對(duì)于已經(jīng)購(gòu)買來的預(yù)裝培養(yǎng)基,其內(nèi)部較初的狀態(tài)已經(jīng)是無菌的。因此,在通常情況下,我們不需要對(duì)新的預(yù)裝培養(yǎng)基進(jìn)行任何形式的消毒處理。只需要在使用之前,檢查預(yù)裝培養(yǎng)基瓶口是否無菌,便可以直接使用。在使用過程中,應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范,避免外界微生物的污染。對(duì)于需要自制的培養(yǎng)基而言,其情況也不盡相同。如果自制的培養(yǎng)基中包含天然成分,那么在自制之后就需要進(jìn)行消毒處理,以殺死培養(yǎng)基中可能存在的微生物。在消毒處理之后,再將培養(yǎng)基裝入瓶中,就可以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)使用。同時(shí),在使用自制的預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí),需要嚴(yán)格控制其培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間、以及實(shí)驗(yàn)環(huán)境等參數(shù),以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格控制這些參數(shù)并避免接觸空氣或污染源。R2A瓊脂 EP
干粉培養(yǎng)基的制備與使用:干粉培養(yǎng)基制備的關(guān)鍵是控制成分比例準(zhǔn)確和混合均勻。首先按照制備配方精確稱量所需成分,然后在無菌條件下將其混合均勻,并在高真空下凍干得到干粉培養(yǎng)基。在使用前,將所需量的干粉培養(yǎng)基加入無菌蒸餾水中,經(jīng)過充分?jǐn)嚢韬图訜釡缇蠹纯墒褂谩8煞叟囵B(yǎng)基的使用方法和液體培養(yǎng)基類似。首先將制備好的培養(yǎng)基倒入滅菌好的培養(yǎng)皿、試管、瓶子等容器中,然后接種微生物,放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,不同微生物對(duì)于溫度、氧氣、CO2 等環(huán)境條件的要求是有所不同的,需要選擇相應(yīng)的恒溫箱和合適的培養(yǎng)條件。R2A瓊脂 EP固體培養(yǎng)基則通過向液態(tài)培養(yǎng)基中加入凝膠劑來制成,以便在培養(yǎng)過程中提供可視化定位細(xì)胞的單元。
在使用預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí),裝有培養(yǎng)基的容器需要以適當(dāng)?shù)臏囟却鎯?chǔ),不要將其暴露在陽光下或在高溫環(huán)境中存儲(chǔ)。因?yàn)闇囟冗^高會(huì)致使培養(yǎng)基變質(zhì),影響實(shí)驗(yàn)效果。而溫度過低則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)效果。因此在使用前需要查看培養(yǎng)基的理想存儲(chǔ)條件,進(jìn)行妥善的保存。當(dāng)使用預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí),需要進(jìn)行無菌操作。先用手或棉花球蘸上醫(yī)用酒精、經(jīng)冷卻壓縮器或火燒消毒的鐵鉆區(qū)外部表面消毒,再取樣放入容器或燒杯中。在轉(zhuǎn)移前,需要仔細(xì)消毒取樣的容器或燒杯,以保證懸浮在空氣中的細(xì)菌和病毒不會(huì)在樣品中繁殖,造成別樣的影響。
培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長(zhǎng)繁殖的,由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長(zhǎng)時(shí)間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管,均改制成粉末。在制備培養(yǎng)基時(shí),要注意保持一定的 pH 值。
在保存干粉培養(yǎng)基時(shí)還需要注意以下注意事項(xiàng):盡可能縮減干粉培養(yǎng)基長(zhǎng)時(shí)間不間斷存儲(chǔ)。因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間不使用,尤其是室溫下,會(huì)受到光照、濕度等自然環(huán)境的影響,溫濕度波動(dòng),會(huì)產(chǎn)生不穩(wěn)定的物理與化學(xué)效應(yīng),導(dǎo)致化學(xué)反應(yīng)發(fā)生,細(xì)菌及其他微生物生長(zhǎng)。在保存時(shí)使用密封包裝進(jìn)行,使其隔絕空氣和水分及其他微生物的進(jìn)入。及時(shí)檢查干粉培養(yǎng)基的保質(zhì)期,避免超過保質(zhì)期的使用,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。準(zhǔn)確記錄干粉培養(yǎng)基的配方,標(biāo)簽上應(yīng)說明干粉培養(yǎng)基的名稱、生產(chǎn)日期、有效期,混合使用指導(dǎo),以方便日后使用。液體培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于微生物菌株的生長(zhǎng)、染色及細(xì)胞背景下的細(xì)胞培養(yǎng)等方面。R2A瓊脂 EP
黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養(yǎng)基為營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基。R2A瓊脂 EP
選擇性培養(yǎng)基:選擇性培養(yǎng)基是一種針對(duì)特定細(xì)菌而設(shè)計(jì)的預(yù)裝培養(yǎng)基。使用選擇性培養(yǎng)基可以抑制一部分細(xì)胞的生長(zhǎng),而促進(jìn)其他細(xì)胞的生長(zhǎng),從而使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加精確。溫和培養(yǎng)基:與其他培養(yǎng)基類型相比,溫和培養(yǎng)基是一種非常溫柔和精細(xì)的預(yù)裝培養(yǎng)基。利用溫和培養(yǎng)基可以減少實(shí)驗(yàn)對(duì)菌群的損害,從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確和穩(wěn)定。預(yù)裝培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn):方便快捷:預(yù)裝培養(yǎng)基可以直接使用,無需進(jìn)行消毒、配制等繁瑣的操作,這樣可以節(jié)省實(shí)驗(yàn)室工作人員大量的時(shí)間和精力。準(zhǔn)確可靠:預(yù)裝培養(yǎng)基在生產(chǎn)過程中經(jīng)過精細(xì)的處理和檢測(cè),質(zhì)量得到了保證,能夠保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。適用范圍廣:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇適當(dāng)類型的預(yù)裝培養(yǎng)基可以滿足不同領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)研究需求。R2A瓊脂 EP