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Mueller-Hinton瓊脂平板

來源: 發(fā)布時間:2024年10月16日

輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)基礎(chǔ)是一種用于分離培養(yǎng)輕型唾液鏈球菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是使用輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)進行細菌分離和鑒定的步驟:1.**制備培養(yǎng)基**:-稱取90gMSA粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-加熱煮沸至完全溶解。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入1mL無菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。2.**接種樣本**:-將待測樣本如咽拭子、尿液或其他臨床樣本進行適當(dāng)?shù)南♂尅?將稀釋后的樣本均勻地涂布在MSA平板上。3.**培養(yǎng)**:-將接種后的培養(yǎng)皿置于35-37°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48小時。4.**觀察菌落生長**:-觀察培養(yǎng)基上生長的菌落,注意菌落的顏色、形態(tài)和大小。-腸球菌在MSA上通常形成藍色-黑色的菌落。5.**挑選可疑菌落**:-挑取可疑的菌落進行純化培養(yǎng)。6.**進行生化試驗**:-對純化后的菌株進行一系列的生化試驗,如糖發(fā)酵試驗、CAMP試驗、膽汁七葉苷試驗等,以進一步鑒定菌種。7.**結(jié)果分析**:-根據(jù)菌落特征和生化試驗結(jié)果,結(jié)合菌株的形態(tài)學(xué)特征,進行菌種的鑒定。8.**報告結(jié)果**:-將鑒定結(jié)果整理成報告,包括菌株的名稱、數(shù)量和相關(guān)的生化特性。胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)皿可以根據(jù)微生物的形態(tài)、生長速率、菌落顏色等特征進行初步鑒定。Mueller-Hinton瓊脂平板

Mueller-Hinton瓊脂平板,培養(yǎng)皿

牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)是一種用于分離培養(yǎng)李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化鈉、七葉苷、檸檬酸鐵銨、氯化鋰和瓊脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特點**:1.**選擇性**:含有氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如多粘菌素E、放線菌酮、吖啶黃素、頭孢雙硫唑甲氧、磷霉素),這些成分能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌的生長,特別是非李斯特氏菌。2.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng),符合ISO和SN標準。3.**配制方法**:通常稱取5.85g的OXA基礎(chǔ)粉末,溶解在100mL蒸餾水中,高壓滅菌15分鐘后冷卻至50℃,再加入配套的添加劑,混勻后傾入無菌平皿備用。4.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在OXA培養(yǎng)基上生長時,會形成黑色菌落,并且菌落周圍可能有黑色環(huán)。牛津瓊脂基礎(chǔ)因其高選擇性和特異性,是檢測食品和水樣本中李斯特氏菌污染的重要工具。Mueller-Hinton瓊脂平板TTC的顯色作用可以使大腸埃希菌等產(chǎn)生紅色的菌落。

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芽孢桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)是一種專為芽孢桿菌屬細菌設(shè)計的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**營養(yǎng)成分**:通常包含碳源、氮源以及促進芽孢形成的必需微量元素。例如,葡萄糖作為碳源,硫酸銨或酵母提取物作為氮源。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃),以保證細菌的良好生長。3.**配方**:一個典型的芽孢桿菌培養(yǎng)基配方可能包含葡萄糖、磷酸鈣、硫酸銨、氯化鉀、七水硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵和酵母提取物等成分。4.**制備方法**:首先稱取培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,接種菌種,并在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時間。5.**應(yīng)用**:主要用于芽孢桿菌的平板計數(shù),可以用于檢測和分離芽孢桿菌,包括枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等。6.**注意事項**:由于培養(yǎng)基中含有不溶性磷酸鈣,滅菌后可能會有白色沉淀,因此在倒平板前需要充分搖勻培養(yǎng)基,以確保磷酸鈣均勻分布。7.**質(zhì)量控制**:接種質(zhì)控菌株后,應(yīng)在36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72小時,以驗證培養(yǎng)基的性能和菌株的生長情況。

乙基紫疊氮鈉肉湯(EthylVioletAzideBroth,EVA)是一種用于微生物培養(yǎng)的選擇性培養(yǎng)基,特別適合于鏈球菌的增菌培養(yǎng)。以下是它的一些特點和用法:**特點**:1.**成分**:含有酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、疊氮鈉和乙基紫等成分。2.**pH值**:pH值控制在7.0±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:疊氮鈉可以抑制革蘭氏陰性細菌的生長,特別是對變形桿菌的抑制效果。4.**應(yīng)用**:主要用于鏈球菌的增菌培養(yǎng),也可用于其他需氧菌和兼性厭氧菌的培養(yǎng)。**配制方法**:1.稱取35.8g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水。2.加熱攪拌至完全溶解。3.分裝后,在121℃高壓下滅菌15分鐘。**質(zhì)量控制**:-制備好的培養(yǎng)基應(yīng)進行pH值、無菌性檢查和適用性檢查。-培養(yǎng)基的保存應(yīng)避光、密封,并在已驗證的條件下貯藏。**應(yīng)用**:-用于鏈球菌的分離培養(yǎng),通過觀察菌落的生長情況和特征進行鑒定。**注意事項**:-在配制和操作過程中,應(yīng)避免攝入、吸入、皮膚接觸,并在通風(fēng)櫥中進行,佩戴適當(dāng)?shù)膫€人防護裝備。NAC瓊脂培養(yǎng)皿可以用于微生物的計數(shù)和定量,通過培養(yǎng)皿計數(shù)法可以快速準確地確定微生物的數(shù)量。

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胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)(Trypticase-Soy-PolymyxinBrothBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點和用途:1.**成分**:該培養(yǎng)基的主要成分包括胰酪胨、植物胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀和葡萄糖。胰酪胨和植物胨提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為碳源;磷酸氫二鉀作為緩沖劑;氯化鈉幫助維持滲透壓。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),為微生物提供適宜的生長環(huán)境。3.**用途**:主要用于蠟樣芽孢桿菌的選擇性增菌培養(yǎng),也可用于MPN值測定和消毒劑消毒效果的測試。4.**添加劑**:在使用時,需要添加多粘菌素B以抑制雜菌的生長,促進目標微生物蠟樣芽孢桿菌的生長。多粘菌素B的添加量根據(jù)產(chǎn)品說明進行,例如每100ml培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加1支多粘菌素B(1mg)或每225ml培養(yǎng)基添加1支多粘菌素B(2.25萬單位)。5.**制備方法**:通常需要稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,煮沸后進行高壓滅菌。滅菌后冷卻至50℃左右,加入多粘菌素B,混勻后無菌分裝于滅菌試管中備用。6.**質(zhì)量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在30℃下培養(yǎng)48小時,應(yīng)觀察到良好的生長和溶液混濁,以驗證培養(yǎng)基的有效性。

EMB是Eosin Methylene Blue的縮寫,這是一種含有兩種染料的培養(yǎng)基。Mueller-Hinton瓊脂平板

改良的配方提高了培養(yǎng)基的靈敏性和適用性。通過更加準確的成分控制,優(yōu)化了其抑菌效果、增強了生長因子。Mueller-Hinton瓊脂平板

PK瓊脂培養(yǎng)基,也稱為Pikovskaya'sAgar,是一種用于檢測解磷微生物(phosphatesolubilizingmicroorganisms)的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的原理基于解磷微生物在生長過程中能夠?qū)⒉蝗苄缘牧姿猁}轉(zhuǎn)化為可溶性形式,從而使得培養(yǎng)基中的磷酸鈣溶解,導(dǎo)致培養(yǎng)基的透明度發(fā)生變化。**配方組成**:-酵母提取物:0.5g-D-葡萄糖:10.0g-磷酸鈣:5.0g-硫酸銨:0.5g-氯化鉀:0.2g-硫酸鎂:0.1g-硫酸錳:0.0001g-硫酸亞鐵:0.0001g-瓊脂:15.0g**配制方法**:1.使用1000ml蒸餾水重懸31.3g培養(yǎng)基。2.不斷攪動并加熱,煮沸1分鐘使培養(yǎng)基完全溶解。3.121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘。4.冷卻至50°C時,分裝15ml培養(yǎng)基到每個無菌培養(yǎng)皿中。**培養(yǎng)條件**:-通常在35°C下培養(yǎng)48小時。**觀察指標**:-在PK瓊脂培養(yǎng)基上生長的解磷微生物菌落周圍的培養(yǎng)基由不透明變透明,通過觀察培養(yǎng)基的透明度變化來判斷微生物是否具有解磷能力。**保存條件**:-密封,2-30°C避光保存。**注意事項**:-避免吸入和皮膚接觸。這種培養(yǎng)基在土壤微生物學(xué)、植物病理學(xué)和環(huán)境微生物學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,特別是在研究植物-微生物相互作用以及微生物對土壤養(yǎng)分循環(huán)的貢獻方面。Mueller-Hinton瓊脂平板

標簽: 培養(yǎng)皿
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