營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基是一種常用的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**成分豐富**:由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)和瓊脂等成分組成,為微生物提供氮源、碳源、維生素、氨基酸和其他生長因子。2.**pH值適宜**:pH值通常控制在7.0-7.4之間,適合大多數(shù)細(xì)菌和部分菌的生長。3.**凝膠性質(zhì)**:含有瓊脂作為凝固劑,使得培養(yǎng)基在冷卻后形成凝膠狀,便于微生物在表面形成菌落。4.**用途廣**:適用于多種微生物的培養(yǎng)、分離和鑒定,包括細(xì)菌、酵母和霉菌。5.**易于操作**:瓊脂培養(yǎng)基易于倒板和制備平板,適合實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用。6.**穩(wěn)定性好**:在適當(dāng)?shù)膬Υ鏃l件下,營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基可以長時(shí)間保持其性能。7.**觀察方便**:菌落形成在瓊脂表面,便于觀察和計(jì)數(shù),也方便進(jìn)行菌落挑選和純化。8.**無菌操作**:在制備和使用過程中需要嚴(yán)格的無菌操作,以避免污染。9.**質(zhì)量控制**:培養(yǎng)基的質(zhì)量通過檢驗(yàn)原理和微生物靈敏度試驗(yàn)進(jìn)行控制,確保其穩(wěn)定性和有效性。10.**執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)**:營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的制備和使用遵循相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),如GB4789.28-2013《中華人民共和國食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》等。改良Letheen瓊脂培養(yǎng)基通過優(yōu)化和改良配方,提高了其在微生物檢測和其他相關(guān)領(lǐng)域的應(yīng)用效率和范圍。霍亂雙糖鐵瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
品紅亞硫酸鈉液體培養(yǎng)基(EndoAgar),也稱為遠(yuǎn)藤瓊脂培養(yǎng)基,是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于飲用水和水源中總大腸菌群的選擇性分離和確證,符合GB(中國國家標(biāo)準(zhǔn))的要求。**主要成分**:-蛋白胨:10.0g-牛肉粉:5.0g-酵母粉:5.0g-磷酸氫二鉀:3.5g-乳糖:10.0g-瓊脂:13.0g-堿性品紅:1.0g-亞硫酸鈉:5.0g-pH值:7.2-7.4(25℃)**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供微生物生長所需的碳氮源、維生素和礦物質(zhì)。-乳糖作為可發(fā)酵的糖類,用于檢測細(xì)菌的乳糖發(fā)酵能力。-亞硫酸鈉能將堿性品紅還原,使其褪色。-發(fā)酵乳糖的細(xì)菌產(chǎn)生乙醛,在存在堿性品紅的情況下乙醛與亞硫酸鈉結(jié)合形成紅色菌落。-快速發(fā)酵乳糖的細(xì)菌產(chǎn)生金屬光澤,不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌形成無色透明菌落。**使用方法**:-稱取本品52.5g,加入20mL無水乙醇和980mL蒸餾水(可根據(jù)培養(yǎng)需要擴(kuò)大或縮小產(chǎn)品用量),加熱攪拌溶解。-按需分裝,116℃高壓滅菌20分鐘,備用。-質(zhì)控菌液按國標(biāo)等標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備而成。-取相應(yīng)菌液按涂布或劃線方式接種于培養(yǎng)基中。-將接好菌的平板倒置放入恒溫培養(yǎng)箱,于36±1℃需氧培養(yǎng)24±2小時(shí),觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。葡萄糖瓊脂培養(yǎng)皿乙酰胺瓊脂培養(yǎng)皿由對乙酰胺、大豆胨、瓊脂等成分組成,為微生物的生長提供了營養(yǎng)和適宜的生長環(huán)境。
MFC瓊脂(也稱為4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷瓊脂,MUG瓊脂)是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的濾膜法檢測,符合中國國家標(biāo)準(zhǔn)(GB)。其配方包含多價(jià)蛋白胨、胰蛋白胨、乳糖、酵母粉、三號膽鹽、氯化鈉、苯胺藍(lán)、瓊脂、玫紅酸等成分,pH值調(diào)節(jié)至7.4±0.2。這種培養(yǎng)基通過膽鹽的選擇性作用抑制革蘭氏陽性菌,同時(shí)利用乳糖作為可發(fā)酵的糖類,結(jié)合指示劑來檢測細(xì)菌的代謝活動(dòng)。MFC瓊脂的檢驗(yàn)原理是利用胰胨、多胨和酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;乳糖為可發(fā)酵糖類;3號膽鹽抑制革蘭氏陽性菌;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;玫紅酸和苯胺藍(lán)為pH指示劑。當(dāng)細(xì)菌發(fā)酵乳糖時(shí),會產(chǎn)生酸性物質(zhì),導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化,從而可以觀察到產(chǎn)酸現(xiàn)象。在實(shí)際應(yīng)用中,MFC瓊脂可以用于水質(zhì)檢測,特別是飲用水和水源中糞大腸菌群的測定。使用時(shí),將培養(yǎng)基加熱溶解,分裝到試管或平皿中,高壓滅菌后備用。接種樣品后,在適宜的溫度下培養(yǎng),通過觀察培養(yǎng)基上菌落的生長情況和顏色變化來判斷是否存在大腸菌群。MFC瓊脂的制備和使用應(yīng)遵循相關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程,以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
肌醇測定培養(yǎng)基是一種專門用于測定食品中肌醇含量的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**成分**:該培養(yǎng)基包含葡萄糖、檸檬酸鉀、檸檬酸、磷酸二氫鉀、氯化鉀、硫酸鎂、氯化鈣、硫酸錳、多種氨基酸(如色氨酸、胱氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、天門冬氨酸、丙氨酸、谷氨酸、精氨酸)、維生素(如鹽酸硫胺素、生物素、泛酸鈣、鹽酸吡哆醇)等,這些成分為微生物提供必需的生長因子和營養(yǎng)物質(zhì)。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)至5.2±0.2(25℃),以適應(yīng)特定微生物的生長需求。3.**用途**:主要用于嬰幼兒食品和乳品中肌醇的測定,符合GB5009.270-2023標(biāo)準(zhǔn)。4.**制備方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,煮沸1分鐘,分裝試管,每管5ml,加入標(biāo)準(zhǔn)樣品或測試樣品,用蒸餾水補(bǔ)體積至10ml,121℃高壓滅菌5分鐘后,迅速冷卻備用。5.**質(zhì)量控制**:在使用肌醇測定培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制,確保培養(yǎng)基的制備和使用符合標(biāo)準(zhǔn)操作程序。6.**儲存條件**:應(yīng)在避光、干燥處儲存,未開封保質(zhì)期通常為三年通過調(diào)整成分比例,改良的Letheen瓊脂培養(yǎng)基提高了對不同微生物的適應(yīng)性,增強(qiáng)了其抑菌效果和生長因子。
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(FluidThioglycollateMedium,FT)是一種使用的微生物培養(yǎng)基,特別適合于需氧菌、微需氧菌和厭氧菌的培養(yǎng)。以下是FT培養(yǎng)基的特點(diǎn)介紹:1.**營養(yǎng)成分**:FT培養(yǎng)基含有胰酪胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化鈉、L-胱氨酸、硫乙醇酸鹽、瓊脂和刃天青等成分。這些成分為細(xì)菌提供碳源、氮源、維生素和生長因子,同時(shí)維持適宜的滲透壓。2.**氧梯度環(huán)境**:FT培養(yǎng)基的不同深度提供了從上層的有氧環(huán)境到下層的無氧環(huán)境的梯度,適合不同需氧性的細(xì)菌生長。3.**降低氧化還原電位**:胱氨酸、硫乙醇酸鹽和葡萄糖有助于降低培養(yǎng)基的氧化還原電位,防止過氧化物積累對細(xì)菌產(chǎn)生毒性,有利于厭氧菌的生長。4.**氧化還原指示劑**:刃天青作為氧化還原指示劑,其顏色變化(氧化時(shí)呈紅色,還原時(shí)無色)可以指示培養(yǎng)基的氧化還原狀態(tài)。5.**瓊脂作用**:少量瓊脂的加入可以防止液體對流,減少氧氣和二氧化碳的擴(kuò)散,有利于厭氧環(huán)境的形成。6.**無菌操作**:在滅菌和使用過程中應(yīng)避免搖晃和暴露于空氣中過長,以防止培養(yǎng)基被氧化。接種: 使用無菌的技術(shù)在瓊脂培養(yǎng)基表面接種待測樣品,可以是從食品、水樣或其他來源收集的微生物樣品。LA平板
當(dāng)大腸桿菌等革蘭氏陰性菌在培養(yǎng)皿上形成典型的紅色或粉紅色菌落時(shí),這表明它們具有葡萄糖發(fā)酵的能力。霍亂雙糖鐵瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基(TTB)基礎(chǔ)是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,特別適用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。它遵循中國藥典(ChP)標(biāo)準(zhǔn)。**成分**:該培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、牛膽鹽、碳酸鈣和硫代硫酸鈉。其中,蛋白胨提供碳源、氮源和維生素以滿足細(xì)菌生長的需求;碳酸鈣能中和細(xì)菌產(chǎn)酸及吸收有毒的代謝產(chǎn)物;硫代硫酸鈉和四硫磺酸鈉結(jié)合可抑制腸道共生菌,而具有四硫磺酸鈉還原酶的細(xì)菌能在此培養(yǎng)基中繁殖;牛膽鹽和煌綠可抑制大腸群菌和其他革蘭氏陽性細(xì)菌。**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)至8.4±0.2(25℃)。**檢驗(yàn)原理**:蛋白胨提供細(xì)菌生長所需的營養(yǎng);碳酸鈣中和細(xì)菌代謝產(chǎn)生的酸;硫代硫酸鈉在培養(yǎng)基中與碘和碘化鉀反應(yīng)形成四硫磺酸鈉,抑制非目標(biāo)菌;牛膽鹽和煌綠抑制革蘭氏陽性菌。**用法**:稱取培養(yǎng)基46.0g,加熱溶解于1000ml純化水中,121℃高壓滅菌15分鐘。臨用前,每1000ml培養(yǎng)基中加入碘試液20ml和亮綠試液10ml,混勻后分裝備用。**添加劑**:每瓶培養(yǎng)基需配套添加碘液和0.1%煌綠水溶液。碘試液由碘6g與碘化鉀5g加水20ml溶解制成。亮綠試液由亮綠0.1g加水100ml溶解制成。霍亂雙糖鐵瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿