上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,厭氧菌培養基(anaerobic media) 供厭氧菌的分離、培養和鑒別用的培養基,稱為厭氧菌培養基。由于厭氧菌自身缺乏有氧代謝所必需的各種酶,如細胞色素和細胞色素氧化酶、過氧化氫酶和過氧化物酶、超氧化歧化酶,所以造成自身代謝的缺陷,無法進行有氧代謝,而無氧酵解所產生的能量又不足,因此厭氧菌在正常的大氣環境下不能生長和生存。為使厭氧菌能正常生長,必須制備營養成分豐富,氧化還原電勢較低,具有特殊生長因子的專門用的培養基。制備培養基需要考慮生長細胞所需的營養、酸堿度和水分含量等因素。豬肺疫疫苗培養基
選擇性培養基(selective media) 選擇性培養基含有營養物(增菌劑)和抑菌劑(選擇劑),標本接種于此類培養基后,由于抑菌劑的選擇性抑制作用,使非目的菌受到不同程度的抑制,更有利于目的菌的增殖或分離。利用選擇性培養基經過一定時間的增菌培養,再接種于選擇性鑒別培養基,可以提高目的菌的陽性檢出率。抑菌劑的種類很多,常用的有孔雀綠、燦爛綠、亞硒酸鈉、去氧膽酸鈉、膽鹽、四硫磺酸鈉等。抑菌劑的加入量要適宜、準確,有的劇毒,有的不耐高熱,配制時須特別注意。豬肺疫疫苗培養基在培養細胞時通常還需要添加藥物,以防止細菌污染。
1951年厄爾開發了供動物細胞體外生長的人工合成培養基(MEM)。合成培養基的種類相當多。合成培養基成分已知,便于對實驗條件的控制。但與天然培養基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養中使用的基礎合成培養基還必須加入一定量的天然培養基成分,以克服合成培養基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對細胞生長很有效,但后期對培養產物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質量的動物血清來源有限,成本高,限制了它的大量使用。無血清培養基不加動物血清,在基礎培養基中加入細胞生長有效因子等。
血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。血清主要作用:提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。酵母培養基通常包含酵母營養素、碳水化合物和氮源。
合成培養基(synthetic medium) 由已知化學成分的營養物質組成的培養基。根據微生物對營養要求的不同,可完全由無機鹽或化合物組成,如:氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、維生素等,其組成成分已知,只要嚴格操作,各批次間質量可做到穩定一致。此培養基可用來檢測某種營養物或藥物對微生物代謝的影響。組織細胞培養液均屬合成培養基。合成培養基的成本較高,其價格相當于同類天然培養基的幾倍以至于幾十倍。只含幾種無機鹽的合成培養基,只適用于自養菌的培養,如培養亞硝化細菌、氧化硫桿菌等的培養基。有些培養基大部分成分為已知化學結構的營養物質,其中的個別或少數成分為未明化學成分的必須營養物,成為半合成培養基,如百日咳菌苗生產用的水解酪素培養基。常見的培養基包括LB培養基、TSB培養基等。豬肺疫疫苗培養基
固體培養基則通過向液態培養基中加入凝膠劑來制成,以便在培養過程中提供可視化定位細胞的單元。豬肺疫疫苗培養基
氨基酸是細胞合成蛋白質的基本成分,氨基酸中有12種是細胞本身不合成的,必須由培養液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產物,呈蛋黃色粉末狀,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,微酸性。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養基:包括厭氧培養基和細菌L型培養基等。前者是培養專性厭氧菌的培養基,除含營養成分外,還加入還原劑以降低培養基的氧化還原電勢,如皰肉培養基、巰基乙醇酸鈉培養基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,由于胞內滲透壓較高,故培養基必須采用高滲低瓊脂培養基。豬肺疫疫苗培養基
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