亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿(BismuthSulfiteAgar,簡(jiǎn)稱BSA)是一種用于選擇性分離培養(yǎng)沙門氏菌的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**試驗(yàn)原理**:-亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基通過其成分抑制大腸桿菌、變形桿菌和革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng),但對(duì)沙門氏菌的生長(zhǎng)沒有影響。沙門氏菌能利用葡萄糖,將亞硫酸鹽還原成硫化物并與硫酸亞鐵反應(yīng),使得菌落呈黑色,此外還可以將鉍離子還原成金屬鉍,使菌落呈現(xiàn)金屬光澤,從而使沙門氏菌得到分離。2.**培養(yǎng)基配方**:-培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、牛肉粉、葡萄糖、硫酸亞鐵、亞硫酸鉍、磷酸氫二鈉、亮綠和瓊脂。具體配方為每升含有蛋白胨10.0g、牛肉浸粉5.0g、葡萄糖5.0g、硫酸亞鐵0.3g、磷酸氫二鈉4.0g、瓊脂15.0g、亞硫酸鈉6.0g、檸檬酸鉍銨2.0g、煌綠0.025g、純化水1000mL,pH值為7.5±0.2。3.**使用方法**:-亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿為即用型成品平板,拆包即可使用,注意無菌操作。培養(yǎng)基中的檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉反應(yīng)生成不溶物,培養(yǎng)基呈渾濁狀,有黑色沉淀,搖勻后倒平板使用即可。4.**儲(chǔ)存條件與保質(zhì)期**:-亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿應(yīng)儲(chǔ)存在2~8℃,避光保存,有效期見包裝。由于含有不溶性活性炭,BCYE瓊脂培養(yǎng)基整體呈現(xiàn)黑色,這有助于在培養(yǎng)過程中觀察到的特征性變化 。Iso-Sensitest 瓊脂
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基(ColumbiaAgar)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**用途**:-主要用于梭菌的分離培養(yǎng),特別是用于藥品中梭菌的檢測(cè)。2.**成分組成**:-培養(yǎng)基的主要成分包括酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、玉米淀粉、氯化鈉和瓊脂。這些成分提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,維持均衡的滲透壓,并作為凝固劑。3.**添加劑**:-每瓶需配套添加硫酸慶大霉素,以抑制腸桿菌科和銅綠假單胞菌的生長(zhǎng)。4.**pH值**:-培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2(25℃)。5.**配制方法**:-稱取44g培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000ml純化水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至45-50℃,加入硫酸慶大霉素20mg,混勻,傾入無菌平皿,備用。6.**培養(yǎng)條件**:-將培養(yǎng)基放置于30℃-35℃恒溫培養(yǎng)箱中,進(jìn)行厭氧培養(yǎng)48-72小時(shí)。7.**質(zhì)控結(jié)果**:-接種質(zhì)控菌株如生孢梭菌、大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌,觀察其生長(zhǎng)情況和特征。生孢梭菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,形成無色菌落,而大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌則被抑制。8.**注意事項(xiàng)**:-培養(yǎng)基中含少量淀粉,若滅菌前未加熱煮沸溶解,滅菌后冷卻可能出現(xiàn)少量白色沉淀。
薩氏液體培養(yǎng)基SDY(SabouraudDextroseMediumwithYeastExtract)是一種專門用于培養(yǎng)菌的培養(yǎng)基,其特點(diǎn)如下:1.**成分組成**:-包含肽(Peptone)、酵母提取物(YeastExtract)、葡萄糖(Glucose)等成分,這些成分為菌提供氮源、維生素、礦物質(zhì)以及碳源。2.**pH值**:-通常需要調(diào)整pH值至中性或接近中性,大約在pH7.0左右,以適應(yīng)菌的生長(zhǎng)需求。3.**培養(yǎng)條件**:-適用于需氧條件下的培養(yǎng),培養(yǎng)溫度一般為室溫至人體溫度(20-25°C至37°C)。4.**滅菌方法**:-培養(yǎng)基在使用前需要進(jìn)行高溫滅菌,通常在121℃下滅菌15分鐘或115℃下滅菌20分鐘。5.**應(yīng)用范圍**:-主要用于菌的分離和培養(yǎng),特別適用于醫(yī)學(xué)和食品工業(yè)中對(duì)菌的檢測(cè)和研究。6.**質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)**:-使用特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行培養(yǎng)基的質(zhì)量控制,確保培養(yǎng)基的性能符合標(biāo)準(zhǔn),例如白色念珠菌等。7.**產(chǎn)品形式**:-薩氏液體培養(yǎng)基SDY通常以干粉形式提供,便于儲(chǔ)存和運(yùn)輸,使用時(shí)加水溶解即可。8.**安全性和操作注意事項(xiàng)**:-操作時(shí)應(yīng)遵循無菌技術(shù),注意粉塵,穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩以避免呼吸道系統(tǒng)不適。
乳糖亞硫酸鹽培養(yǎng)基(LactoseSulfiteMedium,簡(jiǎn)稱LS)是一種用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確認(rèn)試驗(yàn)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**用途**:-主要用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的確認(rèn)試驗(yàn),通過檢測(cè)其發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的能力。2.**成分組成**:-培養(yǎng)基的主要成分包括胰酪胨、酵母膏、氯化鈉、乳糖和L-半胱氨酸鹽酸鹽。具體配方為每升含有胰酪胨15.0g、酵母膏2.5g、氯化鈉2.5g、乳糖10.0g、L-半胱氨酸鹽酸鹽0.3g,pH值控制在7.1±0.2(25℃)。3.**添加劑**:-每瓶培養(yǎng)基需配套添加焦亞硫酸鈉溶液和檸檬酸鐵銨溶液,每8mL乳糖亞硫酸鹽培養(yǎng)基(LS)需要1支焦亞硫酸鈉和1支檸檬酸鐵銨溶液。這些添加劑用于檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生,使菌落呈黑色。4.**配制方法**:-稱取30.3g培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,分裝至含有倒置小導(dǎo)管的試管中,每管8mL,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻,臨用前,每管添加0.5mL過濾除菌的焦亞硫酸鈉溶液和0.5mL檸檬酸鐵銨溶液。5.**培養(yǎng)條件**:-將培養(yǎng)基放置于36℃±1℃的厭氧環(huán)境中培養(yǎng)18-24小時(shí)。6.**結(jié)果觀察**:-接種質(zhì)控菌株如產(chǎn)氣莢膜梭菌(ATCC13124),觀察其生長(zhǎng)情況和特征。產(chǎn)氣莢膜梭菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,菌落變黑,表明其發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的能力。R2A瓊脂培養(yǎng)皿適用于多種微生物的培養(yǎng),如銅綠假單胞菌和枯草芽孢桿菌等,用于進(jìn)行微生物質(zhì)控結(jié)果的測(cè)試 。
葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基(G.P)是一種常見的細(xì)菌培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**成分組成**:-葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基的主要成分包括葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂和瓊脂。具體配方為每升含有蛋白胨5.0克,葡萄糖20.0克,酵母粉2.0克,磷酸氫二鉀1.0克,無水硫酸鎂0.24克,瓊脂適量,pH值控制在6.4±0.2(25℃)。2.**用途**:-該培養(yǎng)基用于藥品、生物制品的無菌試驗(yàn),也用于獸用生物制品的無菌試驗(yàn)。它還用于觀察、分離和定量培養(yǎng)不同類型的細(xì)菌,同時(shí)用于研究菌株的特性和藥敏試驗(yàn)。3.**pH值**:-葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基的pH值一般在7.0左右,適合大多數(shù)細(xì)菌的生長(zhǎng)。4.**制法**:-制備葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基的方法相對(duì)簡(jiǎn)單,通常需要將葡萄糖、無機(jī)鹽和其他營養(yǎng)物質(zhì)溶解在蒸餾水中,然后加熱至溶解,再經(jīng)過濾消毒即可。5.**培養(yǎng)條件**:-培養(yǎng)基在121℃高壓滅菌15分鐘,備用。培養(yǎng)時(shí)通常在36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí),記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。6.**微生物質(zhì)控**:-接種質(zhì)控菌株如單增李斯特氏菌、大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、傷寒沙門氏菌等,在36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí),觀察生長(zhǎng)情況和特征。TSA是一種通用培養(yǎng)基,適用于多種微生物的培養(yǎng),包括細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌。亞硫酸鐵多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ)
TBA培養(yǎng)皿中含有胰蛋白胨,這是一種富含氮源的營養(yǎng)物質(zhì),能夠支持多種細(xì)菌的生長(zhǎng)。Iso-Sensitest 瓊脂
使用特定染料:亮綠染料可以用于區(qū)分細(xì)胞生長(zhǎng)區(qū)域,有助于觀察和計(jì)數(shù)。但需要注意的是,某些染料可能對(duì)細(xì)胞有毒,因此在添加之前應(yīng)進(jìn)行測(cè)試。優(yōu)化培養(yǎng)條件:細(xì)胞培養(yǎng)需要特定的溫度、濕度、CO2濃度和氣體組成,這些條件需要根據(jù)所培養(yǎng)的細(xì)胞類型進(jìn)行優(yōu)化。無菌操作:在接種和培養(yǎng)過程中,必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,以避免污染。觀察和分析:在培養(yǎng)過程中,定期觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)情況,記錄細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)速率和集落形成情況。分離和篩選:通過觀察細(xì)胞在培養(yǎng)皿中的分布和生長(zhǎng)情況,可以進(jìn)行細(xì)胞的分離和篩選,挑選出具有特定特性的細(xì)胞群體。應(yīng)用:改良后的亮綠瓊脂培養(yǎng)皿可以用于某些類型的細(xì)胞培養(yǎng),如干細(xì)胞培養(yǎng)、腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)等,尤其是在需要三維培養(yǎng)環(huán)境的情況下。Iso-Sensitest 瓊脂