操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。天津認(rèn)可ELISA試劑盒歡迎選購(gòu)
ELISA試劑盒在心血管疾病的檢測(cè)中也有應(yīng)用。例如,在心肌梗死的診斷中,可以檢測(cè)心肌肌鈣蛋白(cTn),這是一種特異性很高的心肌損傷標(biāo)志物。ELISA試劑盒能夠準(zhǔn)確測(cè)量血清中的cTn水平,在心肌梗死發(fā)生后的早期就能檢測(cè)到其升高,有助于早期診斷和及時(shí)。此外,對(duì)于心力衰竭的診斷,ELISA試劑盒還可用于檢測(cè)腦鈉肽(BNP)及其前體(NT-proBNP),這些指標(biāo)的升高與心力衰竭的嚴(yán)重程度相關(guān),通過(guò)檢測(cè)它們可以輔助診斷心力衰竭并評(píng)估病情的進(jìn)展。北京特惠Novateinbio ELISA試劑盒活動(dòng)進(jìn)口ELISA試劑盒哪里有?上海伊麗薩生物科技代理多種品牌等你來(lái)。
ELISA試劑盒的操作相對(duì)簡(jiǎn)便,這使得它在眾多實(shí)驗(yàn)室和臨床檢測(cè)中得到廣泛應(yīng)用。一般來(lái)說(shuō),試劑盒都配有詳細(xì)的操作說(shuō)明書。首先,樣本的處理通常比較簡(jiǎn)單,例如血液樣本只需進(jìn)行離心等基本操作就可用于檢測(cè)。在檢測(cè)過(guò)程中,加樣步驟明確,按照微孔板上的標(biāo)記依次加入樣本、試劑等。反應(yīng)的時(shí)間和溫度也有明確規(guī)定,通常在常見的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫度下就可進(jìn)行反應(yīng),反應(yīng)時(shí)間也在可接受的范圍內(nèi),不需要特殊的長(zhǎng)時(shí)間等待。顯色反應(yīng)后的檢測(cè)也較為方便,使用酶標(biāo)儀等常見儀器就可以讀取吸光度等數(shù)據(jù)。整個(gè)操作過(guò)程不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備和高超的實(shí)驗(yàn)技術(shù),普通的實(shí)驗(yàn)室人員經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單培訓(xùn)就可以熟練操作。
ELISA試劑盒的穩(wěn)定性是指在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中,試劑盒的性能保持不變的能力。試劑盒中的各種成分,如抗體、酶標(biāo)記物、底物等,都需要具有一定的穩(wěn)定性。一般來(lái)說(shuō),試劑盒需要在特定的溫度條件下儲(chǔ)存,例如2-8°C。在這個(gè)溫度范圍內(nèi),試劑盒的有效期可以達(dá)到數(shù)月甚至數(shù)年。在運(yùn)輸過(guò)程中,也需要采取適當(dāng)?shù)拇胧缡褂美洳叵浠虮匕b,以確保試劑盒的穩(wěn)定性。如果試劑盒的穩(wěn)定性不好,可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確,因?yàn)槌煞值淖冑|(zhì)會(huì)影響抗原-抗體結(jié)合、酶的活性等反應(yīng)過(guò)程。上海伊麗薩生物科技,在進(jìn)口ELISA試劑盒代理方面經(jīng)驗(yàn)豐富。
ELISA試劑盒也可用于食品安全檢測(cè)中的農(nóng)藥殘留檢測(cè)。在農(nóng)作物種植過(guò)程中,農(nóng)藥的使用不可避免,但過(guò)量的農(nóng)藥殘留會(huì)影響消費(fèi)者的健康。ELISA試劑盒能夠檢測(cè)多種農(nóng)藥殘留,如有機(jī)磷農(nóng)藥、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥等。例如,檢測(cè)蔬菜中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的ELISA試劑盒,通過(guò)特異性的抗原-抗體反應(yīng),可以快速檢測(cè)出蔬菜中是否存在有機(jī)磷農(nóng)藥殘留。這種檢測(cè)方式具有成本低、速度快的優(yōu)點(diǎn),能夠?qū)Υ罅康霓r(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行初步篩查,對(duì)于保障食品安全具有重要意義。進(jìn)口ELISA試劑盒代理,上海伊麗薩生物科技為您提供專業(yè)服務(wù)。沈陽(yáng)進(jìn)口ELISA試劑盒的耐用材料
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加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。一、高效、靈敏、特異的抗體;二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。天津認(rèn)可ELISA試劑盒歡迎選購(gòu)