嗜鹽菌選擇性瓊脂是一種專門用于分離和培養嗜鹽菌的培養基,其特點和應用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化鈉:40.0g/L-結晶紫:0.0005g/L-瓊脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生長。-高含量的氯化鈉創造高滲環境,有利于嗜鹽菌的生長,同時抑制不耐高鹽的細菌。-結晶紫抑制革蘭氏陽性菌的生長。-瓊脂作為凝固劑,使培養基凝固成固體。-高pH值有助于抑制部分雜菌的生長。3.**配制方法**:-稱取77.0g培養基粉末,加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中。-分裝后,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**使用方法**:-將培養基傾注成平板,待凝固后使用。-接種樣品后,放置于36±1℃恒溫培養箱中需氧培養18-24小時。5.**細菌生長特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:無色菌落,較濕潤。-溶藻弧菌ATCC17749:無色菌落。-金黃色葡萄球菌ATCC25923:抑制生長。6.**微生物靈敏度試驗**:-按標簽用法制備培養基,接種質控菌株,放置于36±1℃需氧培養18-24小時。-回收率計算時,用TSA瓊脂做對照培養基。血液增菌培養基含有蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化鈉、葡萄糖、枸櫞酸鈉、對氨基苯甲酸、硫酸鎂、酚紅等成分。TSAM預裝培養皿
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當的實驗服和手套。-準備無菌的接種環、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養基**:-按照培養基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應該仍然是液體狀態。-將冷卻的培養基倒入無菌的培養皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當的接種方法。5.**培養**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養箱中。-根據實驗要求,通常在36±1℃下培養18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養結束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
TCBS瓊脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一種用于分離培養弧菌科細菌,特別是致病性弧菌的選擇性培養基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸鈉:10.0g/L-枸櫞酸鈉:10.0g/L-牛膽粉:5.0g/L-牛膽酸鈉:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化鈉:10.0g/L-檸檬酸鐵:1.0g/L-溴麝香草酚蘭:0.04g/L-麝香草酚蘭:0.04g/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及維生素等生長因子。-氯化鈉提供弧菌嗜鹽生長的環境,高濃度抑制其他細菌生長。-蔗糖作為可發酵碳源。-枸櫞酸鈉、高pH值和硫代硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群生長。-硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵反應,檢測細菌產硫化氫。-溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭作為pH指示劑,細菌利用蔗糖產酸會使得指示劑變黃。-瓊脂作為凝固劑。3.**使用方法**:-稱取8.9g培養基,溶解于100ml蒸餾水中,煮沸后冷卻至50℃,傾入無菌平皿,備用。-注意:無需高壓滅菌。4.**不同細菌在TCBS瓊脂上的生長特征**:-副溶血性弧菌:藍綠色斗笠狀菌落,H2S陰性。-溶藻弧菌:黃色菌落,H2S陰性。-霍亂弧菌:黃色菌落,H2S陰性。
酵母浸粉葡萄糖瓊脂(YPDA)是一種常用的微生物培養基,尤其是在酵母菌的培養中。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和瓊脂。具體配方為1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固體培養基,加入2%瓊脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常調節在6.0±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。葡萄糖溶液滅菌后加入,以避免高溫下可能發生的化學反應導致培養基成分變化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培養,也用于藥品和生物制品中含王漿和蜂蜜的合劑酵母菌數測定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g瓊脂粉,然后進行高壓滅菌。滅菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**儲存條件**:液體YPDA培養基可常溫保存;瓊脂YPDA平板在4℃可保存幾個月。7.**微生物生長特征**:不同細菌在酵母浸粉葡萄糖瓊脂培養基上的生長特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌則有黑色孢子。CVT瓊脂培養基主要用于乳制品中嗜冷菌的計數,也可用于其他樣品中嗜冷菌的分離和計數 。
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(Trypticase-Soy-PolymyxinBrothBase)是一種用于微生物培養的培養基,具有以下特點和用途:1.**成分**:該培養基的主要成分包括胰酪胨、植物胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀和葡萄糖。胰酪胨和植物胨提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為碳源;磷酸氫二鉀作為緩沖劑;氯化鈉幫助維持滲透壓。2.**pH值**:培養基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),為微生物提供適宜的生長環境。3.**用途**:主要用于蠟樣芽孢桿菌的選擇性增菌培養,也可用于MPN值測定和消毒劑消毒效果的測試。4.**添加劑**:在使用時,需要添加多粘菌素B以抑制雜菌的生長,促進目標微生物蠟樣芽孢桿菌的生長。多粘菌素B的添加量根據產品說明進行,例如每100ml培養基基礎添加1支多粘菌素B(1mg)或每225ml培養基添加1支多粘菌素B(2.25萬單位)。5.**制備方法**:通常需要稱取一定量的培養基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,煮沸后進行高壓滅菌。滅菌后冷卻至50℃左右,加入多粘菌素B,混勻后無菌分裝于滅菌試管中備用。6.**質量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在30℃下培養48小時,應觀察到良好的生長和溶液混濁,以驗證培養基的有效性。
PK瓊脂培養基的制備通常包括將干燥的培養基粉末與適量的水混合,加熱至瓊脂完全溶解,然后分裝到培養皿中。TSAM預裝培養皿
Leeming-Notman培養基(LN培養基)是一種用于培養馬拉色菌屬(Malassezia)的培養基。該培養基的配方包含多種營養成分,能夠促進馬拉色菌的生長。以下是Leeming-Notman培養基的一些關鍵特點和配制方法:1.**配方組成**:-蛋白胨(Bacteriologicalpeptone):10.0g-葡萄糖(Glucose):10.0g-酵母膏粉(Yeastextract):2.0g-牛膽鹽(Oxbile,desiccated):8.0g-單硬脂酸甘油酯(Glycerolmonostearate):0.5g-吐溫60(Tween60):5.0mL-橄欖油(Oliveoil):20mL-瓊脂(Agar):15g-去離子水(Deionizedwater):1.0L-pH值調整至5.6±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取培養基粉末,加入到蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-調節pH值至指定范圍。-進行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃后,無菌加入添加劑。3.**用途**:-主要用于培養馬拉色菌屬的菌,這些菌與人類皮膚有共生關系,并且在醫學研究中具有重要意義。4.**保存條件**:-通常在2-8°C下保存,保質期通常為兩年。5.**注意事項**:-避免吸入和皮膚接觸。-配制過程中應在無菌條件下操作。