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來源: 發布時間:2024年11月15日

對于生物科研汪們來說,大白鼠、小白鼠們簡直渾身是寶,從毛發、皮膚,到心肝脾肺,甚至各種排泄物,都是我們重要的研究對象。尾巴,自然也是。所以耗子尾汁不僅存在,甚至是我們生物實驗中必不可少的實驗材料和實驗對象。有不少人靠「耗子尾汁」發了CNS和頂刊。沒有「耗子尾汁」,很多課題可能都沒辦法開展。在以小鼠為模式生物進行科學研究的實驗室中,日常和基本的一個實驗就是提取它們的遺傳物質—DNA(脫氧核糖核酸)進行基因型鑒定,檢測這些小動物的基因組中是否含有特定的DNA。可以理解為給小動物做核酸檢測。一種基于鼠尾膠原蛋白:各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為5% 2% 1%,余量的水。廣州鼠尾膠原廠家直銷

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實驗應用:鼠尾膠原在原代培養耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。結果:自制的鼠尾膠原能正常地培養出大鼠耳蝸邊緣細胞,細胞角蛋白18表達陽性,免疫組織化學結果和掃描電鏡證實所培養的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征。結論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,并且制作簡便,成本低廉。廣州正規鼠尾膠原哪里買膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫用材料。

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鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:將培養器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。B.含細胞的三維膠原的制備(以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul10PBS10培養液,混勻(混勻后pH左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養液,轉移到培養箱中培養。注意事項型在室溫下pH中性時可迅速成膠,在操作過程中要盡量保持低溫。鼠尾肌腱膠原蛋白I(rattailtendoncollagentypeI)根據Birkedal-Hansen方法,經過醋酸(HAc)抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備所得。

鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代培養中的應用:在國外的藥理,毒理和皮膚病學的研究領域中已得到的限翩,否則培養成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養層,提高了培養細胞的材料和方法r1]實驗材料:培養液DEIdE(G皿}ao),表皮細胞生長因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細胞培養皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細胞的分離和細胞懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細胞懸液,加入細胞培養液.用梯度離心收集細胞,以3xi0/m]濃度接種平皿.(3)鼠尾膠原凝膠體的制備:具體方法參見文獻c13o(4)培養皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴入~35mm培養皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中30rain,散盡剩余氨氣。制備鼠尾膠原:吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克)。

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為了能夠從小鼠身上提取足夠的DNA,要從它們身上取下足量的細胞用于實驗。為了盡可能減少對動物的傷害和方便試驗人員的操作,剪下一小段鼠尾是一個不錯的選擇。就讓我們來盤點一下「耗子尾汁」的三種用法↓↓↓鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴、在小鼠尾靜脈上劃一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的「耗子尾汁」。它可以用于監測小鼠血液成分的變化,確認小鼠是否患上了糖尿病或者某些能夠改變小鼠的血糖等。比起心臟和眼部取血,實驗用鼠尾尖取血的取血量較小,但取血之后,小鼠還能繼續下一步建模或者實驗,完全沒有性命之憂。鼠尾膠原醋酸溶解:在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。杭州深圳鼠尾膠原

將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡。廣州鼠尾膠原廠家直銷

鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH。2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3)在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4)在無菌條件下執行以下步驟。4.1加入10×PBS(終體積/10)mL4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)終體積x終膠原蛋白I濃度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的膠原體積×0.023)mL的無菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水:添加蒸餾水體積=V(終)—V(膠原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物質并放入冰中。4.6加入膠原蛋白I并計算體積,混勻,冰上備用。5)膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時。6)使用時,無菌條件下將溶液加入到細胞培養裝置中37°C凝膠30min。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。廣州鼠尾膠原廠家直銷

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