培養(yǎng)基的pH值對微生物的生長和繁殖有著重要的影響,因此有時候培養(yǎng)基會按照pH值的范圍進行分類。中性培養(yǎng)基的pH值約為7.4,這種培養(yǎng)基適合于大多數(shù)微生物的生長繁殖,例如生長基(Nutrient Agar)就是一種中性培養(yǎng)基。酸性培養(yǎng)基的pH值在5.5到6.5之間,適用于某些菌株,如乳酸桿菌、酸性乳桿菌等。堿性培養(yǎng)基的pH值超過7.0,是為了培養(yǎng)生長于高pH環(huán)境的微生物,例如氫氧化物耐受乙酸桿菌等。預(yù)裝培養(yǎng)基還可以根據(jù)其使用目的進一步分類。細菌富集培養(yǎng)基:細菌富集培養(yǎng)基的目的是收集低濃度的微生物,通常在自然樣品中存在非常少量的微生物,因此必須富集到足夠的量,才能進行接下來的試驗。這種培養(yǎng)基通常添加有各種營養(yǎng)物質(zhì),以刺激微生物的生長。經(jīng)過無菌處理的培養(yǎng)基能保證無細菌污染。0.1%溶菌酶溶液
長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀,因此,在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時,常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養(yǎng)基pH會發(fā)生改變(一般使pH降低),可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整。0.1%溶菌酶溶液生長細胞需要的營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、微量元素和維生素等。
動物細胞培養(yǎng)必需的溶液,平衡鹽水(BSS):Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液。PH調(diào)整液:3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液(二羥乙基哌嗪乙烷磺酸)細胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。1)青、鏈霉素,每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素。2)卡那霉素:終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液。3)制霉菌素:濃度25U/ml,小瓶分裝,每瓶一次用完。常用的動物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清,前者來源少,價格高;后者要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛,因為哺乳后的小牛血清中可能含有更復(fù)雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖等。蛋白質(zhì)主要是白蛋白和球蛋白。
對于已經(jīng)購買來的預(yù)裝培養(yǎng)基,其內(nèi)部較初的狀態(tài)已經(jīng)是無菌的。因此,在通常情況下,我們不需要對新的預(yù)裝培養(yǎng)基進行任何形式的消毒處理。只需要在使用之前,檢查預(yù)裝培養(yǎng)基瓶口是否無菌,便可以直接使用。在使用過程中,應(yīng)當(dāng)嚴格遵守實驗室操作規(guī)范,避免外界微生物的污染。對于需要自制的培養(yǎng)基而言,其情況也不盡相同。如果自制的培養(yǎng)基中包含天然成分,那么在自制之后就需要進行消毒處理,以殺死培養(yǎng)基中可能存在的微生物。在消毒處理之后,再將培養(yǎng)基裝入瓶中,就可以進行進一步的實驗使用。同時,在使用自制的預(yù)裝培養(yǎng)基時,需要嚴格控制其培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間、以及實驗環(huán)境等參數(shù),以保證實驗結(jié)果的準確性。有些培養(yǎng)基需要添加血清或其它富含蛋白質(zhì)的物質(zhì)以促進生長。
預(yù)裝培養(yǎng)基可能對某些微生物產(chǎn)生毒性影響。預(yù)裝培養(yǎng)基在生產(chǎn)過程中可能含有某些添加劑,例如維生素、抑菌劑和染料等,以防止微生物污染。然而,這些添加劑也可能會影響微生物的生長和生命周期。比較好的做法是在不確定是否適合使用預(yù)裝培養(yǎng)基的情況下,可以嘗試使用小批量的預(yù)裝培養(yǎng)基來進行一些試驗,以確定微生物能否正常生長。什么樣的微生物較適合使用預(yù)裝培養(yǎng)基呢?通常,較為簡單的微生物,例如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等,是預(yù)裝培養(yǎng)基的合適候選者。這些微生物有著比較簡單和標準的營養(yǎng)需求,容易在預(yù)裝培養(yǎng)基上生長。對于一些較為復(fù)雜的微生物,例如細菌、細胞和非典型微生物,預(yù)裝培養(yǎng)基毫無疑問是無法滿足其復(fù)雜的營養(yǎng)需求的。雜質(zhì)會影響培養(yǎng)基的成分,因此制備培養(yǎng)基時需要進行滅菌。0.1%溶菌酶溶液
細菌在培養(yǎng)基中生長,與環(huán)境的影響和培養(yǎng)基的質(zhì)量有很大關(guān)系。0.1%溶菌酶溶液
培養(yǎng)基按成分分類有哪些?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,根據(jù)培養(yǎng)基的組成成分,可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩大類。天然培養(yǎng)基(native medium) 含有不完全明了化學(xué)成分的天然物質(zhì)。如蛋白胨、牛肉膏(粉)、肉浸液、玉米漿、血液、馬鈴薯等。用此類材料配成的培養(yǎng)基很難做到不同批號之間質(zhì)量的穩(wěn)定一致,因此在選用原料時務(wù)必注明其商品名稱、生產(chǎn)廠家及批號,對不同來源的原料應(yīng)先做小樣試驗。此種培養(yǎng)基成本較低,細菌繁殖較好,一般細菌培養(yǎng)以選用天然培養(yǎng)基為主。0.1%溶菌酶溶液
上海瑞楚生物科技有限公司是我國培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶專業(yè)化較早的有限責(zé)任公司(自然)之一,瑞楚生物是我國化工技術(shù)的研究和標準制定的重要參與者和貢獻者。瑞楚生物以培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶為主業(yè),服務(wù)于化工等領(lǐng)域,為全國客戶提供先進培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶。多年來,已經(jīng)為我國化工行業(yè)生產(chǎn)、經(jīng)濟等的發(fā)展做出了重要貢獻。