1983年，外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創診斷的開發。如何高效地提取外泌體是實現這項新興液體活檢技術臨床常規化應用的關鍵。外泌體的提取方法：色譜法。深圳外泌體提取試劑哪家便宜

外泌體的提取、分離方法：免疫親和層析法。免疫親和層析法是利用生物體內存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進行分離的方法，主要用于生物大分子的分離、純化。將其應用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體，如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結合，只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識別，這使得提取的外泌體純度高，但是產量低。Zarovni等分別用超速離心、密度梯度離心和免疫層析法，從血漿和細胞上清中提取外泌體蛋白，結果表明，免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標記蛋白(Alix、CD9、CD63)，同時，ELISA和PCR結果也證明了該方法的可行性。深圳外泌體提取試劑哪家便宜使用可截留100KD分子量的膜，通過離心截留上清中的外泌體，截留完成后。

外泌體在肺病進程中的作用：肺病細胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長。據相關報道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過調節基質細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進一些病癥血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外，有研究發現，外泌體中的內容物可以觸發上皮-間質轉化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加，促使人正常支氣管上皮細胞出現EMT，從而使肺支氣管正常上皮細胞出現增殖，遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備，應用不普遍。

外泌體的提取、分離方法：微流控技術。微流控是利用微納米級尺寸的管道來處理和操控流體所涉及的一門技術，其在外泌體分離方面的應用受到越來越多學者的關注。Jie等[16]課題組開發了一種三維納米結構微流控芯片，微柱陣列通過化學沉積將交叉多壁碳納米管功能化，然后其就可以識別特定的分子(CD63)并利用獨特拓撲納米材料高效的捕獲外泌體。Wunsch等[17]利用硅工藝生產納米級確定性側向位移(Nano-DLD)芯片，得到了均勻的間隙尺寸，該芯片可以靈敏地將20~110nm的顆粒分離。該研究證明了外泌體基于大小的位移，從而揭示了利用芯片分選和量化納米級生物膠體的潛力。用無菌針管吸取上層含有外泌體的液體，置于80℃儲存備用。

2015年，隨著精細醫學概念的提出，越來越多的人開始關注如何能做到疾病的精確診斷和治病。外泌體作為一個新型的研究熱點，由于它在體內存在的普遍性和獲取的便捷性，已經成為了疾病診斷治病的潛在有效方式，在精細醫學發展上有著光明的前景。多泡內體的腔內囊泡，要么分選進溶酶體將物質降解，要么作為外泌體分泌到胞外環境中。將膜分選到不同的腔內囊泡群中的機制尚不清楚。該研究發現物質被分選到內體膜上的不同子域中，并且外泌體相關結構域向內體腔的轉移不取決于ESCRT（運輸所需的內體分選復合體）的功能，但是需要鞘脂神經酰胺。純化的外體富含神經酰胺，并且在神經鞘磷脂酶被壓制后外泌體釋放減少。這些結果確定了內體內膜運輸和外泌體形成的途徑。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標志物。深圳外泌體提取試劑哪家便宜

此提取方法條件復雜，成本高。深圳外泌體提取試劑哪家便宜

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標志物，多角度進行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡稱TEM，適合外泌體雙層囊膜超微結構觀察，即通常為茶托型或一側凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡稱NTA，該方法能保證外泌體原始狀態、檢測速度快，檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息。lWesternblot分子標志物檢測：外泌體標志蛋白包括四跨膜蛋白家族，如CD9、CD63和CD81；細胞質蛋白，如肌動蛋白（Actin）和鈣磷脂結合蛋白（Annexins）；深圳外泌體提取試劑哪家便宜

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