對您的特定應用,增加(和優化)試劑濃度和培養時間。 檢查確保檢測試劑按建議的方法正確貯藏和使用。 從抗體緩沖液中除去吐溫。 配制少量工作液(1mL),在暗室中加入HRP偶聯二抗1mL。 應觀察到可見的藍光。 在再雜交過程中可能有抗原損失。 信號較弱 在凝膠上的蛋白不足 在凝膠上載入更多的蛋白,或在載入之前濃縮樣品,或使用免疫沉淀以增加在凝膠運行的中靶蛋白量。 使膜曝光時間延長(1-2小時)。 轉移到膜上的蛋白過少--優化轉膜條件,如轉膜緩沖液pH、膜類型和電壓等。鑒定抗體的報價具體是多少呢?寶山區WB抗體抗體規格
ChHPAb+trimethy-istione H3Lys917625)∶使用免gG 或AntrimethyHhistone H3Lys9抗體,與Magna ChIP 試劑盒17-610)一起將超聲處理后的NH3T3 L1組胞染色質進行染色質免疫沉淀反應。對獲取的trimethy-histone H3ILys9DNA精合片段進行qPCR確認,使用的引物為屋p16啟動子附近序列。 染色質免疫共沉淀∶相關產品 磁珠 專門應用與ChIP實驗的A,G,或A/G蛋白Magna ChIP磁珠經過嚴格優化,用于ChIP實驗中收集沉淀復合物,具有速度快,重復性好,效率高的優點。與常規瓊脂糖微珠不同,在反應中,Magna ChIP 磁珠可在磁場作用下快速移動至反應器邊緣,***降低免疫沉淀復合物的滯留時間和機械壓力。楊浦區WB抗體抗體商家益啟生物是Sigma抗體的代理商。
在將進行ChIP咳PCR實驗的地點期近,不得打開含有擴增PCR產物約試幢。 確保您使用的抗體是在ChIP中給證過的抗體。關于ChIP抗體約完整選擇過程,請參見默克官網表觀遺傳學。如果您正使用ChIP抗體,請增加抗體的解育時間。?一般1-10uq ChIP抗體是足夠的。但是,所需抗體量可能取決于您的靶輪蛋白相對豐度和抗體與靶標的親和力。?在交聯前,單獨準備一個平板,用于測定細胞數。重新評價每個反應的細您數。增加您的細晚數,特別是在嘗試檢測較任豐度的靶蛋白時。
請查測生產廠家說明書。當在Luminex200儀器上讀取分析的讀數時,采用4個校準片,根題Luminex推薦的方案調整探針高度至適當位置。當在FLEX0MP3D"儀器上讀取分析法的讀數時,采用1個校準片,根據Luminex建議的方案調整探針高度至適當位置。當在MAGPK"系統上讀取分析的讀數時,采用2個校準片,根掘山uminex建議的方案調整探針高度至適當位置。 適當使用封閉劑,且用多道移液器移取液體而不觸碰微孔板中的試劑,這樣可以遍免孔的交叉污染。增加洗滌次數H3抗體的報價具體是多少呢?
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Troubleshooting 問題 微珠計數不足 本底過高 微珠不在制定的區域內或圈門中 整個微孔板的信號與本底相同 陽性對照的信號任樣品信號過高或飽和 樣品信號過低 樣品和/或標準品CV值較大 微孔板洗板機吸液高度設置過低微珠混合物配制不當 樣品顆粒物或粘度引起干擾 沒有正確調整探針高度 本底孔受污染 洗滌不充分 Luminex只器沒有正確校準或近期沒有校準 沒有正確詞整門設置 微珠區域設置錯誤所用樣品類型不正確只器沒有洗滌或primed 做珠暴露于光下檢測不正確或檢測不到未加入抗體寶山區WB抗體抗體規格