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體液外泌體Dir

來源: 發布時間:2023年05月22日

外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm),現今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年,外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發現,1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細胞間通訊,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創診斷的開發。外泌體的數量:人體中大約有1014個,近乎于平均每個細胞產生1000-10000個。體液外泌體Dir

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目前為止已鑒別了2500余種miRNAs分子。例如,血液外泌體miR-21的升高已被證實與胰腺ai、結直腸ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai及食管ai等多種中流相關,可能與其參與中流xue管生成有關,研究表明肺ai細胞釋放的外泌體miR-21會通過STAT3依賴機制誘導周圍支氣管細胞血管內皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的產生,從而促進血管生成。在食管ai中,miR-21還可以反映中流的惡性程度,食管ai患者的miR-21水平與良性中流患者相比急劇上升,上升的miR-21水平也與中流的淋巴侵襲和轉移相關。在膀胱ai患者中,尿液中的miR-21和miR-4454會明顯上調。體液外泌體Dir疾病的進展和對診療的反應可以通過外泌體的多組分分析來確定。

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外泌體普遍參與細胞間物質運輸與信息傳遞,調控細胞生理活動。同時,外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導正常細胞轉化、促進種瘤發生和轉移等作用;此外,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送。外泌體相關數據庫有哪些?lexoRBase數據庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA,包括circRNA、lncRNA和mRNA。lEVpedia和Vesiclepedia數據庫匯總了不同囊泡研究中發現的蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。lExoCarta數據庫主要收錄了包括人、大鼠、小鼠、綿羊等幾個物種的286個研究結果,涉及蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。外泌體是各種細胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。

外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡,其主要來源于細胞內多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。外泌體膜上富含參與外泌體運輸的四跨膜蛋白家族(CD63,CD81和CD9)、熱休克蛋白家族(HSP60,HSP70和HSP90),本示蹤病毒使用CD63作為生物標記,通過將CD63與熒光蛋白偶聯,帶熒光的膜蛋白會在表達至外泌體膜上,便于后續進行、觀察內化或其他實驗。慢病毒載體的構建原理就是將HIV21基因組中的順式作用元件(如包裝信號、長末端重復序列)和編碼反式作用蛋白的序列進行分離。從體液和培養上清中高純度提取的高純度外泌體,在活內是否真的能發生作用尚未能確定。

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結果表明,PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質和RNA。應用Tim4的外泌體強結合能力,可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體。以前無法用超速離心法提取的微囊泡,也通過運用PS親和法實現高純度提取。本指導書中對該技術進行詳細說明,這項技術的有用性今后將受到世界各方評價,有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻。外泌體的檢測和提取還遇到一個困難即:對各種外泌體的分類。研究人員尚未統一定義以何種方法提取的細胞外囊泡可以稱之為外泌體,給實驗數據的分析和重復性確認帶來困難。近年,隨著國際細胞外囊泡協會的成立、世界性研究者研討會的舉辦,提案MISEV指南作為國際標準,計劃或已經開始進行EV研究的科學家請務必閱讀這些方針。外泌體是具有生物活性的脂雙層囊泡。體液外泌體Dir

外泌體具有異質性,即使是同一種細胞分泌的外泌體都有可能具有比較大功能區別。體液外泌體Dir

外泌體作為藥物遞送載體較以往的合成系統具有多方面的優勢,比如:人工遞送載體具有更低的免疫原性,其含有的磷脂雙分子層可與靶細胞細胞膜融合,從而避廉價核巨噬細胞系統的吞噬作用。Srivastava等開發了一種基于外泌體-金奈米粒子(Exo-GNP)的藥物遞送系統—“nanosomes”用于肺病的醫治,研究表明該系統與單用多柔比星醫治相比,前者的多柔比星釋放量增加、攝取率提高、化療毒性降低且化療效果增強。此外,還有研究發現,使用外泌體運載紫杉醇(PTX)可顯著提高病細胞對PTX的吸收,將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細胞毒性,Exo-PTX能顯著壓制肺病的發展。體液外泌體Dir

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