DTA培養(yǎng)基的pH值對微生物生長有影響。pH值是描述溶液酸堿性的基本指標(biāo),對微生物的生長和繁殖有深遠(yuǎn)的影響。微生物的適應(yīng)pH范圍各不相同,不同種類的微生物對pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范圍。pH值的過高或過低都可能對微生物的生長造成不利影響。在DTA培養(yǎng)基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),這個(gè)pH值范圍是為嗜熱菌芽孢的分離培養(yǎng)而優(yōu)化的。在這個(gè)pH值下,胰酪蛋白胨能夠提供適宜的碳氮源和生長因子,而葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑,瓊脂作為凝固劑,共同為嗜熱菌芽孢提供適宜的生長環(huán)境。當(dāng)培養(yǎng)基的pH值偏離這個(gè)范圍時(shí),可能會影響微生物的新陳代謝和酶活性,改變細(xì)胞膜的通透性,影響微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄,進(jìn)而影響微生物的生長。例如,如果pH值過低,可能會抑制菌體中某些酶的活性,阻礙新陳代謝;如果pH值過高,可能會導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性改變,影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。因此,在配制和使用DTA培養(yǎng)基時(shí),嚴(yán)格控制pH值是非常重要的,以確保微生物能夠在適宜的環(huán)境中生長。在冷凍保存過程中,使用保護(hù)劑如甘油、血清、糖類等,可以防止因冷凍或水分不斷升華對細(xì)胞的損害 。SDA預(yù)裝培養(yǎng)皿
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值對李斯特氏菌的生長有影響。李斯特氏菌的適生長pH值為7.0±0.2(25℃),這與牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值相匹配。在這個(gè)pH值下,李斯特氏菌能夠良好地生長并表現(xiàn)出其特有的生物學(xué)特性,如β-溶血和七葉苷的水解。pH值對微生物生長至關(guān)重要,因?yàn)樗梢杂绊懀?.**酶活性**:許多微生物的代謝酶在特定的pH值范圍內(nèi)活性高。2.**細(xì)胞膜功能**:pH值的變化可能會干擾細(xì)胞膜的完整性和功能,影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和廢物的排出。3.**代謝途徑**:pH值的變化可能會改變微生物的代謝途徑,從而影響其生長和繁殖。牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)中的pH值是通過添加特殊蛋白胨和可溶性淀粉等成分來維持的,這些成分不僅提供碳氮源、維生素和生長因子,還有助于維持培養(yǎng)基的pH值。如果pH值偏離了范圍,可能會抑制李斯特氏菌的生長,或者導(dǎo)致其他非目標(biāo)微生物過度生長,影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此,為了確保牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)能夠準(zhǔn)確地分離和培養(yǎng)李斯特氏菌,實(shí)驗(yàn)室人員需要仔細(xì)控制和監(jiān)測培養(yǎng)基的pH值。SDA預(yù)裝培養(yǎng)皿TGC液體培養(yǎng)基包含蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、硫乙醇酸鈉、L-胱氨酸、氯化鈉、刃天青和瓊脂等成分 。
TYC培養(yǎng)基(TryptoneYeastCystineMedium)是一種用于分離口腔中鏈球菌(Streptococcusspp)的選擇性培養(yǎng)基。它的特點(diǎn)包括:1.**成分**:TYC培養(yǎng)基通常包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亞硫酸鈉、氯化鈉、磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、無水乙酸鈉和蔗糖等成分,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:TYC培養(yǎng)基用于血鏈球菌的分離,可以添加桿菌肽(0.2U/ml)以增加選擇性;也用于制備變形鏈球菌分離培養(yǎng)基。4.**配制方法**:稱取本品98.0g于1L蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝后在121℃高壓下滅菌15分鐘,滅菌結(jié)束后搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固。5.**質(zhì)量控制**:通過使用特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行測試,可以確保培養(yǎng)基支持目標(biāo)菌株的生長。6.**儲存條件**:未配制的培養(yǎng)基粉末應(yīng)密封保存在陰涼干燥處。7.**結(jié)果觀察**:在TYC培養(yǎng)基上,可以觀察到細(xì)菌的生長情況,用于進(jìn)一步的鑒定和分析。TYC培養(yǎng)基因其高選擇性和特異性,是檢測口腔中鏈球菌污染的重要工具。
四號瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-無水亞硫酸鈉:3.0g-十二烷基硫酸鈉:0.5g-豬膽汁粉:5.0g-雷佛奴爾:0.03g-慶大霉素:500U-瓊脂:15.0g-pH值約為8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉,加入到1L蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-冷卻至50-55℃時(shí),每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。-待凝固后備用。4.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長因子。-氯化鈉維持均衡的滲透壓。-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長。-檸檬酸鈉、十二烷基硫酸鈉、牛膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH可抑制革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性雜菌。-霍亂弧菌對酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強(qiáng)其生長。-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。下層培養(yǎng)基成分則包括血消化湯、瓊脂、葡萄糖和酚紅溶液。這些成分為細(xì)菌提供碳源、氮源。
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)是一種專門設(shè)計(jì)用于分離和培養(yǎng)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。除了李斯特氏菌,它也可以用來分離其他類型的細(xì)菌,盡管其選擇性成分主要針對李斯特氏菌。**特點(diǎn)**:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎(chǔ)包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七葉苷、檸檬酸鐵銨、葡萄糖、氯化鋰、瓊脂和酚紅等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌,特別是非李斯特氏菌的生長。4.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長時(shí),會水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環(huán)。盡管PALCAM瓊脂基礎(chǔ)主要用于李斯特氏菌的分離,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和腸球菌等,偶爾也能在該培養(yǎng)基上生長,利用甘露醇產(chǎn)酸使菌落和其周圍的培養(yǎng)基呈黃色。
某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶,將尿素分解產(chǎn)生氨,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,酚紅指示劑在pH升高時(shí)變色(通常為粉紅色)。SDA預(yù)裝培養(yǎng)皿
疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)(AzideBloodAgarBase)是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于從糞便、污水和其他樣本中分離和檢測鏈球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特點(diǎn)和配制方法:**特點(diǎn)**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化鈉、疊氮鈉和瓊脂等成分,其中疊氮鈉作為選擇性抑制劑,對大多數(shù)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,但允許某些革蘭氏陽性菌如鏈球菌和葡萄球菌的生長。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:除了用于分離培養(yǎng)鏈球菌和葡萄球菌,疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)還可用于測定溶血反應(yīng)。4.**溶血反應(yīng)**:在該培養(yǎng)基上,可以觀察到α溶血(培養(yǎng)基變綠)、β溶血(菌落周圍培養(yǎng)基變透明)和γ溶血(培養(yǎng)基無變化)。**配制方法**:1.稱取33.2g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.121℃高壓滅菌15分鐘。4.冷卻至50℃左右,加入50mL無菌羊血,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。**注意事項(xiàng)**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸疊氮鈉,配制時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,并佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備。-培養(yǎng)基中含有的疊氮鈉具有劇毒,應(yīng)妥善處理和保存。SDA預(yù)裝培養(yǎng)皿