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紹興小型超濾離心管價位

來源: 發布時間:2023年09月27日

超濾離心管是否可以重復使用:離心超濾管通常不能消毒再次性使用。由于單管價格并不便宜,不少人嘗試重復使用----經驗是用蒸餾水清洗膜表面多次,離心一次到兩次,那種可以反向離心的小管子可以加蒸餾水浸泡后反向多離心一次,會好些。可重復用于同一樣品,不用時可用蒸餾水浸泡,但是要防止細菌污染。不同樣品就不要混用了。有人說泡在20%酒精、1N的NaOH(氫氧化鈉)中,防止長菌,而且防干,只要超濾膜侵了水,就不可以再讓它干,但也有人說會破壞膜結構。反正廠家一般不支持重復用。多次重復使用會堵塞濾膜上的孔徑,甚至出現漏液現象,影響實驗結果。超濾離心管在食品安全監測中也具有重要意義,如檢測水產品中的重金屬等有害物質。紹興小型超濾離心管價位

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在選擇過程中,應首先執行以下步驟:1考慮樣品和分子特性:比如改變pH 可能增加構象改變的風險,而降低溫度可能降低濃縮效率等。2、選擇正確的膜:眾所周知,超濾沒有太多的膜選項,但您應對再生纖維素和聚醚砜(PES)材料進行測試,以確定哪種材料可為您的特定材料提供較低的非特異性結合和較優的回收率。3、選擇合適的截留分子量,通常是靶標1/3大小的截留分子量較適合。但有時則需要更小的孔徑來滿足回收率的要求。如果在病毒和核酸樣品,可參看下面截留分子量和病毒顆粒分子大小以及核酸大小的換算表。選擇合適的裝置:賽多利斯擁有適用于低濃度樣品、DNA、蛋白質、病毒、過濾應用等普遍的裝置選項;選擇合適的裝置可以有效改善結果。紹興小型超濾離心管價位離心機轉速會影響到超濾效果,因此需要根據實驗要求調整相應的轉速。

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我用的是3500g,4度離心,時間可以自己控制,取決于你之后的濃縮體積,我一般是200ul左右。千萬別一下離心時間太長,不同的蛋白濃縮的速度不同,有的需要長時間離心,有的則一下子就好。當然也和你的蛋白是否比較純,所用的是什么buffer,還有蛋白的濃度有關系。所以離心時要先短些時間觀察一下你的濃縮速度,不要一下子濃縮過了,甚至形成沉淀就得不償失了。另外其實他們的管子都設計的是一次性使用,所以如果想重復使用,不要離得速度太高,4000-4500RPM就差不多了,另外重復使用時要看看管壁上有沒有裂紋,現在的管子好像不如從前的結實了。

超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標分子量選擇適當的超濾離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標分子量的一半。因為超濾膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質,可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心,雖然優良品質的產品都有防死端設計,可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免過度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時補加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。使用超濾離心管時應注意避免污染和交叉傳播,并對設備進行徹底清潔消毒。

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當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉淀,導致堵管。若發生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發生沉淀為止。超濾離心管能夠去除混合物中的雜質和低分子量化合物,得到高純度的目標化合物。紹興小型超濾離心管價位

超濾離心管也可用于海洋科學研究中,以檢測水樣中的微量元素和化合物。紹興小型超濾離心管價位

超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法,重復性好,得率有保障,已經在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標準操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經成為主流方法。超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,在默克生命科學團隊推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前,我們發現近90%的使用者在選擇和使用過程中因為缺乏必要信息而沒有獲得較佳體驗,更重要的是,寶貴的樣本會遭受本可避免的損失!如果目的蛋白是120kDa,請問應該選擇的超濾管規格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?這些沒有統一的說法,是因為不同廠家的膜的截留分子量的定義不同。紹興小型超濾離心管價位

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