ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)。免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何**的診斷試劑離不開(kāi)**的原料,如抗原抗體,酶等。進(jìn)口ELISA試劑盒的代理,上海伊麗薩生物科技等你來(lái)。吉林名優(yōu)ELISA試劑盒器材
底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M檸檬酸(19.2克/L)24.3ml加蒸餾水50ml。(6)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇)0.5ml底物緩沖液(PH5.5)10ml0.75%H2O232μl(7)ABTS使用液:ABTS0.5mg底物緩沖液(PH5.5)1ml3%H2O22μl(8)抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。(9)正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。器材(1)聚苯乙烯塑料板(簡(jiǎn)稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,ELISA檢測(cè)儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。(2)小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。(3)4℃冰箱,37℃孵育箱。安徽專業(yè)ELISA試劑盒代理價(jià)格進(jìn)口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理品牌產(chǎn)品的操作更簡(jiǎn)便。
操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
ELISA試劑盒的穩(wěn)定性是指在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中,試劑盒的性能保持不變的能力。試劑盒中的各種成分,如抗體、酶標(biāo)記物、底物等,都需要具有一定的穩(wěn)定性。一般來(lái)說(shuō),試劑盒需要在特定的溫度條件下儲(chǔ)存,例如2-8°C。在這個(gè)溫度范圍內(nèi),試劑盒的有效期可以達(dá)到數(shù)月甚至數(shù)年。在運(yùn)輸過(guò)程中,也需要采取適當(dāng)?shù)拇胧?,如使用冷藏箱或保溫包裝,以確保試劑盒的穩(wěn)定性。如果試劑盒的穩(wěn)定性不好,可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確,因?yàn)槌煞值淖冑|(zhì)會(huì)影響抗原-抗體結(jié)合、酶的活性等反應(yīng)過(guò)程。進(jìn)口ELISA試劑盒代理,上海伊麗薩生物科技為您提供專業(yè)服務(wù)。
ELISA試劑盒的準(zhǔn)確性是由多個(gè)因素共同決定的。首先是其特異性和靈敏度,這兩者確保了能夠正確檢測(cè)到目標(biāo)物質(zhì)且不受干擾。試劑盒的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量控制也對(duì)準(zhǔn)確性有著關(guān)鍵影響。從包被抗體或抗原的均勻性、穩(wěn)定性,到酶標(biāo)記物的活性等,每一個(gè)環(huán)節(jié)都需要嚴(yán)格把控。在實(shí)際應(yīng)用中,準(zhǔn)確性還體現(xiàn)在與其他檢測(cè)方法的一致性上。例如在檢測(cè)糖尿病患者血糖相關(guān)指標(biāo)時(shí),ELISA試劑盒的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)與傳統(tǒng)的生化檢測(cè)方法具有高度的一致性。同時(shí),經(jīng)過(guò)大量樣本的驗(yàn)證和標(biāo)準(zhǔn)化操作流程的建立,也有助于提高ELISA試劑盒的準(zhǔn)確性。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。河南專業(yè)ELISA試劑盒
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ELISA試劑盒的特異性也是其優(yōu)勢(shì)之一。特異性是指試劑盒能夠準(zhǔn)確識(shí)別目標(biāo)物質(zhì)而不受其他物質(zhì)干擾的能力。在ELISA試劑盒中,抗原與抗體的特異性結(jié)合是實(shí)現(xiàn)高特異性的基礎(chǔ)??贵w是經(jīng)過(guò)精心篩選和制備的,它只與目標(biāo)抗原上特定的表位結(jié)合。例如,在檢測(cè)某一特定細(xì)菌的抗原時(shí),試劑盒中的抗體不會(huì)與其他細(xì)菌的抗原發(fā)生交叉反應(yīng)。這種特異性在復(fù)雜的生物樣本檢測(cè)中尤為重要。比如在血清樣本中,含有眾多不同的蛋白質(zhì)、等物質(zhì),但ELISA試劑盒能夠準(zhǔn)確檢測(cè)出目標(biāo)物質(zhì),不會(huì)因?yàn)槠渌镔|(zhì)的存在而產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。這確保了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,無(wú)論是在疾病診斷還是在生物研究中都是至關(guān)重要的。吉林名優(yōu)ELISA試劑盒器材