乙基紫疊氮鈉肉湯(EthylVioletAzideBroth,EVA)是一種用于微生物培養的選擇性培養基,特別適合于鏈球菌的增菌培養。以下是它的一些特點和用法:**特點**:1.**成分**:含有酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、疊氮鈉和乙基紫等成分。2.**pH值**:pH值控制在7.0±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環境。3.**選擇性**:疊氮鈉可以抑制革蘭氏陰性細菌的生長,特別是對變形桿菌的抑制效果好。4.**應用**:主要用于鏈球菌的增菌培養,也可用于其他需氧菌和兼性厭氧菌的培養。**配制方法**:1.稱取35.8g培養基粉末,加入1000mL蒸餾水。2.加熱攪拌至完全溶解。3.分裝后,在121℃高壓下滅菌15分鐘。**質量控制**:-制備好的培養基應進行pH值、無菌性檢查和適用性檢查。-培養基的保存應避光、密封,并在已驗證的條件下貯藏。**應用**:-用于鏈球菌的分離培養,通過觀察菌落的生長情況和特征進行鑒定。**注意事項**:-在配制和操作過程中,應避免攝入、吸入、皮膚接觸,并在通風櫥中進行,佩戴適當的個人防護裝備。長雙歧桿菌和嬰兒雙歧桿菌在PYG培養基上的生長情況通常表現為圓形凸起,奶油色,邊緣整齊光滑的菌落 。膽鹽氯酚紅亮綠瓊脂培養皿
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當的實驗服和手套。-準備無菌的接種環、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養基**:-按照培養基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應該仍然是液體狀態。-將冷卻的培養基倒入無菌的培養皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當的接種方法。5.**培養**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養箱中。-根據實驗要求,通常在36±1℃下培養18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養結束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
TGY肉湯培養基(TryptoneGlucoseYeastBrothMedium)是一種用于微生物培養的培養基,特別適合于芽孢菌的培養。以下是它的一些主要特點和用途:1.**配方成分**:TGY肉湯培養基的主要成分包括胰蛋白胨(或胰酪蛋白胨)、酵母浸粉、葡萄糖和瓊脂。胰蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、維生素和礦物質,葡萄糖作為碳源和能源,瓊脂用于固化培養基。2.**pH值**:該培養基的pH值通常控制在7.0至7.5之間,為微生物提供適宜的生長環境。3.**用途**:TGY肉湯培養基主要用于細菌的培養,特別是對于需要營養豐富環境的細菌,如芽孢桿菌屬的細菌。它也適用于細菌總數的測定和微生物的增菌培養。4.**配制方法**:通常需要稱取一定量的培養基粉末,加入蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,然后進行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當溫度,分裝于無菌容器中備用。5.**質量控制**:通過接種質控菌株,如大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌等,來驗證培養基的性能。這些菌株在TGY肉湯培養基上應表現出良好的生長特性。6.**儲存條件**:干燥培養基應放置于陰暗干燥處,室溫保存。制備好的培養基應避免光線直接照射,并保存于2-8℃。
錳鹽營養瓊脂(ManganeseNutrientAgar)是一種用于微生物培養的培養基,特別適用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗。以下是它的一些主要特點和用途:1.**成分**:通常包含硫酸錳、蛋白胨、牛肉粉、氯化鈉和瓊脂。其中,硫酸錳的含量為0.0308g/L,蛋白胨為10.0g/L,牛肉粉為3.0g/L,氯化鈉為5.0g/L,瓊脂為15.0g/L。2.**pH值**:培養基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),為微生物提供適宜的生長環境。3.**用途**:主要用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗,也可用于芽孢桿菌或梭菌的培養和孢子的形成。4.**檢驗原理**:蛋白胨和牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂作為培養基的凝固劑;硫酸錳可促進芽孢的生成。5.**使用方法**:稱取本品33.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。需要注意的是,由于培養基中含有少量硫酸錳,滅菌后可能出現微量沉淀。6.**質量控制**:通過接種質控菌株,如短小芽孢桿菌CMCC(B)63202、枯草芽孢桿菌黑色變種ATCC9372等,放置于55℃需氧培養48小時,以驗證培養基的性能。蠟樣芽孢桿菌在木糖明膠培養基中不發酵木糖,培養基顏色不變,液化明膠作為典型特征 。
胰酪胨大豆羊血瓊脂(TSSB)基礎是一種用于微生物學實驗的培養基,主要用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測試實驗。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:TSSB基礎的配方包含胰酪胨、植物蛋白胨、氯化鈉、無水磷酸氫二鉀、葡萄糖和瓊脂等。具體成分為每升培養基中包含胰酪胨15.0克、植物蛋白胨5.0克、氯化鈉5.0克、無水磷酸氫二鉀2.5克、葡萄糖2.5克和瓊脂12.0克。2.**pH值**:該培養基的pH值通常調節在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加脫纖維羊血使用,以提供紅細胞,檢測微生物溶血特性。5.**檢驗原理**:胰酪胨、植物蛋白胨在培養基中作為營養物質提供菌體生長所需的碳源、氮源、維生素及礦質元素等;無水磷酸二氫鈉作為pH緩沖體系;瓊脂作為凝固劑;脫纖維羊血提供紅細胞,檢測微生物溶血特性。6.**用法**:稱取本品42.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至45-50℃時,加入5-10ml無菌脫纖維羊血,混勻后傾注平板,備用。7.**質量控制和典型特征**:在30-32℃培養18-24小時,蠟樣芽孢桿菌典型特征為在菌落周圍呈現β型完全溶血的溶血環。由于雙歧桿菌是厭氧菌,PYG培養基需要在厭氧或微需氧條件下使用,以確保細菌的正常生長 。Vogel-Johnson瓊脂培養皿
巴氏芽孢桿菌的芽孢形成需要特定的培養條件,包括營養和環境因素。例如,使用改良的Schaeffer培養基。膽鹽氯酚紅亮綠瓊脂培養皿
變異鏈球菌(Streptococcusmutans)是一種在口腔中發現的細菌,與齲齒的形成有關。它是一種革蘭陽性球菌,常以成對或短鏈狀排列。在胰蛋白胨培養基中和含有95%氮氣及5%二氧化碳混合氣體的環境下生長良好。對于變異鏈球菌的培養,通常使用TSA+5%脫纖維蛋白羊血(血瓊脂平板)作為培養基。在這種培養基上,變異鏈球菌的菌落特征為較小(直徑約1mm)、灰白色、凸起、邊緣不齊、干燥、有α溶血環。在選擇培養基時,需要考慮培養基的pH值、營養成分、氧氣需求和抑制劑等因素,以確保目標細菌能夠在抑制雜菌的同時良好生長。例如,改良愛德華培養基(Edwardmodifiedmedium)是一種常用的培養基,它含有血液、血清或其它營養成分,適合于培養對營養要求較高的細菌,如鏈球菌。在實驗室中,變異鏈球菌的培養和鑒定是一個多步驟的過程,包括接種、培養、觀察菌落特征、進行生化試驗和藥敏分析等。通過這些步驟,可以準確地識別和鑒定變異鏈球菌,從而為臨床診斷提供依據。膽鹽氯酚紅亮綠瓊脂培養皿