甘露醇氯化鈉瓊脂(MannitolSaltAgar,簡稱MSA)是一種用于分離和鑒定革蘭氏陽性細菌特別是金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的選擇性培養基,具有以下特點:1.**成分組成**:-甘露醇氯化鈉瓊脂的主要成分包括甘露醇、氯化鈉、瓊脂、酚紅指示劑等。具體配方為每升培養基含有甘露醇10克、氯化鈉75克、瓊脂15克、酚紅0.03克,pH值通常調至7.2-7.4。2.**高鹽濃度**:-該培養基含有較高濃度的氯化鈉(7.5-10%),這種高鹽環境有助于抑制革蘭氏陰性細菌和一些其他非耐鹽細菌的生長,同時促進耐鹽的革蘭氏陽性細菌如金黃色葡萄球菌的生長。3.**pH值**:-甘露醇氯化鈉瓊脂的pH值通常在7.2-7.4之間,適合多數細菌的生長。4.**指示劑**:-培養基中添加的酚紅指示劑可以顯示細菌的代謝活動,幫助鑒別細菌。例如,某些細菌在發酵甘露醇時會產生酸性代謝產物,導致培養基顏色變化。5.**選擇性**:-甘露醇氯化鈉瓊脂具有選擇性,特別適合于金黃色葡萄球菌的分離和鑒定。金黃色葡萄球菌能夠在高鹽環境中生長,并利用甘露醇作為碳源,發酵產生酸,使培養基顏色變化。TSAM培養皿含有胰蛋白胨和大豆胨,這兩種成分富含氮源和碳源,能夠提供細菌生長所需的氨基酸和生長因子。阿奇霉素檢定培養基
配制方法堿性瓊脂培養皿的配制步驟通常包括:準備基礎培養基,包括瓊脂和其他營養成分。調整pH值至所需的堿性水平,通常pH值在9-11之間。高壓滅菌以確保培養基的無菌狀態。冷卻至適當溫度后,倒入無菌培養皿中,待其凝固。使用方法使用堿性瓊脂培養皿時,應將待檢測的樣本接種到培養皿上,然后在適宜的溫度和條件下培養。培養過程中,需要定期觀察微生物的生長情況和菌落形態。注意事項在配制和使用過程中,應小心操作,避免接觸高濃度的堿性物質。培養基應存放在干燥、避光、清潔的環境中,以保持其穩定性和有效性。堿性瓊脂培養皿是微生物學研究和應用中的一個重要工具,它有助于深入了解微生物在不同環境條件下的生長特性和適應機制。B12瓊脂培養基YEB培養基特別適用于農桿菌的培養和表達,使用此培養基制備農桿菌感受態細胞,轉化效率高。
在配制改良高氏二號培養基時,如果遇到成分沉淀問題,可以采取以下措施進行處理:1.**充分溶解**:確保所有成分在加入之前已經充分溶解。對于不易溶解的成分,如瓊脂,需要在加熱條件下不斷攪拌直至完全溶解。2.**調整溶解順序**:根據各成分的溶解特性,調整添加順序。通常先溶解無機鹽和維生素,再加入有機物質。3.**使用輔助溶劑**:對于某些難溶成分,可以考慮使用適當的溶劑或助溶劑來幫助溶解。4.**避免混合沉淀**:在混合不同成分時,要注意避免因成分相互作用而產生沉淀。例如,避免將鈣鹽和磷酸鹽直接混合。5.**控制pH值**:pH值的變化可能會影響某些成分的溶解度,因此在調節pH值時要小心,確保在成分完全溶解后再進行。6.**分步滅菌**:如果培養基中某些成分不耐熱,可以考慮分步滅菌。即先滅菌大部分成分,冷卻后再添加不耐熱的成分。7.**過濾**:如果沉淀物已經形成,可以通過過濾來去除。使用適當孔徑的濾紙或濾網過濾培養基。8.**攪拌**:在溶解和加熱過程中,持續攪拌可以減少沉淀的形成。9.**使用螯合劑**:對于易氧化的成分,如硫酸亞鐵,可以使用螯合劑(如EDTA)來防止沉淀和氧化。
乳糖亞硫酸鹽培養基(LactoseSulfiteMedium,簡稱LS)是一種用于產氣莢膜梭菌確認試驗的培養基,具有以下特點:1.**用途**:-主要用于產氣莢膜梭菌的確認試驗,通過檢測其發酵乳糖產酸產氣的能力。2.**成分組成**:-培養基的主要成分包括胰酪胨、酵母膏、氯化鈉、乳糖和L-半胱氨酸鹽酸鹽。具體配方為每升含有胰酪胨15.0g、酵母膏2.5g、氯化鈉2.5g、乳糖10.0g、L-半胱氨酸鹽酸鹽0.3g,pH值控制在7.1±0.2(25℃)。3.**添加劑**:-每瓶培養基需配套添加焦亞硫酸鈉溶液和檸檬酸鐵銨溶液,每8mL乳糖亞硫酸鹽培養基(LS)需要1支焦亞硫酸鈉和1支檸檬酸鐵銨溶液。這些添加劑用于檢測硫化氫的產生,使菌落呈黑色。4.**配制方法**:-稱取30.3g培養基粉末,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,分裝至含有倒置小導管的試管中,每管8mL,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻,臨用前,每管添加0.5mL過濾除菌的焦亞硫酸鈉溶液和0.5mL檸檬酸鐵銨溶液。5.**培養條件**:-將培養基放置于36℃±1℃的厭氧環境中培養18-24小時。6.**結果觀察**:-接種質控菌株如產氣莢膜梭菌(ATCC13124),觀察其生長情況和特征。產氣莢膜梭菌在該培養基上生長良好,菌落變黑,表明其發酵乳糖產酸產氣的能力。胡蘿卜浸出液葡萄瓊脂糖培養基的制備過程相對簡單,且操作方便,適合于教學和科研中的常規使用。
除了Pachlewski固體培養基,常用的微生物培養基有多種,根據不同的分類標準,可以列舉如下:1.**按成分分類**:-**天然培養基**:含有化學成分不完全明了的天然物質,如蛋白胨、牛肉膏等。-**合成培養基**:由已知化學成分的化學藥品配制而成,適用于科學研究。2.**按形態分類**:-**液體培養基**:不加任何凝固劑,適用于微生物的生理、代謝研究。-**半固體培養基**:加入少量凝固劑,用于觀察細菌的運動等。-**固體培養基**:加入足量的凝固劑,常用于微生物的分離、純化。3.**按用途分類**:-**基礎培養基**:提供微生物生長繁殖所需的基本營養物質,如蛋白胨水、肉湯培養基。-**營養培養基**:在基礎培養基中添加特殊營養物質,如葡萄糖、血液等。-**增菌培養基**:為液體培養基,用于細菌的增菌培養。-**選擇性培養基**:含有抑菌劑,有利于特定微生物的增殖或分離。-**鑒別培養基**:加入試劑或化學藥品,通過培養后的變化區別不同類型的微生物。含糖牛肉湯瓊脂培養皿主要成分包括牛肉浸粉、氯化鈉、胨、乳糖等,為細菌提供所需的碳源、氮源和維生素。產氣莢膜梭菌測定用培養基
TSA是一種通用培養基,適用于多種微生物的培養,包括細菌、放線菌、酵母菌和霉菌。阿奇霉素檢定培養基
葡萄糖蛋白胨培養皿是一種常用的微生物培養基,它由葡萄糖和蛋白胨作為主要成分,配合其他營養物質和瓊脂制成。這種培養皿廣泛應用于微生物的培養、分離、鑒定和計數。主要成分葡萄糖:作為碳源,提供能量和生長所需的碳元素。蛋白胨:提供氮源,含有氨基酸、維生素和生長因子,促進微生物生長。氯化鈉:維持菌體滲透壓,對某些微生物生長有利。磷酸鹽緩沖系統:維持培養基的pH穩定。瓊脂:作為凝固劑,使培養基凝固成固體狀態,便于微生物在其上生長。用途細菌培養:適用于多種細菌的生長,尤其是革蘭氏陽性菌。分離培養:用于從復雜樣本中分離特定類型的細菌。微生物鑒定:通過觀察菌落的形態、顏色和生長特性來鑒定細菌種類。計數:進行微生物的定量分析,如菌落計數。敏感性測試:通過在培養皿中加入抗生物質,測試細菌對不同抗生物質的敏感性。使用方法按照培養基配方稱取葡萄糖、蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽和瓊脂。加入適量的蒸餾水,加熱攪拌至完全溶解。調整pH至適宜范圍(通常為中性pH 7.0-7.4)。進行高壓滅菌,通常在121℃下保持15-20分鐘。冷卻至50-60℃,倒入無菌培養皿中,待其凝固。接種待培養的微生物樣本,根據需要進行需氧或厭氧培養。阿奇霉素檢定培養基