LB瓊脂(Miller)是一種用于實驗室的微生物培養(yǎng)基,特別適合于大腸桿菌(E.coli)的培養(yǎng)。這種培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化鈉,以及作為凝固劑的瓊脂。Miller配方的特點是含有較高的氯化鈉濃度,這有助于選擇性地培養(yǎng)某些細菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化鈉(NaCl):10.0g-瓊脂(Agar):15.0g**制備方法**:1.將40克LB瓊脂粉末加入到1升蒸餾水中。2.加熱至沸騰,同時攪拌以確保粉末完全溶解。3.在121°C下高壓滅菌15分鐘。4.滅菌后,冷卻至50°C,然后分裝到無菌培養(yǎng)皿中。**應(yīng)用**:-適用于非選擇性培養(yǎng)大腸桿菌菌株,用于克隆、質(zhì)粒DNA制備和重組蛋白生產(chǎn)。-當(dāng)加入適當(dāng)?shù)目股镔|(zhì)時,也適合選擇性培養(yǎng)。**特點**:-無需復(fù)雜配置,快速溶解,方便使用。-經(jīng)濟實惠,適合大量培養(yǎng)基的制備。**儲存條件**:-通常建議在常溫(10-30℃)下儲存。LB瓊脂(Miller)因其營養(yǎng)豐富、制備簡單的應(yīng)用,成為分子生物學(xué)和微生物學(xué)實驗室中的標準培養(yǎng)基之一。在實際使用時,應(yīng)嚴格按照產(chǎn)品說明書或相關(guān)標準進行操作,以確保培養(yǎng)效果。EMB是Eosin Methylene Blue的縮寫,這是一種含有兩種染料的培養(yǎng)基。TSAG培養(yǎng)皿
Endo培養(yǎng)基,也稱為遠藤氏瓊脂或EndoAgar,是一種用于微生物學(xué)檢驗的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的檢測。以下是Endo培養(yǎng)基的一些基本信息:**配方**:Endo培養(yǎng)基的典型配方包含蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、亞硫酸鈉和堿性品紅等成分,以及作為凝固劑的瓊脂。具體的配方比例可能根據(jù)不同的供應(yīng)商有所變化。**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)至7.3±0.1(25℃)。**用途**:Endo培養(yǎng)基用于大腸菌群的檢測,特別是在水質(zhì)檢測中,如生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。**使用方法**:通常稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入指定量的蒸餾水或去離子水中,并添加無水乙醇,然后進行高壓滅菌。滅菌結(jié)束后,將培養(yǎng)基搖勻以防瓊脂沉積,備用。**培養(yǎng)基特性**:Endo培養(yǎng)基中的亞硫酸鈉和品紅對革蘭氏陽性菌有弱抑制作用。乳糖發(fā)酵型大腸桿菌和大腸菌群在該培養(yǎng)基上產(chǎn)生乙醛和酸,乙醛與亞硫酸品紅化合物反應(yīng),釋放出品紅,使菌落和周圍培養(yǎng)基變紅色。對于大腸桿菌,該反應(yīng)可能過于強烈,使得品紅結(jié)晶析出,給予菌落長久性的金色金屬光澤。**儲存條件**:Endo培養(yǎng)基通常需要在密封、陰涼干燥處保存,避免攝入、呼入和皮膚接觸。哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)皿EMB培養(yǎng)基的特點是它對大腸桿菌等產(chǎn)酸革蘭氏陰性菌的選擇性較強。
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(FluidThioglycollateMedium,FT)是一種使用的微生物培養(yǎng)基,特別適合于需氧菌、微需氧菌和厭氧菌的培養(yǎng)。以下是FT培養(yǎng)基的特點介紹:1.**營養(yǎng)成分**:FT培養(yǎng)基含有胰酪胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化鈉、L-胱氨酸、硫乙醇酸鹽、瓊脂和刃天青等成分。這些成分為細菌提供碳源、氮源、維生素和生長因子,同時維持適宜的滲透壓。2.**氧梯度環(huán)境**:FT培養(yǎng)基的不同深度提供了從上層的有氧環(huán)境到下層的無氧環(huán)境的梯度,適合不同需氧性的細菌生長。3.**降低氧化還原電位**:胱氨酸、硫乙醇酸鹽和葡萄糖有助于降低培養(yǎng)基的氧化還原電位,防止過氧化物積累對細菌產(chǎn)生毒性,有利于厭氧菌的生長。4.**氧化還原指示劑**:刃天青作為氧化還原指示劑,其顏色變化(氧化時呈紅色,還原時無色)可以指示培養(yǎng)基的氧化還原狀態(tài)。5.**瓊脂作用**:少量瓊脂的加入可以防止液體對流,減少氧氣和二氧化碳的擴散,有利于厭氧環(huán)境的形成。6.**無菌操作**:在滅菌和使用過程中應(yīng)避免搖晃和暴露于空氣中過長,以防止培養(yǎng)基被氧化。
連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基(TetrathionateBroth,TTB)是一種用于分離和富集沙門氏菌的選擇性富集培養(yǎng)基。它通常包含胰酪蛋白胨、動物組織消化物、膽鹽、碳酸鈣、硫代硫酸鈉等成分。這種培養(yǎng)基通過提供特定的營養(yǎng)和抑制劑,有助于沙門氏菌的生長,同時抑制其他雜菌。以下是一些關(guān)于連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方和使用信息:1.**配方**(每升):-胰酪蛋白胨(PancreaticDigestofCasein):2.5g-動物組織消化物(PepticDigestofAnimalTissue):2.5g-膽鹽(BileSalts):1.0g-碳酸鈣(CalciumCarbonate):10.0g-硫代硫酸鈉(SodiumThiosulfate):30.0g-碘(Iodine)和碘化鉀(PotassiumIodide):根據(jù)具體配方調(diào)整2.**配制方法**:-稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入去離子水或蒸餾水。-加熱煮沸以確保所有成分完全溶解。-分裝至適宜的容器中,并進行高壓滅菌。3.**使用說明**:-接種樣品后,培養(yǎng)基可以在35°C或43°C下培養(yǎng)12至24小時。-培養(yǎng)后,可以將培養(yǎng)物接種到其他選擇性培養(yǎng)基上,如XLD瓊脂、亞硫酸鉍瓊脂、SS瓊脂等,以進一步分離和鑒定沙門氏菌。使用VRBA培養(yǎng)皿時,通常將待測樣品涂布在培養(yǎng)皿表面,然后進行培養(yǎng),觀察并鑒定產(chǎn)生的菌落。
膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)是一種用于選擇性分離培養(yǎng)腸道致病菌,特別是沙門氏菌和志賀氏菌的培養(yǎng)基。以下是DHL培養(yǎng)基的一些主要特點:1.**用途**:主要用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng),特別是沙門氏菌和志賀氏菌。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、乳糖、蔗糖、去氧膽酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸鐵銨、中性紅和瓊脂,pH值控制在7.2±0.1(25℃)。3.**檢驗原理**:去氧膽酸鈉和檸檬酸鈉抑制革蘭氏陽性菌及大多數(shù)大腸菌群和變形桿菌,但不影響沙門氏菌的生長;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫產(chǎn)生,使菌落中心呈黑色;中性紅作為pH指示劑,發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈紅色,不發(fā)酵糖的菌落為無色。4.**用法**:稱取65.2g培養(yǎng)基,加熱溶解在1000ml蒸餾水中,待冷至60℃時傾入無菌平皿,無需高壓滅菌。5.**質(zhì)量控制**:使用質(zhì)控菌株進行微生物靈敏度試驗,例如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028和福氏志賀氏菌CMCC(B)51572,觀察其生長率和特異性反應(yīng)。6.**儲存條件**:貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋,保質(zhì)期通常為三年。去氧膽酸鹽瓊脂(DC)培養(yǎng)皿通常在食品衛(wèi)生檢測以及臨床微生物學(xué)實驗中使用,用于檢測腸道細菌的存在。甘油天門冬素瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
瓊脂培養(yǎng)基的制備: 將瓊脂培養(yǎng)基中加入去氧膽酸鹽等特定成分,以制備適合特定實驗?zāi)康牡呐囵B(yǎng)基。TSAG培養(yǎng)皿
含0.05%聚山梨酯80的pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液是一種特殊的緩沖溶液,它在普通的pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液的基礎(chǔ)上添加了聚山梨酯80(Polysorbate80),這是一種非離子型表面活性劑。以下是這種緩沖液的一些特點:1.**表面活性劑**:添加了0.05%的聚山梨酯80,這是一種常用于醫(yī)藥和食品工業(yè)的乳化劑和穩(wěn)定劑。2.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.0,為微生物提供適宜的酸堿環(huán)境。3.**成分**:除了普通的氯化鈉、蛋白胨、磷酸鹽緩沖系統(tǒng)外,還特別添加了聚山梨酯80。4.**用途**:這種緩沖液可能用于需要表面活性劑的特定微生物培養(yǎng),例如某些需要乳化劑才能生長的微生物。5.**增加溶解性**:聚山梨酯80可以增加某些難溶物質(zhì)在緩沖液中的溶解性。6.**配制方法**:配制時除了按照標準方法添加氯化鈉、蛋白胨和磷酸鹽外,還需精確加入0.05%的聚山梨酯80。7.**質(zhì)量控制**:需要對添加聚山梨酯80后的緩沖液進行額外的質(zhì)量控制,確保其穩(wěn)定性和微生物培養(yǎng)效果。8.**儲存條件**:應(yīng)儲存在2~25℃,避光條件下,以保持聚山梨酯80和其他成分的穩(wěn)定性。TSAG培養(yǎng)皿