伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于大腸桿菌和其他腸桿菌科細(xì)菌的分離和鑒別。以下是伊紅美藍(lán)瓊脂的特點(diǎn)介紹:1.**成分**:伊紅美藍(lán)瓊脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、瓊脂、伊紅Y溶液和美藍(lán)溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類(lèi),磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,而伊紅和美藍(lán)則作為pH指示劑。2.**pH值**:伊紅美藍(lán)瓊脂的pH值為7.1,適合多數(shù)腸道細(xì)菌的生長(zhǎng)。3.**制法**:首先將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH值后進(jìn)行高壓滅菌。使用前加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷卻至50-55℃時(shí)加入伊紅和美藍(lán)溶液,搖勻后傾注平板。4.**用途**:主要用于大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌的分離和鑒別。大腸桿菌在該培養(yǎng)基上分解乳糖產(chǎn)酸,菌落呈深紫色并帶有金屬光澤;而產(chǎn)氣腸桿菌則可能呈現(xiàn)棕色,很少有金屬光澤。5.**保存**:伊紅美藍(lán)瓊脂應(yīng)在4℃至8℃的條件下保存,避免凍結(jié),以保持其有效性。6.**有效期**:在適當(dāng)?shù)馁A存條件下,伊紅美藍(lán)瓊脂的有效期通常為三個(gè)月。
TBX顯色培養(yǎng)基是一種用于快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的培養(yǎng)基。以下是其主要特點(diǎn):1.**顯色特性**:TBX培養(yǎng)基中含有的特殊顯色劑能夠使大腸桿菌在培養(yǎng)24小時(shí)后顯藍(lán)綠色,而大腸菌群顯無(wú)色,其他細(xì)菌則顯黃色或無(wú)色,革蘭氏陽(yáng)性菌被抑制。2.**成分**:包含特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、顯色劑和瓊脂,其中特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)為21.4克/升,顯色劑為0.2克/升,瓊脂為15.0克/升,pH值控制在6.8±0.2(25℃)。3.**應(yīng)用范圍**:適用于多種樣品的大腸桿菌快速檢測(cè),包括食品、水體、奶制品等。4.**制備方法**:通常將干粉培養(yǎng)基與蒸餾水混合,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不超過(guò)1分鐘,然后進(jìn)行高壓滅菌。5.**使用方法**:將制備好的樣品液加入冷卻至45-50°C的培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上,36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。6.**檢驗(yàn)原理**:特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)提供微生物生長(zhǎng)所需的碳氮源和微量元素,維持均衡的滲透壓,并提供針對(duì)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的選擇性。顯色劑在特異性酶作用下產(chǎn)生顏色變化,用于識(shí)別大腸桿菌。7.**質(zhì)量控制**:通過(guò)接種質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),確保培養(yǎng)基的性能。牛津瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿去氧膽酸鹽瓊脂(DC)培養(yǎng)皿通常在食品衛(wèi)生檢測(cè)以及臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中使用,用于檢測(cè)腸道細(xì)菌的存在。
強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一種專(zhuān)門(mén)用于培養(yǎng)梭菌屬(Clostridium)細(xì)菌的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營(yíng)養(yǎng)成分**:RCM培養(yǎng)基包含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化鈉、醋酸鈉和L-半胱氨酸鹽酸鹽等,這些成分為梭菌提供碳源、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),為梭菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù),特別適用于厭氧條件下梭菌的培養(yǎng)。4.**抑制作用**:醋酸鈉成分有助于抑制革蘭氏陰性菌和一些非目標(biāo)細(xì)菌的生長(zhǎng),使得RCM培養(yǎng)基更適合梭菌屬細(xì)菌的選擇性培養(yǎng)。5.**穩(wěn)定性**:微量瓊脂(0.5g/L)的添加增加了培養(yǎng)基還原環(huán)境的穩(wěn)定性,有助于厭氧環(huán)境的形成,防止二氧化碳、氧氣和還原產(chǎn)物的擴(kuò)散。6.**生長(zhǎng)表現(xiàn)**:無(wú)動(dòng)力的細(xì)菌在RCM培養(yǎng)基中通常呈顆粒狀或條狀生長(zhǎng),便于計(jì)數(shù);而有動(dòng)力的細(xì)菌則可能呈現(xiàn)渾濁生長(zhǎng),一般不適合計(jì)數(shù)。7.**制備方法**:將RCM培養(yǎng)基粉末溶解于蒸餾水中,加熱至完全溶解后分裝,進(jìn)行高壓滅菌以備使用。8.**質(zhì)控結(jié)果**:RCM培養(yǎng)基適用于生孢梭菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌等梭菌的生長(zhǎng),這些菌株在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況良好。
LB瓊脂(Miller)是一種用于實(shí)驗(yàn)室的微生物培養(yǎng)基,特別適合于大腸桿菌(E.coli)的培養(yǎng)。這種培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化鈉,以及作為凝固劑的瓊脂。Miller配方的特點(diǎn)是含有較高的氯化鈉濃度,這有助于選擇性地培養(yǎng)某些細(xì)菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化鈉(NaCl):10.0g-瓊脂(Agar):15.0g**制備方法**:1.將40克LB瓊脂粉末加入到1升蒸餾水中。2.加熱至沸騰,同時(shí)攪拌以確保粉末完全溶解。3.在121°C下高壓滅菌15分鐘。4.滅菌后,冷卻至50°C,然后分裝到無(wú)菌培養(yǎng)皿中。**應(yīng)用**:-適用于非選擇性培養(yǎng)大腸桿菌菌株,用于克隆、質(zhì)粒DNA制備和重組蛋白生產(chǎn)。-當(dāng)加入適當(dāng)?shù)目股镔|(zhì)時(shí),也適合選擇性培養(yǎng)。**特點(diǎn)**:-無(wú)需復(fù)雜配置,快速溶解,方便使用。-經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,適合大量培養(yǎng)基的制備。**儲(chǔ)存條件**:-通常建議在常溫(10-30℃)下儲(chǔ)存。LB瓊脂(Miller)因其營(yíng)養(yǎng)豐富、制備簡(jiǎn)單的應(yīng)用,成為分子生物學(xué)和微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基之一。在實(shí)際使用時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)或相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作,以確保培養(yǎng)效果。DC培養(yǎng)基主要用于分離大腸桿菌等腸道革蘭氏陰性細(xì)菌,因?yàn)檫@些細(xì)菌對(duì)去氧膽酸鹽的敏感性較低。
月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LaurylSulfateTryptoseBroth,簡(jiǎn)稱(chēng)LST)是一種選擇性液體培養(yǎng)基,主要用于檢測(cè)食品、水、奶制品中的大腸菌群和大腸埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**試驗(yàn)原理**:LST培養(yǎng)基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,滿足細(xì)菌生長(zhǎng)需求;氯化鈉維持滲透壓;乳糖作為可發(fā)酵的糖類(lèi);磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀作為pH緩沖劑;月桂基硫酸鈉抑制非大腸菌群細(xì)菌的生長(zhǎng)。2.**培養(yǎng)基配方**:每升培養(yǎng)基包含胰蛋白胨20.0g、氯化鈉5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氫鉀2.75g、磷酸氫二鉀2.75g、月桂基硫酸鈉0.1g,pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2(25℃)。3.**試驗(yàn)方法**:稱(chēng)取35.6克LST培養(yǎng)基,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝到帶有倒立發(fā)酵管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**質(zhì)量控制和典型特征**:在36±1℃培養(yǎng)48±2小時(shí),大腸菌群、大腸桿菌和發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性細(xì)菌產(chǎn)生氣體,在小倒管內(nèi)有氣泡;其他細(xì)菌無(wú)氣泡。5.**微生物靈敏度試驗(yàn)**:接種特定的質(zhì)控菌株,如鼠傷寒沙門(mén)氏菌ATCC14028、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、陰溝腸桿菌ATCC23355、大腸埃希氏菌ATCC8739、糞腸球菌ATCC29212和金黃色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí),觀察結(jié)果。根據(jù)菌落的顏色,進(jìn)行初步的鑒定。這種培養(yǎng)基的選擇性作用有助于分離腸道菌。NA頭孢菌素酶預(yù)裝培養(yǎng)皿
假單胞菌分離瓊脂培養(yǎng)皿在生物學(xué)和微生物學(xué)研究中應(yīng)用,用于分離和純化假單胞菌。亞硫酸鐵瓊脂平板
pH7.4磷酸鹽緩沖液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一種廣而使用的生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖溶液,具有以下特點(diǎn):1.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.4左右,接近人體血液的pH值,適合細(xì)胞和生物分子的生理?xiàng)l件。2.**成分**:主要由磷酸二氫鈉(NaH2PO4)和磷酸氫二鈉(Na2HPO4)組成,這兩種鹽在溶液中可以形成緩沖體系,維持pH值的穩(wěn)定。3.**離子強(qiáng)度**:PBS具有一定的離子強(qiáng)度,可以模擬細(xì)胞外液的離子環(huán)境,有助于保持細(xì)胞和蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。4.**滲透壓**:PBS的滲透壓接近人體生理鹽水的滲透壓,適合用于細(xì)胞懸浮和洗滌,不會(huì)引起細(xì)胞的滲透壓變化。5.**清潔性**:PBS通常使用去離子水或蒸餾水配制,減少雜質(zhì)和離子對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾。6.**兼容性**:PBS與多種生物分子和細(xì)胞培養(yǎng)基兼容,常用于細(xì)胞培養(yǎng)、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、蛋白質(zhì)提取和分析等。7.**無(wú)菌性**:實(shí)驗(yàn)用的PBS通常需要經(jīng)過(guò)高壓滅菌或過(guò)濾除菌處理,以保證實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌條件。8.**多功能性**:除了作為緩沖溶液外,PBS還可以用于稀釋試劑、洗滌實(shí)驗(yàn)器材和樣品等。9.**易于配制**:PBS的配制相對(duì)簡(jiǎn)單,可以根據(jù)需要調(diào)整磷酸鹽的濃度來(lái)改變緩沖能力。亞硫酸鐵瓊脂平板