輕唾瓊脂培養基(MSA)基礎是一種用于分離培養輕型唾液鏈球菌的選擇性培養基。以下是使用輕唾瓊脂培養基(MSA)進行細菌分離和鑒定的步驟:1.**制備培養基**:-稱取90gMSA粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-加熱煮沸至完全溶解。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入1mL無菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無菌培養皿中。2.**接種樣本**:-將待測樣本如咽拭子、尿液或其他臨床樣本進行適當的稀釋。-將稀釋后的樣本均勻地涂布在MSA平板上。3.**培養**:-將接種后的培養皿置于35-37°C的培養箱中培養18-48小時。4.**觀察菌落生長**:-觀察培養基上生長的菌落,注意菌落的顏色、形態和大小。-腸球菌在MSA上通常形成藍色-黑色的菌落。5.**挑選可疑菌落**:-挑取可疑的菌落進行純化培養。6.**進行生化試驗**:-對純化后的菌株進行一系列的生化試驗,如糖發酵試驗、CAMP試驗、膽汁七葉苷試驗等,以進一步鑒定菌種。7.**結果分析**:-根據菌落特征和生化試驗結果,結合菌株的形態學特征,進行菌種的鑒定。8.**報告結果**:-將鑒定結果整理成報告,包括菌株的名稱、數量和相關的生化特性。胰蛋白胨瓊脂培養皿可以根據微生物的形態、生長速率、菌落顏色等特征進行初步鑒定。Mueller-Hinton瓊脂平板
牛津瓊脂(OXA)基礎是一種用于分離培養李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化鈉、七葉苷、檸檬酸鐵銨、氯化鋰和瓊脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特點**:1.**選擇性**:含有氯化鋰和抗生物質添加劑(如多粘菌素E、放線菌酮、吖啶黃素、頭孢雙硫唑甲氧、磷霉素),這些成分能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數革蘭氏陽性菌的生長,特別是非李斯特氏菌。2.**應用**:主要用于食品、水和污水樣本中李斯特氏菌的選擇性分離培養,符合ISO和SN標準。3.**配制方法**:通常稱取5.85g的OXA基礎粉末,溶解在100mL蒸餾水中,高壓滅菌15分鐘后冷卻至50℃,再加入配套的添加劑,混勻后傾入無菌平皿備用。4.**結果觀察**:李斯特氏菌在OXA培養基上生長時,會形成黑色菌落,并且菌落周圍可能有黑色環。牛津瓊脂基礎因其高選擇性和特異性,是檢測食品和水樣本中李斯特氏菌污染的重要工具。Mueller-Hinton瓊脂平板TTC的顯色作用可以使大腸埃希菌等產生紅色的菌落。
芽孢桿菌培養基基礎是一種專為芽孢桿菌屬細菌設計的微生物培養基,具有以下特點:1.**營養成分**:通常包含碳源、氮源以及促進芽孢形成的必需微量元素。例如,葡萄糖作為碳源,硫酸銨或酵母提取物作為氮源。2.**pH值**:培養基的pH值通??刂圃?.0±0.2(25℃),以保證細菌的良好生長。3.**配方**:一個典型的芽孢桿菌培養基配方可能包含葡萄糖、磷酸鈣、硫酸銨、氯化鉀、七水硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵和酵母提取物等成分。4.**制備方法**:首先稱取培養基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當溫度,接種菌種,并在恒溫培養箱中培養一定時間。5.**應用**:主要用于芽孢桿菌的平板計數,可以用于檢測和分離芽孢桿菌,包括枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等。6.**注意事項**:由于培養基中含有不溶性磷酸鈣,滅菌后可能會有白色沉淀,因此在倒平板前需要充分搖勻培養基,以確保磷酸鈣均勻分布。7.**質量控制**:接種質控菌株后,應在36℃±1℃恒溫培養箱中培養48-72小時,以驗證培養基的性能和菌株的生長情況。
乙基紫疊氮鈉肉湯(EthylVioletAzideBroth,EVA)是一種用于微生物培養的選擇性培養基,特別適合于鏈球菌的增菌培養。以下是它的一些特點和用法:**特點**:1.**成分**:含有酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、疊氮鈉和乙基紫等成分。2.**pH值**:pH值控制在7.0±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環境。3.**選擇性**:疊氮鈉可以抑制革蘭氏陰性細菌的生長,特別是對變形桿菌的抑制效果好。4.**應用**:主要用于鏈球菌的增菌培養,也可用于其他需氧菌和兼性厭氧菌的培養。**配制方法**:1.稱取35.8g培養基粉末,加入1000mL蒸餾水。2.加熱攪拌至完全溶解。3.分裝后,在121℃高壓下滅菌15分鐘。**質量控制**:-制備好的培養基應進行pH值、無菌性檢查和適用性檢查。-培養基的保存應避光、密封,并在已驗證的條件下貯藏。**應用**:-用于鏈球菌的分離培養,通過觀察菌落的生長情況和特征進行鑒定。**注意事項**:-在配制和操作過程中,應避免攝入、吸入、皮膚接觸,并在通風櫥中進行,佩戴適當的個人防護裝備。NAC瓊脂培養皿可以用于微生物的計數和定量,通過培養皿計數法可以快速準確地確定微生物的數量。
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(Trypticase-Soy-PolymyxinBrothBase)是一種用于微生物培養的培養基,具有以下特點和用途:1.**成分**:該培養基的主要成分包括胰酪胨、植物胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀和葡萄糖。胰酪胨和植物胨提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為碳源;磷酸氫二鉀作為緩沖劑;氯化鈉幫助維持滲透壓。2.**pH值**:培養基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),為微生物提供適宜的生長環境。3.**用途**:主要用于蠟樣芽孢桿菌的選擇性增菌培養,也可用于MPN值測定和消毒劑消毒效果的測試。4.**添加劑**:在使用時,需要添加多粘菌素B以抑制雜菌的生長,促進目標微生物蠟樣芽孢桿菌的生長。多粘菌素B的添加量根據產品說明進行,例如每100ml培養基基礎添加1支多粘菌素B(1mg)或每225ml培養基添加1支多粘菌素B(2.25萬單位)。5.**制備方法**:通常需要稱取一定量的培養基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,煮沸后進行高壓滅菌。滅菌后冷卻至50℃左右,加入多粘菌素B,混勻后無菌分裝于滅菌試管中備用。6.**質量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在30℃下培養48小時,應觀察到良好的生長和溶液混濁,以驗證培養基的有效性。
改良的配方提高了培養基的靈敏性和適用性。通過更加準確的成分控制,優化了其抑菌效果、增強了生長因子。Mueller-Hinton瓊脂平板
PK瓊脂培養基,也稱為Pikovskaya'sAgar,是一種用于檢測解磷微生物(phosphatesolubilizingmicroorganisms)的培養基。這種培養基的原理基于解磷微生物在生長過程中能夠將不溶性的磷酸鹽轉化為可溶性形式,從而使得培養基中的磷酸鈣溶解,導致培養基的透明度發生變化。**配方組成**:-酵母提取物:0.5g-D-葡萄糖:10.0g-磷酸鈣:5.0g-硫酸銨:0.5g-氯化鉀:0.2g-硫酸鎂:0.1g-硫酸錳:0.0001g-硫酸亞鐵:0.0001g-瓊脂:15.0g**配制方法**:1.使用1000ml蒸餾水重懸31.3g培養基。2.不斷攪動并加熱,煮沸1分鐘使培養基完全溶解。3.121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘。4.冷卻至50°C時,分裝15ml培養基到每個無菌培養皿中。**培養條件**:-通常在35°C下培養48小時。**觀察指標**:-在PK瓊脂培養基上生長的解磷微生物菌落周圍的培養基由不透明變透明,通過觀察培養基的透明度變化來判斷微生物是否具有解磷能力。**保存條件**:-密封,2-30°C避光保存。**注意事項**:-避免吸入和皮膚接觸。這種培養基在土壤微生物學、植物病理學和環境微生物學等領域有著廣泛的應用,特別是在研究植物-微生物相互作用以及微生物對土壤養分循環的貢獻方面。Mueller-Hinton瓊脂平板