肉浸液肉湯是一種基礎(chǔ)的微生物培養(yǎng)基,其主要特點和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉湯主要由絞碎牛肉、氯化鈉、蛋白胨和磷酸氫二鉀組成,再加上一定量的蒸餾水。具體配比為:絞碎牛肉500g、氯化鈉5g、蛋白胨10g、磷酸氫二鉀2g、蒸餾水1000mL。2.**制作方法**:首先將絞碎的去筋膜無油脂牛肉與蒸餾水混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時,使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補足原量。然后加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:肉浸液肉湯通常用于培養(yǎng)那些營養(yǎng)要求不是特別高的細(xì)菌,如溶血性鏈球菌及其他營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了細(xì)菌生長所需的氮源、維生素和生長因子。4.**培養(yǎng)特征**:在肉浸液肉湯中,細(xì)菌可以很好地生長,通常表現(xiàn)為肉湯混濁,這是由于細(xì)菌的代謝活動導(dǎo)致的。5.**儲存**:肉浸液肉湯的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲存于25℃下陰涼干燥處,開過封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意密封儲存。VRBA培養(yǎng)基對于革蘭氏陰性菌,尤其是腸道細(xì)菌,具有較強的選擇性。DNA酶試驗瓊脂培養(yǎng)皿
DTA培養(yǎng)基,也稱為葡萄糖胰蛋白胨瓊脂,是一種用于分離培養(yǎng)嗜熱菌芽孢的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點:1.**用途**:DTA培養(yǎng)基主要用于乳制品中嗜熱需氧芽孢菌計數(shù),以及嗜熱菌芽孢(包括需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養(yǎng)。2.**成分**:其配方包含胰酪蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和溴甲酚紫。具體成分為每升培養(yǎng)基中包含胰酪蛋白胨10.0克、葡萄糖5.0克、瓊脂15.0克和溴甲酚紫0.04克。3.**pH值**:DTA培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在6.7±0.1(25℃)。4.**檢驗原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。5.**用法**:稱取DTA培養(yǎng)基30.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。6.**生長特征**:嗜熱脂肪芽孢桿菌在DTA培養(yǎng)基上的生長特征為黃色菌落。7.**質(zhì)量控制**:進行微生物靈敏度試驗時,按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置55℃需氧培養(yǎng)48小時。回收率計算時,用TSA瓊脂做對照培養(yǎng)基。8.**儲存條件**:DTA培養(yǎng)基應(yīng)貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋;貯存期三年。Schaedler瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿改良后的Letheen瓊脂培養(yǎng)基不僅限于傳統(tǒng)的應(yīng)用,還可能拓展到食品微生物學(xué)、環(huán)境微生物學(xué)等領(lǐng)域。
胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA)是一種常用的微生物固體培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于各種細(xì)菌的分離和培養(yǎng)。以下是TSA培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點:1.**成分**:TSA培養(yǎng)基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone,15g/L)、大豆胨(Soytone,5g/L)、氯化鈉(5g/L)和瓊脂(15g/L),這些成分為細(xì)菌提供氮源、維生素、生長因子以及維持滲透壓和凝固培養(yǎng)基。2.**pH值**:TSA培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.3±0.2(25℃),以滿足大多數(shù)細(xì)菌生長的需要。3.**用途**:TSA培養(yǎng)基適用于多種細(xì)菌的培養(yǎng),包括非選擇性增菌培養(yǎng)及用于阪崎腸桿菌的純化培養(yǎng)和產(chǎn)黃色素試驗。4.**制備方法**:將TSA培養(yǎng)基的干粉加入到蒸餾水中,加熱攪拌至完全溶解,通常分裝到試管或平皿中,經(jīng)過高壓滅菌后備用。5.**保存條件**:未開封的TSA培養(yǎng)基通常在室溫下避光保存,保質(zhì)期可達三年。開封后應(yīng)旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊,并根據(jù)存放條件適當(dāng)延長保存期。6.**注意事項**:在稱量和操作過程中應(yīng)注意無菌操作,避免微生物污染。使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,防止吸潮。粉塵可能引起呼吸道不適,操作時應(yīng)佩戴口罩。7.**應(yīng)用**:TSA培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、食品檢測和環(huán)境保護等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。
半固體儲存培養(yǎng)基是一種在微生物學(xué)研究和細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域中扮演重要角色的培養(yǎng)基。它主要用于觀察微生物的動力、菌種的保藏與運輸、厭氧菌的培養(yǎng)、菌種鑒定、細(xì)胞培養(yǎng)、噬菌體效價測定以及微生物趨化性研究等。半固體培養(yǎng)基通常由液體培養(yǎng)基加入少量凝固劑制成,例如瓊脂的用量在0.2~0.7%之間。在具體應(yīng)用上,半固體培養(yǎng)基可以用于以下方面:1.**微生物動力觀察**:通過推測細(xì)菌是否有鞭毛來進行鑒定。2.**菌種保藏與運輸**:便于菌種的短時間保存和長途運輸。3.**厭氧菌培養(yǎng)**:適用于厭氧菌的培養(yǎng),對于研究厭氧微生物的生長和代謝至關(guān)重要。4.**菌種鑒定**:通過觀察菌落的形態(tài)和生長特性來區(qū)分不同的微生物種類。5.**細(xì)胞培養(yǎng)**:在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,半固體培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞、細(xì)胞克隆、細(xì)胞表達和細(xì)胞毒性等實驗。6.**噬菌體效價測定**:用于雙層平板法測定噬菌體的效價,是研究病毒與宿主相互作用的重要手段。7.**微生物趨化性研究**:幫助研究微生物的趨化性,即微生物對化學(xué)物質(zhì)的定向移動反應(yīng)。假單胞菌分離瓊脂培養(yǎng)皿被用于臨床醫(yī)學(xué)中的病原菌檢測和分離,幫助醫(yī)生診斷假單胞菌相關(guān)的疾病。
尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測和分離細(xì)菌的生化培養(yǎng)基,特別是那些能夠產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌,如某些變形桿菌和幽門螺旋桿菌。以下是尿素培養(yǎng)基的一些特點和配制方法:1.**配方組成**:-蛋白胨:1.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:1.0g-磷酸二氫鉀:2.0g-酚紅:0.012g-瓊脂:20.0g-蒸餾水:1000ml-40%尿素水:5ml2.**配制方法**:-將上述成分(除葡萄糖和尿素外)溶解在蒸餾水中,加熱煮沸,調(diào)節(jié)pH至7.2,過濾。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入無菌的40%尿素水5ml,混勻。-分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?.**用途**:-主要用于細(xì)菌的脲酶檢測。-用于鑒定變形桿菌屬和其他能夠分解尿素的細(xì)菌。4.**培養(yǎng)條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)24-48小時。5.**觀察指標(biāo)**:-培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,當(dāng)細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶分解尿素產(chǎn)生氨時,培養(yǎng)基顏色由黃色變?yōu)榧t色,表示細(xì)菌具有脲酶活性。6.**保存條件**:-通常在2-8°C下保存,保質(zhì)期三年。7.**注意事項**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸。-配制過程中應(yīng)在無菌條件下操作。尿素培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在檢測和研究能夠分解尿素的細(xì)菌方面。去氧膽酸鹽瓊脂這種瓊脂培養(yǎng)基在檢測大腸桿菌等腸道革蘭氏陰性菌方面具有一定的選擇性。胰蛋白胨瓊脂平板
對乙酰胺瓊脂培養(yǎng)皿(Tryptone Soya Agar plate,簡稱TSA培養(yǎng)皿)是一種常用的微生物培養(yǎng)基。DNA酶試驗瓊脂培養(yǎng)皿
GC肉湯培養(yǎng)基(GCBrothMedium),也稱為胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基,是一種加富培養(yǎng)基,通常用于培養(yǎng)營養(yǎng)需求較高的微生物,特別是那些難以培養(yǎng)的細(xì)菌。以下是GC肉湯培養(yǎng)基的一些特點和配制方法:1.**配方組成**:-ProteosePeptone(胰蛋白胨):15.0g-CornStarch(玉米淀粉):1.0g-DipotassiumPhosphate(磷酸氫二鉀):4.0g-MonopotassiumPhosphate(磷酸二氫鉀):1.0g-SodiumChloride(氯化鈉):5.0g-DIWater(蒸餾水):500ml-將pH值調(diào)節(jié)至7.2+/-0.22.**配制方法**:-將上述成分溶解在蒸餾水中,加熱使培養(yǎng)基完全溶解。-將溶液在121°C下高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50°C,然后加入無菌的2%血紅蛋白溶液和其他添加劑。-混合均勻后,分配到培養(yǎng)容器中。3.**用途**:-作為致病菌的富集培養(yǎng)基。-用于配制血液培養(yǎng)基和血瓊脂培養(yǎng)基。-用于無菌試驗,檢測好氧菌污染。-在醫(yī)學(xué)上,常用來培養(yǎng)從臨床樣品中分離的致病微生物。-用于藥敏試驗和紙片擴散法試驗。4.**保存條件**:-密封,2-25°C保存。5.**注意事項**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸。GC肉湯培養(yǎng)基因其營養(yǎng)豐富,適用于多種微生物的生長,包括好氧菌、厭氧菌。它在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著廣泛的應(yīng)用。DNA酶試驗瓊脂培養(yǎng)皿