膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BL)是一種專門用于增菌培養(yǎng)的微生物培養(yǎng)基,它具有以下特點:1.**用途**:主要用于藥品和生物制品中大腸桿菌、沙門氏菌和綠膿桿菌的增菌培養(yǎng)。2.**成分**:包括蛋白胨、乳糖、牛膽鹽、氯化鈉、磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,氯化鈉維持滲透壓,磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀作為緩沖劑,牛膽鹽和去氧膽酸鈉作為選擇性抑菌劑。3.**pH值**:通常調(diào)節(jié)至7.4±0.2(25℃)。4.**使用方法**:首先將培養(yǎng)基粉末加入蒸餾水或去離子水,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。然后,將樣品處理后加入培養(yǎng)基中,放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18至24小時,必要時可延長至48小時,觀察結(jié)果。5.**應(yīng)用**:膽鹽乳糖培養(yǎng)基也用于乳品中大腸菌群的快速檢測研究,通過構(gòu)建檢測片法和細(xì)胞培養(yǎng)瓶劑法,可以快速檢測乳品中的大腸菌群。6.**選擇性**:膽鹽的存在使得培養(yǎng)基能夠選擇性地促進(jìn)革蘭氏陰性菌的生長,抑制革蘭氏陽性菌的生長,這使得BL培養(yǎng)基在分離和鑒定腸道細(xì)菌中非常有用。7.**檢測乳糖發(fā)酵能力**:由于含有乳糖,該培養(yǎng)基能夠用于檢測細(xì)菌的乳糖發(fā)酵能力,革蘭氏陰性細(xì)菌如大腸桿菌等通常能夠?qū)⑷樘前l(fā)酵產(chǎn)生酸或氣體。VRBA培養(yǎng)基提供了一種簡便而有效的方法,用于選擇性地富集和分離腸道細(xì)菌。四號瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
pH7.4磷酸鹽緩沖液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一種廣而使用的生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的緩沖溶液,具有以下特點:1.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.4左右,接近人體血液的pH值,適合細(xì)胞和生物分子的生理條件。2.**成分**:主要由磷酸二氫鈉(NaH2PO4)和磷酸氫二鈉(Na2HPO4)組成,這兩種鹽在溶液中可以形成緩沖體系,維持pH值的穩(wěn)定。3.**離子強度**:PBS具有一定的離子強度,可以模擬細(xì)胞外液的離子環(huán)境,有助于保持細(xì)胞和蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。4.**滲透壓**:PBS的滲透壓接近人體生理鹽水的滲透壓,適合用于細(xì)胞懸浮和洗滌,不會引起細(xì)胞的滲透壓變化。5.**清潔性**:PBS通常使用去離子水或蒸餾水配制,減少雜質(zhì)和離子對實驗的干擾。6.**兼容性**:PBS與多種生物分子和細(xì)胞培養(yǎng)基兼容,常用于細(xì)胞培養(yǎng)、免疫學(xué)實驗、蛋白質(zhì)提取和分析等。7.**無菌性**:實驗用的PBS通常需要經(jīng)過高壓滅菌或過濾除菌處理,以保證實驗的無菌條件。8.**多功能性**:除了作為緩沖溶液外,PBS還可以用于稀釋試劑、洗滌實驗器材和樣品等。9.**易于配制**:PBS的配制相對簡單,可以根據(jù)需要調(diào)整磷酸鹽的濃度來改變緩沖能力。BIGGY瓊脂平板EMB培養(yǎng)基的兩種染料是:1.艾奧辛(Eosin);2.亞甲藍(lán)(Methylene Blue)。
膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)是一種用于選擇性分離培養(yǎng)腸道致病菌,特別是沙門氏菌和志賀氏菌的培養(yǎng)基。以下是DHL培養(yǎng)基的一些主要特點:1.**用途**:主要用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng),特別是沙門氏菌和志賀氏菌。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、乳糖、蔗糖、去氧膽酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸鐵銨、中性紅和瓊脂,pH值控制在7.2±0.1(25℃)。3.**檢驗原理**:去氧膽酸鈉和檸檬酸鈉抑制革蘭氏陽性菌及大多數(shù)大腸菌群和變形桿菌,但不影響沙門氏菌的生長;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫產(chǎn)生,使菌落中心呈黑色;中性紅作為pH指示劑,發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈紅色,不發(fā)酵糖的菌落為無色。4.**用法**:稱取65.2g培養(yǎng)基,加熱溶解在1000ml蒸餾水中,待冷至60℃時傾入無菌平皿,無需高壓滅菌。5.**質(zhì)量控制**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗,例如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028和福氏志賀氏菌CMCC(B)51572,觀察其生長率和特異性反應(yīng)。6.**儲存條件**:貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋,保質(zhì)期通常為三年。
RV沙氏增菌肉湯(RappaportVassiliadisSalmonellaEnrichmentBroth,RVS肉湯)是一種用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基。它的主要特點如下:1.**成分**:RV沙氏增菌肉湯包含大豆蛋白胨、乳糖、葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、孔雀石綠、氯化鎂、煌綠等成分,這些成分有助于抑制其他非沙門氏菌的生長,同時促進(jìn)沙門氏菌的生長。2.**用途**:主要用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng),特別是在食品、水和牛奶等樣品中檢測沙門氏菌時。3.**配制方法**:通常需要稱取一定量的干粉培養(yǎng)基,加入指定量的蒸餾水或去離子水,攪拌加熱至完全溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。4.**培養(yǎng)條件**:RV沙氏增菌肉湯通常在35-37°C的溫度下培養(yǎng),培養(yǎng)時間根據(jù)實驗需求而定。5.**效果**:在RV沙氏增菌肉湯中,沙門氏菌能夠良好生長,而其他一些細(xì)菌則受到抑制。6.**質(zhì)量控制**:使用時需要進(jìn)行質(zhì)量控制,確保培養(yǎng)基的制備和使用符合標(biāo)準(zhǔn)操作程序。7.**儲存**:RV沙氏增菌肉湯的干粉形式應(yīng)在干燥、避光的條件下儲存,通常在4-10度的環(huán)境中保存,以保持其有效性。8.**有效期**:在適當(dāng)?shù)膬Υ鏃l件下,RV沙氏增菌肉湯的有效期通常為三年。乳糖TTC瓊脂培養(yǎng)基是一種選擇性和區(qū)域性培養(yǎng)基,通常用于分離和鑒定腸道桿菌科細(xì)菌,特別是大腸埃希菌。
亞碲酸鉀卵黃增菌液(PotassiumTelluritesolution)是一種用于微生物培養(yǎng)的增菌液,特別適用于金黃色葡萄球菌的分離和鑒定。以下是其特點介紹:1.**成分**:含有30%卵黃懸浮液和0.16%亞碲酸鉀,這些成分有助于金黃色葡萄球菌的生長,同時抑制其他微生物。2.**選擇性**:亞碲酸鉀具有抑制某些細(xì)菌生長的作用,特別是對革蘭氏陰性細(xì)菌和一些革蘭氏陽性細(xì)菌有較強的抑制效果,而金黃色葡萄球菌能夠抵抗這種抑制作用。3.**使用方法**:通常與Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基配合使用,將增菌液添加到已冷卻至45-50℃的Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混合均勻后傾注平板。4.**培養(yǎng)效果**:含有卵磷脂酶的金黃色葡萄球菌在這種培養(yǎng)基上能夠降解卵黃,產(chǎn)生透明圈,而脂酶作用則產(chǎn)生不透明的沉淀環(huán)。凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌還能還原亞碲酸鉀,產(chǎn)生黑色菌落。5.**儲存條件**:建議在2-8℃的條件下保存,以保持其有效性。6.**有效期**:在適當(dāng)?shù)膬Υ鏃l件下,亞碲酸鉀卵黃增菌液的有效期通常為半年至一年。7.**注意事項**:由于亞碲酸鉀卵黃增菌液的特殊性質(zhì),不能使用常規(guī)方法進(jìn)行滅菌。使用前應(yīng)在完全培養(yǎng)基上進(jìn)行無菌實驗,以確保培養(yǎng)基的無菌性。馬鈴薯浸出液瓊脂培養(yǎng)皿可以更好地維持微生物的多樣性,有利于保留微生物的天然群落結(jié)構(gòu)。NA頭孢菌素酶培養(yǎng)皿
VRBA也被用于監(jiān)測食品和水的衛(wèi)生質(zhì)量,以及在臨床微生物學(xué)實驗室中進(jìn)行一些腸道細(xì)菌的鑒定工作。四號瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于大腸桿菌和其他腸桿菌科細(xì)菌的分離和鑒別。以下是伊紅美藍(lán)瓊脂的特點介紹:1.**成分**:伊紅美藍(lán)瓊脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、瓊脂、伊紅Y溶液和美藍(lán)溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,而伊紅和美藍(lán)則作為pH指示劑。2.**pH值**:伊紅美藍(lán)瓊脂的pH值為7.1,適合多數(shù)腸道細(xì)菌的生長。3.**制法**:首先將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH值后進(jìn)行高壓滅菌。使用前加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷卻至50-55℃時加入伊紅和美藍(lán)溶液,搖勻后傾注平板。4.**用途**:主要用于大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌的分離和鑒別。大腸桿菌在該培養(yǎng)基上分解乳糖產(chǎn)酸,菌落呈深紫色并帶有金屬光澤;而產(chǎn)氣腸桿菌則可能呈現(xiàn)棕色,很少有金屬光澤。5.**保存**:伊紅美藍(lán)瓊脂應(yīng)在4℃至8℃的條件下保存,避免凍結(jié),以保持其有效性。6.**有效期**:在適當(dāng)?shù)馁A存條件下,伊紅美藍(lán)瓊脂的有效期通常為三個月。