類:代謝作用、促生長作用、以及代謝和促生長混合作用。胰島素對細胞的代謝調節作用主要是通過其與細胞膜上的胰島素受體(Insulin receptor, IR)相互作用而介導,而胰島素對細胞的促生長作用則是通過其與細胞膜上胰島素的樣生長的因子受體(IGF Receptor, IG)相互作用而介導的。在無血清細胞培養液中,常添加胰島素來維持細胞生長,調節細胞對葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的攝取、利用和貯存,同時抑制糖原、蛋白質和脂肪的分解。固體培養基則通過向液態培養基中加入凝膠劑來制成,以便在培養過程中提供可視化定位細胞的單元。

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在使用預裝培養基時,裝有培養基的容器需要以適當的溫度存儲,不要將其暴露在陽光下或在高溫環境中存儲。因為溫度過高會致使培養基變質,影響實驗效果。而溫度過低則會導致細胞生長緩慢,也會影響實驗效果。因此在使用前需要查看培養基的理想存儲條件,進行妥善的保存。當使用預裝培養基時,需要進行無菌操作。先用手或棉花球蘸上醫用酒精、經冷卻壓縮器或火燒消毒的鐵鉆區外部表面消毒,再取樣放入容器或燒杯中。在轉移前,需要仔細消毒取樣的容器或燒杯,以保證懸浮在空氣中的細菌和病毒不會在樣品中繁殖,造成別樣的影響。培養基可以分為有機培養基和無機培養基兩類。Korthof培養基基礎

經過無菌處理的培養基能保證無細菌污染。Korthof培養基基礎

培養基的pH必須控制在一定的范圍內,以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產生代謝產物。各類微生物生長繁殖或產生代謝產物的較適pH條件各不相同,一般來講,細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內生長。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由于營養物質被分解利用和代謝產物的形成與積累,會導致培養基pH發生變化,若不對培養基pH條件進行控制,往往導致微生物生長速度下降或(和)代謝產物產量下降。因此,為了維持培養基pH的相對恒定,通常在培養基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質的等量混合溶液的pH為6.8。當培養基中酸性物質積累導致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結合形成弱酸性化合物,培養基pH不會過度降低;如果培養基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結合形成弱堿性化合物,培養基pH也不會過度升高。Korthof培養基基礎

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標簽: 培養基
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