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來源: 發布時間:2023年09月08日

外泌體基礎醫學和臨床應用的探索和深入研究對如何準確及高純度提取外泌體,并完整保存提出了更高的技術要求。外泌體可通過差速超速離心在不同離心力下沉淀樣品中不同的雜質組分,并在100000×g~200000×g的轉速下獲取較純的外泌體。差速超速離心技術被認為是外泌體分離的“金標準”,也是目前常用的外泌體分離和濃縮方法。該方法可通過結合0.22μm或0.45μm孔徑濾膜進行超濾來提高產物純度減少外泌體的聚集,其分離效率容易受到加速度、轉子類型、旋轉半徑、沉降路徑長度以及樣品黏度等多種因素影響。泌體是細胞內源性的小囊泡,由大多數細胞分泌。提取試劑盒成分

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小鼠骨髓樹突狀細胞產生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動特異性細胞毒性T淋巴細胞,根除或抑制小鼠中流的生長,這一發現為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外,樹突狀細胞來源的外泌體也能夠通過激huo其他免疫細胞誘導抗中流反應,從而抑制中流。B細胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復合物,能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細胞,從而實現調節免疫響應的功能。細菌或病原體感ran的巨噬細胞外泌體能夠刺激巨噬細胞和中性粒細胞分泌炎性介質,在增強機體免疫監督方面發揮重要作用。提取試劑盒成分外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。

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外泌體(exosome)是一種由活細胞分泌的,直徑約為40~160nm的具有雙層膜結構的生物活性囊泡。它攜帶了分泌細胞包含的生物活性物質,如DNA、miRNAs、mRNA、長鏈非編碼RNA(LncRNA)、酶、蛋白質和細胞代謝物等。外泌體在細胞間通信中扮演著十分重要的角色。目前對于外泌體的研究涉及包括瘤的發生和發展、侵襲轉移機制、瘤診斷標志物以及藥物傳遞系統等諸多方面。外泌體是一個高度異質性的群體,具有獨特的誘導復雜生物學反應的能力。外泌體的異質性可以根據其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來區分。這些特征的不同組合導致了外泌體的復雜異質性。

外泌體是由細胞細胞質內的晚期內泡小體以膜融合的方式通過胞吐方式主動分泌到細胞外環境的一種直徑30-100nm的微型囊泡,其形態規則,呈圓形或橢圓形杯狀結構,不同類型細胞分泌的外泌體具有很多共性,包括膜上富含脂筏及豐富的跨膜蛋白,如四次跨膜蛋白家族成員CD63、CD81等,表面為類似于細胞膜的脂質雙分子層,具有一定的疏水性。外泌體能夠攜帶微小RNA(microRNAs,miRNAs)、RNA、蛋白質等生物活性分子,并在細胞外環境穩定存在,而且通過傳遞供體細胞信息,調節靶細胞的代謝通路。外泌體可由多種類型細胞分泌,妊娠期母體血清中存在表達胎盤堿性磷酸酶(placentalalkalinephosphatase,)的胎盤來源外泌體,并且在妊娠中發揮重要的作用。外泌體無法分析外泌體具有的生理功能,也是兩種提取方法的問題所在。

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外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙,快速直達基底層起效;富含100+多種胞外基質蛋白、胞外基質酶以及細胞黏附分子;能夠有效促進皮膚成纖維細胞(HDFs)中I型膠原蛋白、成纖維蛋白,促進皮膚有效快速再生(Rejuvenation);能夠有效促進皮膚成纖維細胞(HDFs)彈性蛋白生成,保持皮膚飽滿和彈性;有效降低皮膚成纖維細胞(HDFs)中膠原蛋白酶(MMP-1)的生成從而防止皮膚間質中IIIIII型膠原蛋白被降解;富含活性物質能夠促進皮膚有些血管的修復與重建再生。結果表明,PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質和RNA。提取試劑盒成分

外泌體及其攜帶的組分參與肝臟細胞的增殖、再生和遷移等生理過程,在肝臟疾病和肝損傷中起著重要作用。提取試劑盒成分

為獲得外泌體的大小、濃度、形態及蛋白質組成等信息,可以通過電鏡、動態光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質免疫印跡、酶聯免疫吸附法、流式細胞儀等對外泌體進行表征。通過電鏡可獲得外泌體的形態信息,不同類型的顯微鏡由于操作環境不同,得到的外泌體形態存在差異。例如,在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中,外泌體呈現囊泡獨有的茶托形,可能由于樣品在固定或染色過程中極度脫水,導致外泌體塌陷所致。與之相反,在冷凍電鏡中外泌體呈現圓形,由于不會脫水變性,所得的外泌體形態可能更加接近囊泡的真實狀態。另外,由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率,也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。提取試劑盒成分

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