DTA培養(yǎng)基的pH值對微生物生長有影響。pH值是描述溶液酸堿性的基本指標(biāo),對微生物的生長和繁殖有深遠(yuǎn)的影響。微生物的適應(yīng)pH范圍各不相同,不同種類的微生物對pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范圍。pH值的過高或過低都可能對微生物的生長造成不利影響。在DTA培養(yǎng)基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),這個(gè)pH值范圍是為嗜熱菌芽孢的分離培養(yǎng)而優(yōu)化的。在這個(gè)pH值下,胰酪蛋白胨能夠提供適宜的碳氮源和生長因子,而葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑,瓊脂作為凝固劑,共同為嗜熱菌芽孢提供適宜的生長環(huán)境。當(dāng)培養(yǎng)基的pH值偏離這個(gè)范圍時(shí),可能會(huì)影響微生物的新陳代謝和酶活性,改變細(xì)胞膜的通透性,影響微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄,進(jìn)而影響微生物的生長。例如,如果pH值過低,可能會(huì)抑制菌體中某些酶的活性,阻礙新陳代謝;如果pH值過高,可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性改變,影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。因此,在配制和使用DTA培養(yǎng)基時(shí),嚴(yán)格控制pH值是非常重要的,以確保微生物能夠在適宜的環(huán)境中生長。木糖明膠培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、酵母浸粉、明膠、木糖、磷酸氫二鈉和酚紅等。胰蛋白胨瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)是一種專門設(shè)計(jì)用于分離和培養(yǎng)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。除了李斯特氏菌,它也可以用來分離其他類型的細(xì)菌,盡管其選擇性成分主要針對李斯特氏菌。**特點(diǎn)**:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎(chǔ)包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七葉苷、檸檬酸鐵銨、葡萄糖、氯化鋰、瓊脂和酚紅等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌,特別是非李斯特氏菌的生長。4.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長時(shí),會(huì)水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環(huán)。盡管PALCAM瓊脂基礎(chǔ)主要用于李斯特氏菌的分離,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和腸球菌等,偶爾也能在該培養(yǎng)基上生長,利用甘露醇產(chǎn)酸使菌落和其周圍的培養(yǎng)基呈黃色。
彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細(xì)菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**選擇性培養(yǎng)**:彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)通常與特定的選擇性添加劑一起使用,如改良Karmali選擇性添加劑或彎曲桿菌選擇性添加劑,這些添加劑含有抗生物質(zhì),如萬古霉素和兩性霉素B,以抑制其他非目標(biāo)微生物的生長,提高目標(biāo)彎曲桿菌的分離率。2.**無血培養(yǎng)基**:某些類型的彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)是無血的,這使得它在某些應(yīng)用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟(jì)。無血培養(yǎng)基通常使用活性炭、硫酸亞鐵和酸鈉替代血液。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,生長環(huán)境是含氧氣5%、二氧化碳10%、氮?dú)?5%。因此,彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長。4.**菌落特征**:在適宜的條件下,空腸彎曲桿菌在彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)中生長,形成灰色、濕潤、平鋪的菌落,這些特征有助于識(shí)別彎曲桿菌。5.配方:彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)的配方可能包含蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨、氯化鈉、瓊脂等,提供碳、氮源、維生素和生長因子。
肉浸液肉湯是一種基礎(chǔ)的微生物培養(yǎng)基,其主要特點(diǎn)和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉湯主要由絞碎牛肉、氯化鈉、蛋白胨和磷酸氫二鉀組成,再加上一定量的蒸餾水。具體配比為:絞碎牛肉500g、氯化鈉5g、蛋白胨10g、磷酸氫二鉀2g、蒸餾水1000mL。2.**制作方法**:首先將絞碎的去筋膜無油脂牛肉與蒸餾水混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時(shí),使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補(bǔ)足原量。然后加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:肉浸液肉湯通常用于培養(yǎng)那些營養(yǎng)要求不是特別高的細(xì)菌,如溶血性鏈球菌及其他營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了細(xì)菌生長所需的氮源、維生素和生長因子。4.**培養(yǎng)特征**:在肉浸液肉湯中,細(xì)菌可以很好地生長,通常表現(xiàn)為肉湯混濁,這是由于細(xì)菌的代謝活動(dòng)導(dǎo)致的。5.**儲(chǔ)存**:肉浸液肉湯的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲(chǔ)存于25℃下陰涼干燥處,開過封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意密封儲(chǔ)存。GAM肉湯培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于菌種的生長、保存和實(shí)驗(yàn)操作。它支持多種微生物的生長,并在菌種冷凍保存中。
尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測和分離細(xì)菌的生化培養(yǎng)基,特別是那些能夠產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌,如某些變形桿菌和幽門螺旋桿菌。以下是尿素培養(yǎng)基的一些特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:-蛋白胨:1.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:1.0g-磷酸二氫鉀:2.0g-酚紅:0.012g-瓊脂:20.0g-蒸餾水:1000ml-40%尿素水:5ml2.**配制方法**:-將上述成分(除葡萄糖和尿素外)溶解在蒸餾水中,加熱煮沸,調(diào)節(jié)pH至7.2,過濾。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入無菌的40%尿素水5ml,混勻。-分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?.**用途**:-主要用于細(xì)菌的脲酶檢測。-用于鑒定變形桿菌屬和其他能夠分解尿素的細(xì)菌。4.**培養(yǎng)條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)24-48小時(shí)。5.**觀察指標(biāo)**:-培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,當(dāng)細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶分解尿素產(chǎn)生氨時(shí),培養(yǎng)基顏色由黃色變?yōu)榧t色,表示細(xì)菌具有脲酶活性。6.**保存條件**:-通常在2-8°C下保存,保質(zhì)期三年。7.**注意事項(xiàng)**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸。-配制過程中應(yīng)在無菌條件下操作。尿素培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在檢測和研究能夠分解尿素的細(xì)菌方面。普通肉湯培養(yǎng)基通常由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)、氯化鈉和水組成,這些成分為細(xì)菌提供必需的碳源等。LB培養(yǎng)基預(yù)裝培養(yǎng)皿
CVT瓊脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、結(jié)晶紫、TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)和瓊脂等成分。胰蛋白胨瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)(AzideBloodAgarBase)是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于從糞便、污水和其他樣本中分離和檢測鏈球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特點(diǎn)和配制方法:**特點(diǎn)**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化鈉、疊氮鈉和瓊脂等成分,其中疊氮鈉作為選擇性抑制劑,對大多數(shù)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,但允許某些革蘭氏陽性菌如鏈球菌和葡萄球菌的生長。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:除了用于分離培養(yǎng)鏈球菌和葡萄球菌,疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)還可用于測定溶血反應(yīng)。4.**溶血反應(yīng)**:在該培養(yǎng)基上,可以觀察到α溶血(培養(yǎng)基變綠)、β溶血(菌落周圍培養(yǎng)基變透明)和γ溶血(培養(yǎng)基無變化)。**配制方法**:1.稱取33.2g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.121℃高壓滅菌15分鐘。4.冷卻至50℃左右,加入50mL無菌羊血,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。**注意事項(xiàng)**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸疊氮鈉,配制時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,并佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備。-培養(yǎng)基中含有的疊氮鈉具有劇毒,應(yīng)妥善處理和保存。胰蛋白胨瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿