牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基(TryptoneSoyAgar,TSA)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,其特點和制備方法如下:1.**成分**:牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基的主要成分包括牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉(NaCl)和瓊脂。其中,牛肉膏提供碳源和能源,蛋白胨主要提供氮源,NaCl提供無機(jī)鹽,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.4-7.6之間,以保證細(xì)菌的生長環(huán)境。3.**制備方法**:-稱量:準(zhǔn)確稱取牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、NaCl5.0g。-溶化:在燒杯中加入少于所需的水量,用玻璃棒攪勻,然后加熱使其溶解。待藥品完全溶解后,補(bǔ)充水分到所需的總體積。-調(diào)pH:在未調(diào)pH前,先用精密pH試紙測量培養(yǎng)基的原始pH值。如果pH偏酸,用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入1mol/LNaOH,邊加邊攪拌,并隨時用pH試紙測其pH值,直至pH達(dá)7.6。反之,則用1mol/LHCl進(jìn)行調(diào)節(jié)。-分裝:按實驗要求,可將配制的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi)或三角燒瓶內(nèi)。分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。LESEndo瓊脂(也稱為m-Endo Agar或LES)是一種用于微生物學(xué)檢測的培養(yǎng)基,用于水中大腸菌群的濾膜法計數(shù)。選擇性APS肉湯基礎(chǔ)
秕糠馬拉色拉菌(Malasseziafurfur),是一種與人類皮膚共生的酵母菌,有時也會引起皮膚疾病。對于秕糠馬拉色拉菌的固體培養(yǎng)基,其特點主要包括:1.**特定的營養(yǎng)成分**:秕糠馬拉色拉菌的固體培養(yǎng)基通常包含麥芽浸粉、牛膽粉、瓊脂、吐溫40和甘油單油酸酯等成分。這些成分為微生物的生長提供氮源、碳源、凝固劑以及必需的脂肪酸。2.**抑制其他微生物生長**:牛膽粉在培養(yǎng)基中的作用是抑制革蘭氏陽性菌的生長,從而為秕糠馬拉色拉菌提供一個更適宜的生長環(huán)境。3.**促進(jìn)脂肪酸的擴(kuò)散**:吐溫40在培養(yǎng)基中的作用是促進(jìn)甘油單油酸酯在培養(yǎng)基中的擴(kuò)散,這對于秕糠馬拉色拉菌的生長至關(guān)重要,因為它們需要脂肪酸來生長。4.**凝固劑**:瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑,它使得培養(yǎng)基能夠固化,便于微生物在固體表面上生長。5.**優(yōu)化的pH值**:雖然搜索結(jié)果中沒有明確提到pH值,但通常微生物培養(yǎng)基的pH值會根據(jù)微生物的生長需求進(jìn)行調(diào)整。對于秕糠馬拉色拉菌,其生長比較好的條件pH值通常在5.0至6.8之間。6.**培養(yǎng)溫度和時間**:秕糠馬拉色拉菌的培養(yǎng)溫度通常為30°C,培養(yǎng)時間為24-48小時。四號瓊脂基礎(chǔ)在DC培養(yǎng)基上,典型的大腸菌群菌落為粉紅色、紫紅色或紅色,菌落周圍可能有膽鹽沉淀環(huán)。
DRBC培養(yǎng)基(Dichloran-RoseBengalChloramphenicolAgar)是一種用于酵母和霉菌分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基。它特別適用于食品中霉菌和酵母菌的計數(shù)和分離。**DRBC培養(yǎng)基的基本成分**包括:-酶水解動植物組織:5.0g/L-葡萄糖:10.0g/L-磷酸二氫鉀:1.0g/L-硫酸鎂:0.5g/L-氯硝銨:0.002g/L-虎紅鈉鹽:0.025g/L-氯霉素:0.1g/L-瓊脂:15.0g/L**pH值**通常控制在5.6±0.2(25℃)。**配制方法**一般是:1.稱取31.6克DRBC培養(yǎng)基干粉。2.加入1升蒸餾水或純化水。3.攪拌加熱煮沸至完全溶解。4.121℃高壓滅菌15分鐘后備用。**使用方法**:-將滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右,傾入無菌平皿中。-接種樣品后,在25±1℃下進(jìn)行培養(yǎng)。**培養(yǎng)結(jié)果**:-酵母菌和霉菌在DRBC培養(yǎng)基上會形成粉紅色的菌落。-大腸桿菌和枯草芽孢桿菌等細(xì)菌在該培養(yǎng)基上會被抑制。**儲存條件**:-應(yīng)在避光、干燥處儲存。-保質(zhì)期通常為三年。**質(zhì)量控制**:-釀酒酵母ATCC9763在DRBC培養(yǎng)基上生長良好,形成粉紅色菌落。-大腸埃希氏菌ATCC25922和枯草芽孢桿菌ATCC6633在該培養(yǎng)基上應(yīng)被抑制。DRBC培養(yǎng)基是按照ISO21527-1標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)的,適用于食品和動物飼料中酵母和霉菌的計數(shù)。
腦心浸出液肉湯(BrainHeartInfusionBroth,簡稱BHI)是一種使用的微生物培養(yǎng)基,其特點如下:1.**營養(yǎng)豐富**:BHI培養(yǎng)基含有牛心浸粉、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉和磷酸氫二鈉等成分,為多種微生物提供碳源、氮源、維生素和生長因子。這種培養(yǎng)基特別適合培養(yǎng)苛養(yǎng)型致病微生物,如鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌等。2.**pH穩(wěn)定**:BHI培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.4±0.2(25℃),這為微生物的生長提供了適宜的酸堿環(huán)境。3.**非選擇性**:BHI培養(yǎng)基是非選擇性的,意味著它能夠支持細(xì)菌、霉菌和酵母菌等多種微生物的生長。4.**應(yīng)用廣**:BHI培養(yǎng)基可用于從臨床標(biāo)本中進(jìn)行需氧細(xì)菌的初步分離,也可用于培養(yǎng)單增李斯特菌、葡萄球菌等,以及進(jìn)行血漿凝固酶試驗和藥敏實驗。5.**制備方法**:將BHI培養(yǎng)基的干粉加入到蒸餾水中,加熱煮沸以完全溶解,然后在121°C條件下高壓蒸汽滅菌15分鐘。6.**儲存條件**:BHI培養(yǎng)基通常在避光、干燥的條件下保存,未開封的保質(zhì)期可達(dá)三年。7.**質(zhì)量控制**:使用特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行生長測試,確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn),如糞腸球菌ATCC29212、金黃色葡萄球菌ATCC6538等。在VRBA培養(yǎng)基上,大腸桿菌菌落為帶有沉淀環(huán)的紫紅色或紅色,而其他非目標(biāo)菌則可能呈現(xiàn)不同的顏色和形態(tài) 。
尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測細(xì)菌是否具有尿素酶活性的微生物培養(yǎng)基。其特點主要包括:1.**成分**:尿素培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、氯化鈉、磷酸二氫鉀、尿素、葡萄糖、酚紅指示劑和瓊脂等。蛋白胨提供碳源和氮源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸二氫鉀作為緩沖劑;尿素作為底物檢測細(xì)菌是否具有尿素酶活性;酚紅作為pH指示劑,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保證微生物的生長環(huán)境和酶活性的發(fā)揮。3.**尿素酶檢測**:某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶,將尿素分解產(chǎn)生氨,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,酚紅指示劑在pH升高時變色(通常為粉紅色),通過觀察顏色變化來判斷細(xì)菌是否具有尿素酶活性。4.**配制方法**:將除尿素和瓊脂以外的成分配好,并校正pH,加入瓊脂,加熱溶化并分裝。高壓滅菌后,冷至50~55℃,加入經(jīng)除菌過濾的尿素溶液,pH應(yīng)為7.2±0.1。分裝于滅菌試管內(nèi),放成斜面?zhèn)溆谩?.**應(yīng)用**:尿素培養(yǎng)基主要用于鑒定革蘭氏陰性菌中的尿素酶活性,如用于腸桿菌科細(xì)菌的鑒定,例如大腸埃希菌和奇異變形桿菌等細(xì)菌具有尿素酶活性,而鮑曼不動桿菌則不具備尿素酶活性。MIO培養(yǎng)基用于細(xì)菌的生化特性鑒定,如沙門氏菌、大腸桿菌等,這些細(xì)菌在MIO培養(yǎng)基上會表現(xiàn)特定的生化反應(yīng)。假單胞菌瓊脂培養(yǎng)基P基礎(chǔ)
TSI 培養(yǎng)基可根據(jù)細(xì)菌的不同反應(yīng)特征,有效區(qū)分大腸埃希氏菌、沙門菌屬等常見腸道菌。選擇性APS肉湯基礎(chǔ)
TGE肉湯(含TTC)是一種用于細(xì)菌總數(shù)測定的培養(yǎng)基,其特點和制備方法如下:1.**成分**:TGE肉湯的主要成分包括酵母浸粉、牛肉浸粉、葡萄糖和三苯基四氮唑氯化物(TTC)。其中,酵母浸粉和牛肉浸粉提供碳源、氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類提供能源;TTC作為指示劑,用于檢測細(xì)菌的生長活性。2.**pH值**:TGE肉湯的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃)。3.**制備方法**:-稱取18g的TGE肉湯干粉,加入1L的蒸餾水或去離子水中。-加熱攪拌直至完全溶解。-在121℃下高壓滅菌15分鐘。-待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,即可使用。4.**應(yīng)用**:TGE肉湯(含TTC)用于濾膜法細(xì)菌總數(shù)計數(shù),特別適用于奶制品中細(xì)菌總數(shù)的測定。5.**質(zhì)量控制**:按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923等,放置35±2℃需氧培養(yǎng)18-24小時,以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)。6.**儲存條件**:TGE肉湯(含TTC)應(yīng)貯存于常溫、避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。7.**注意事項**:在稱量和操作過程中應(yīng)注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。使用后的干粉培養(yǎng)基應(yīng)立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊。選擇性APS肉湯基礎(chǔ)