曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基(EosinMethyleneBlueAgar,簡稱EMB)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于分離和鑒定腸道致病菌,尤其是大腸桿菌。以下是EMB培養(yǎng)基的特點(diǎn)和相關(guān)信息:1.**成分**:EMB培養(yǎng)基通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化鈉、乳糖、亞甲藍(lán)、曙紅鈉和瓊脂。其中,蛋白胨和牛肉浸粉提供細(xì)菌生長所需的氮源和其他營養(yǎng)元素;乳糖作為可發(fā)酵的碳源;氯化鈉維持滲透壓;曙紅鈉和亞甲基藍(lán)作為抑制劑和指示劑,能夠在酸性條件下結(jié)合形成黑色沉淀;瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值一般調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:EMB培養(yǎng)基是一種弱選擇性培養(yǎng)基,特別用于分離腸道致病菌,如大腸桿菌。它通過抑制非目標(biāo)菌的生長,促進(jìn)目標(biāo)菌的生長,從而實(shí)現(xiàn)分離。4.**實(shí)驗(yàn)原理**:曙紅鈉為酸性染料,亞甲基藍(lán)為堿性染料。細(xì)菌分解乳糖產(chǎn)酸時,細(xì)菌帶正電荷,可以與帶負(fù)電的酸性染料結(jié)合,即染上了曙紅鈉的顏色;如果細(xì)菌因產(chǎn)堿性物質(zhì)較多,帶負(fù)電荷時與帶正電荷的堿性染料亞甲基藍(lán)結(jié)合而使得菌落呈藍(lán)色。細(xì)菌產(chǎn)酸量較大時,染料可析出結(jié)晶形成金屬光澤。此外,BHI Agar可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要添加不同的補(bǔ)充劑,如血液、等,以增強(qiáng)其選擇性或提供額外的營養(yǎng)。DRCA預(yù)裝培養(yǎng)皿
MFC瓊脂(也稱為4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷瓊脂,MUG瓊脂)是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的濾膜法檢測,符合中國國家標(biāo)準(zhǔn)(GB)。其配方包含多價蛋白胨、胰蛋白胨、乳糖、酵母粉、三號膽鹽、氯化鈉、苯胺藍(lán)、瓊脂、玫紅酸等成分,pH值調(diào)節(jié)至7.4±0.2。這種培養(yǎng)基通過膽鹽的選擇性作用抑制革蘭氏陽性菌,同時利用乳糖作為可發(fā)酵的糖類,結(jié)合指示劑來檢測細(xì)菌的代謝活動。MFC瓊脂的檢驗(yàn)原理是利用胰胨、多胨和酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;乳糖為可發(fā)酵糖類;3號膽鹽抑制革蘭氏陽性菌;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;玫紅酸和苯胺藍(lán)為pH指示劑。當(dāng)細(xì)菌發(fā)酵乳糖時,會產(chǎn)生酸性物質(zhì),導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化,從而可以觀察到產(chǎn)酸現(xiàn)象。在實(shí)際應(yīng)用中,MFC瓊脂可以用于水質(zhì)檢測,特別是飲用水和水源中糞大腸菌群的測定。使用時,將培養(yǎng)基加熱溶解,分裝到試管或平皿中,高壓滅菌后備用。接種樣品后,在適宜的溫度下培養(yǎng),通過觀察培養(yǎng)基上菌落的生長情況和顏色變化來判斷是否存在大腸菌群。MFC瓊脂的制備和使用應(yīng)遵循相關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程,以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。NA0.25%青霉素酶預(yù)裝培養(yǎng)皿根據(jù)菌落的顏色,進(jìn)行初步的鑒定。這種培養(yǎng)基的選擇性作用有助于分離腸道菌。
膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BL)是一種專門用于增菌培養(yǎng)的微生物培養(yǎng)基,它具有以下特點(diǎn):1.**用途**:主要用于藥品和生物制品中大腸桿菌、沙門氏菌和綠膿桿菌的增菌培養(yǎng)。2.**成分**:包括蛋白胨、乳糖、牛膽鹽、氯化鈉、磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,氯化鈉維持滲透壓,磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀作為緩沖劑,牛膽鹽和去氧膽酸鈉作為選擇性抑菌劑。3.**pH值**:通常調(diào)節(jié)至7.4±0.2(25℃)。4.**使用方法**:首先將培養(yǎng)基粉末加入蒸餾水或去離子水,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。然后,將樣品處理后加入培養(yǎng)基中,放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18至24小時,必要時可延長至48小時,觀察結(jié)果。5.**應(yīng)用**:膽鹽乳糖培養(yǎng)基也用于乳品中大腸菌群的快速檢測研究,通過構(gòu)建檢測片法和細(xì)胞培養(yǎng)瓶劑法,可以快速檢測乳品中的大腸菌群。6.**選擇性**:膽鹽的存在使得培養(yǎng)基能夠選擇性地促進(jìn)革蘭氏陰性菌的生長,抑制革蘭氏陽性菌的生長,這使得BL培養(yǎng)基在分離和鑒定腸道細(xì)菌中非常有用。7.**檢測乳糖發(fā)酵能力**:由于含有乳糖,該培養(yǎng)基能夠用于檢測細(xì)菌的乳糖發(fā)酵能力,革蘭氏陰性細(xì)菌如大腸桿菌等通常能夠?qū)⑷樘前l(fā)酵產(chǎn)生酸或氣體。
亞硫酸鉍(BS)瓊脂培養(yǎng)基是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,特別適用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。它遵循GB/SN/USP標(biāo)準(zhǔn),包括中國國家標(biāo)準(zhǔn)(GB)、中國出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(SN)和美國藥典(USP)。**成分**:亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基的配方通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖、硫酸亞鐵、磷酸氫二鈉、檸檬酸鉍銨、亞硫酸鈉、煌綠和瓊脂等。pH值一般調(diào)節(jié)至7.5±0.2(25℃)。**檢驗(yàn)原理**:蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì);葡萄糖提供能源;亞硫酸鉍指示劑抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群,但不影響沙門氏菌的生長;磷酸氫二鈉作為緩沖劑;硫酸亞鐵用于產(chǎn)生硫化氫,并與鐵產(chǎn)生沉淀,使陽性培養(yǎng)物為具有金屬光澤的棕色到黑色菌落;瓊脂作為凝固劑。**使用方法**:稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入指定量的蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,冷卻至適宜溫度后傾注平板或試管中,用于接種樣品。**培養(yǎng)特征**:沙門氏菌在亞硫酸鉍瓊脂上生長時,由于其代謝特性,能夠?qū)喠蛩猁}還原成硫化物并與硫酸亞鐵反應(yīng),使得菌落呈黑色,并可能表現(xiàn)出金屬光澤。改良Letheen瓊脂培養(yǎng)基的配方進(jìn)行了調(diào)整,以適應(yīng)更多的微生物生長需求。
膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)是一種用于選擇性分離培養(yǎng)腸道致病菌,特別是沙門氏菌和志賀氏菌的培養(yǎng)基。以下是DHL培養(yǎng)基的一些主要特點(diǎn):1.**用途**:主要用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng),特別是沙門氏菌和志賀氏菌。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、乳糖、蔗糖、去氧膽酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸鐵銨、中性紅和瓊脂,pH值控制在7.2±0.1(25℃)。3.**檢驗(yàn)原理**:去氧膽酸鈉和檸檬酸鈉抑制革蘭氏陽性菌及大多數(shù)大腸菌群和變形桿菌,但不影響沙門氏菌的生長;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫產(chǎn)生,使菌落中心呈黑色;中性紅作為pH指示劑,發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈紅色,不發(fā)酵糖的菌落為無色。4.**用法**:稱取65.2g培養(yǎng)基,加熱溶解在1000ml蒸餾水中,待冷至60℃時傾入無菌平皿,無需高壓滅菌。5.**質(zhì)量控制**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),例如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028和福氏志賀氏菌CMCC(B)51572,觀察其生長率和特異性反應(yīng)。6.**儲存條件**:貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋,保質(zhì)期通常為三年。馬鈴薯浸出液作為一種常見的植物提取物,具有豐富的碳水化合物、氮源和微量元素,是一種潛在的培養(yǎng)基成分。DHL預(yù)裝培養(yǎng)皿
將純培養(yǎng)的菌株涂布在TSA板上,培養(yǎng)至單一菌落后,將培養(yǎng)皿密封保存在4℃或-80℃的環(huán)境中。DRCA預(yù)裝培養(yǎng)皿
Endo培養(yǎng)基,也稱為遠(yuǎn)藤氏瓊脂或EndoAgar,是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的檢測。以下是Endo培養(yǎng)基的一些基本信息:**配方**:Endo培養(yǎng)基的典型配方包含蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、亞硫酸鈉和堿性品紅等成分,以及作為凝固劑的瓊脂。具體的配方比例可能根據(jù)不同的供應(yīng)商有所變化。**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)至7.3±0.1(25℃)。**用途**:Endo培養(yǎng)基用于大腸菌群的檢測,特別是在水質(zhì)檢測中,如生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。**使用方法**:通常稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入指定量的蒸餾水或去離子水中,并添加無水乙醇,然后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌結(jié)束后,將培養(yǎng)基搖勻以防瓊脂沉積,備用。**培養(yǎng)基特性**:Endo培養(yǎng)基中的亞硫酸鈉和品紅對革蘭氏陽性菌有弱抑制作用。乳糖發(fā)酵型大腸桿菌和大腸菌群在該培養(yǎng)基上產(chǎn)生乙醛和酸,乙醛與亞硫酸品紅化合物反應(yīng),釋放出品紅,使菌落和周圍培養(yǎng)基變紅色。對于大腸桿菌,該反應(yīng)可能過于強(qiáng)烈,使得品紅結(jié)晶析出,給予菌落長久性的金色金屬光澤。**儲存條件**:Endo培養(yǎng)基通常需要在密封、陰涼干燥處保存,避免攝入、呼入和皮膚接觸。DRCA預(yù)裝培養(yǎng)皿