EEM培養(yǎng)基(Eagle'sMinimumEssentialMedium)是一種用于細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,由HarryEagle研發(fā)。它是一種營養(yǎng)豐富的細胞培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于各種細胞的培養(yǎng),包括貼壁細胞和懸浮細胞。EEM培養(yǎng)基的特點是含有較低的碳酸氫鈉含量,適用于5%CO2條件下的細胞培養(yǎng)。如果培養(yǎng)條件中CO2濃度高于5%,則需要增加碳酸氫鈉的含量。**成分**:EEM培養(yǎng)基包含Earle'ssalts、L-谷氨酰胺、丙酸鈉和碳酸氫鈉等。它還含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,以及其他必要的營養(yǎng)成分。**用途**:EEM培養(yǎng)基適用于多種細胞系的培養(yǎng),包括HeLa細胞、各種成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、人腫瘤細胞等。它也可用于選擇轉(zhuǎn)染DHFR的陰性細胞。**保存條件**:建議在2-8°C避光條件下保存。**產(chǎn)品外觀**:通常為紅色透明液體,無沉淀。**培養(yǎng)基保質(zhì)期**:在正確的保存條件下,培養(yǎng)基的保質(zhì)期通常為12個月。**質(zhì)量控制**:培養(yǎng)基的質(zhì)量控制包括觀察培養(yǎng)基是否有變色、結(jié)塊或成粒、不溶等現(xiàn)象,以及液體培養(yǎng)基是否有pH變化、沉淀物出現(xiàn)、溶液變渾濁或變色等情況。配制方法:通常,EEM培養(yǎng)基會以無菌即用的形式提供,但如果需要自行配制,應(yīng)按照制造商提供的配方和方法進行。
pH7.4磷酸鹽緩沖液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一種廣而使用的生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的緩沖溶液,具有以下特點:1.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.4左右,接近人體血液的pH值,適合細胞和生物分子的生理條件。2.**成分**:主要由磷酸二氫鈉(NaH2PO4)和磷酸氫二鈉(Na2HPO4)組成,這兩種鹽在溶液中可以形成緩沖體系,維持pH值的穩(wěn)定。3.**離子強度**:PBS具有一定的離子強度,可以模擬細胞外液的離子環(huán)境,有助于保持細胞和蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。4.**滲透壓**:PBS的滲透壓接近人體生理鹽水的滲透壓,適合用于細胞懸浮和洗滌,不會引起細胞的滲透壓變化。5.**清潔性**:PBS通常使用去離子水或蒸餾水配制,減少雜質(zhì)和離子對實驗的干擾。6.**兼容性**:PBS與多種生物分子和細胞培養(yǎng)基兼容,常用于細胞培養(yǎng)、免疫學(xué)實驗、蛋白質(zhì)提取和分析等。7.**無菌性**:實驗用的PBS通常需要經(jīng)過高壓滅菌或過濾除菌處理,以保證實驗的無菌條件。8.**多功能性**:除了作為緩沖溶液外,PBS還可以用于稀釋試劑、洗滌實驗器材和樣品等。9.**易于配制**:PBS的配制相對簡單,可以根據(jù)需要調(diào)整磷酸鹽的濃度來改變緩沖能力。TSAST平板改良后的Letheen瓊脂培養(yǎng)基不僅限于傳統(tǒng)的應(yīng)用,還可能拓展到食品微生物學(xué)、環(huán)境微生物學(xué)等領(lǐng)域。
MFC瓊脂(也稱為4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷瓊脂,MUG瓊脂)是一種用于微生物學(xué)檢驗的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的濾膜法檢測,符合中國國家標準(GB)。其配方包含多價蛋白胨、胰蛋白胨、乳糖、酵母粉、三號膽鹽、氯化鈉、苯胺藍、瓊脂、玫紅酸等成分,pH值調(diào)節(jié)至7.4±0.2。這種培養(yǎng)基通過膽鹽的選擇性作用抑制革蘭氏陽性菌,同時利用乳糖作為可發(fā)酵的糖類,結(jié)合指示劑來檢測細菌的代謝活動。MFC瓊脂的檢驗原理是利用胰胨、多胨和酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;乳糖為可發(fā)酵糖類;3號膽鹽抑制革蘭氏陽性菌;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;玫紅酸和苯胺藍為pH指示劑。當(dāng)細菌發(fā)酵乳糖時,會產(chǎn)生酸性物質(zhì),導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化,從而可以觀察到產(chǎn)酸現(xiàn)象。在實際應(yīng)用中,MFC瓊脂可以用于水質(zhì)檢測,特別是飲用水和水源中糞大腸菌群的測定。使用時,將培養(yǎng)基加熱溶解,分裝到試管或平皿中,高壓滅菌后備用。接種樣品后,在適宜的溫度下培養(yǎng),通過觀察培養(yǎng)基上菌落的生長情況和顏色變化來判斷是否存在大腸菌群。MFC瓊脂的制備和使用應(yīng)遵循相關(guān)的國家標準和實驗室操作規(guī)程,以確保檢測結(jié)果的準確性和可靠性。
葉酸測定培養(yǎng)基是一種專門用于測定食品中葉酸含量的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**營養(yǎng)成分**:該培養(yǎng)基包含酪蛋白氨基酸和葡萄糖作為氮源和碳源,乙酸鈉作為選擇劑和能量物質(zhì),以及氯化鈉、硫酸錳等鹽離子和多種維生素成分,為鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)等微生物提供所需的生長因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2,以適應(yīng)特定微生物的生長需求。3.**用途**:主要用于食品中葉酸的微生物測定,如GB5009.211-2022《食品安全國家標準食品中葉酸的測定》中所述。4.**制備方法**:通常將干粉培養(yǎng)基與蒸餾水或去離子水混合,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝試管中,每管5ml,加入標準品或測試樣品,用無菌蒸餾水或去離子水調(diào)整體積至10ml,121℃高壓滅菌5分鐘。5.**質(zhì)量控制**:使用特定的質(zhì)控菌株(如鼠李糖乳桿菌ATCC7469)接種待測試培養(yǎng)基,在36±1℃下培養(yǎng)20-40小時,觀察生長情況,如肉湯混濁和試管呈梯度渾濁。6.**儲存條件**:應(yīng)在避光、干燥處儲存,未開封保質(zhì)期通常為三年。7.**注意事項**:在配制和使用過程中,應(yīng)遵循無菌操作,避免污染,確保水的潔凈程度,因為水中的葉酸殘留或容器的污染直接影響試驗結(jié)果。假單胞菌分離瓊脂培養(yǎng)皿被用于臨床醫(yī)學(xué)中的病原菌檢測和分離,幫助醫(yī)生診斷假單胞菌相關(guān)的疾病。
LB瓊脂(Miller)是一種用于實驗室的微生物培養(yǎng)基,特別適合于大腸桿菌(E.coli)的培養(yǎng)。這種培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化鈉,以及作為凝固劑的瓊脂。Miller配方的特點是含有較高的氯化鈉濃度,這有助于選擇性地培養(yǎng)某些細菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化鈉(NaCl):10.0g-瓊脂(Agar):15.0g**制備方法**:1.將40克LB瓊脂粉末加入到1升蒸餾水中。2.加熱至沸騰,同時攪拌以確保粉末完全溶解。3.在121°C下高壓滅菌15分鐘。4.滅菌后,冷卻至50°C,然后分裝到無菌培養(yǎng)皿中。**應(yīng)用**:-適用于非選擇性培養(yǎng)大腸桿菌菌株,用于克隆、質(zhì)粒DNA制備和重組蛋白生產(chǎn)。-當(dāng)加入適當(dāng)?shù)目股镔|(zhì)時,也適合選擇性培養(yǎng)。**特點**:-無需復(fù)雜配置,快速溶解,方便使用。-經(jīng)濟實惠,適合大量培養(yǎng)基的制備。**儲存條件**:-通常建議在常溫(10-30℃)下儲存。LB瓊脂(Miller)因其營養(yǎng)豐富、制備簡單的應(yīng)用,成為分子生物學(xué)和微生物學(xué)實驗室中的標準培養(yǎng)基之一。在實際使用時,應(yīng)嚴格按照產(chǎn)品說明書或相關(guān)標準進行操作,以確保培養(yǎng)效果。去氧膽酸鹽瓊脂這種瓊脂培養(yǎng)基在檢測大腸桿菌等腸道革蘭氏陰性菌方面具有一定的選擇性。赫氏瓊脂培養(yǎng)皿
胰蛋白胨提供了微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì),瓊脂則起到固體化培養(yǎng)基的作用。TSA+青霉素酶培養(yǎng)皿
大豆酪蛋白肉湯培養(yǎng)基(胰酪胨大豆肉湯)是一種廣泛應(yīng)用于微生物培養(yǎng)的通用培養(yǎng)基,它具備以下特點:1.**成分**:該培養(yǎng)基主要由胰蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀、葡萄糖和亞硫酸鐵組成,其中胰蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、維生素和生長因子,氯化鈉維持滲透壓平衡,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,葡萄糖提供碳源,亞硫酸鐵則用于抑制非目標細菌的生長。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2,以適應(yīng)微生物生長的需要。3.**應(yīng)用**:大豆酪蛋白肉湯培養(yǎng)基特別適用于沙門氏菌的前增菌培養(yǎng),也適用于其他多種微生物的培養(yǎng),包括需氧菌和厭氧菌。4.**使用方法**:通常按照一定的比例稱取培養(yǎng)基粉末,溶解在蒸餾水中,經(jīng)過高溫滅菌后使用。例如,可以稱取30.0g培養(yǎng)基粉末,溶解在1000mL蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌。5.**質(zhì)控**:該培養(yǎng)基可用于微生物質(zhì)控,例如接種傷寒沙門氏菌和鼠傷寒沙門氏菌,觀察其生長情況和特征性反應(yīng),如渾濁度等。6.**儲存與保質(zhì)期**:培養(yǎng)基應(yīng)儲存在干燥、避光的環(huán)境中,并在開封后立即封閉以保持其穩(wěn)定性,通常保質(zhì)期為三年。TSA+青霉素酶培養(yǎng)皿