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膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL)

來源: 發布時間:2023年05月18日

培養基中營養物質濃度合適時微生物才能生長良好,營養物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用,例如高濃度糖類物質、無機鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進微生物的生長,反而起到抑菌或殺菌作用。另外,培養基中各營養物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴格地講,碳氮比指培養基中碳元素與氮元素的物質的量比值,有時也指培養基中還原糖與粗蛋白之比。例如,在利用微生物發酵生產谷氨酸的過程中,培養基碳氮比為4/1時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;當培養基碳氮比為3/1時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產量則大量增加。 大多數細菌都能在富含有機物的基質中繁殖生長,因此有機培養基是基本的培養基之一。膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL)

培養基

營養培養基(nutrient media) 在基礎培養基中添加一些特殊的營養物質,如葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏、生長因子等,可供營養要求較高的細菌在其中生長。例如鏈球菌、肺炎鏈球菌等需在含血液或血清的培養基中生長;結核分枝桿菌的培養基中須添加雞蛋、馬鈴薯、甘油等。比較常用的營養培養基是血瓊脂平板。增菌培養基(enrichment media) 一般為液體培養基,用于細菌的增菌培養,可泛用,也可專門用的,在專門用的增菌培養基中常含有目的菌生長所需要的特殊營養物質或生長因子。膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL)為了避免細胞爆破釋放DNA和蛋白質,培養基中常常添加DNA酶和蛋白酶等酶類。

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以MS培養基母液為基礎,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。

按培養基的營養成分是否完全區分:1.基本培養基,亦稱“較低限度培養基”。只能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養基,稱為基本培養基,是含有營養要求較低成分的合成培養基,常用“[-]”表示。這種培養基往往缺少某些生長因子,所以經過誘變過的營養缺陷型菌株不能生長。2.完全培養基,基礎培養基添加血清等物質后,叫完全培養基,也叫(血清)細胞培養基。完全培養基可用來滿足微生物的各種營養缺陷型菌株的生長需要,常以“[+]”表示。3.補充培養基,凡是只能滿足相應的營養缺陷型生長需要的組合培養基,稱為補充培養基,它是在基本培養基中加入該菌株不能合成的營養因子而組成的。根據在基本培養基中加入的是A或B等營養因子代謝物而分別用[A]或[B]等來表示。特定的培養基可用于特定的微生物和組織細胞培養。

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培養基分類有哪些?營養缺陷型:野生型菌株經過人工誘變或者自然突變失去合成某種營養(氨基酸,維生素,核酸等)的能力,只有在基本培養基中補充所缺乏的營養因子才能生長,稱為營養缺陷型(auxotroph)。營養缺陷型是一種生化突變株,它的出現是由基因突變引起的。遺傳信息的載體是一系列為酶蛋白編碼的核酸系列,如果核酸系列中某堿基發生突變,由該基因所控制的酶合成受阻,該菌株也因此不能合成某種營養因子,使正常代謝失去平衡。培養基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無菌技術,避免細菌交叉污染。膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL)

酵母培養基通常包含酵母營養素、碳水化合物和氮源。膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL)

還有一些鑒別性培養基,是利用細菌特有的各種酶系統,能分解利用各種特定的糖、醇、氨基酸或其他基質而產酸、產氣、產堿或產生其他可見物質,依此進行細菌的鑒別,例如常用的生化培養基。用于細菌生化特性試驗的培養基特點是在無糖的基礎培養基中加人某種特定的基質,并加人指示劑,細菌在此類培養基中的一系列生化反應結果,均通過指示劑顯示出來。此類培養基為生化反應鑒別培養基。根據用量又可分為常量生化培養基和微量生化培養基。值得注意的是生化試驗培養基的某些成分受高溫、pH等諸多因素的影響,在配制和使用時,應根據實際情況嚴格掌握,防止有效成分被破壞,以保障其使用效果。膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL)

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標簽: 菌種菌株
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