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北京專業(yè)ELISA試劑盒器材

來源: 發(fā)布時間:2025年04月06日

ELISA,即酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay),其試劑盒基于抗原-抗體特異性結(jié)合的原理。在試劑盒中,首先將已知的抗原或抗體固定在微孔板的表面。如果檢測樣本中含有相應(yīng)的抗體或抗原,就會與之特異性結(jié)合。然后加入酶標記的二抗或抗原,這種酶標記物能夠與之前結(jié)合的物質(zhì)再次特異性結(jié)合。加入底物,在酶的催化作用下,底物發(fā)生顏色反應(yīng)或化學發(fā)光反應(yīng)等可檢測的信號變化。通過檢測信號的強度,可以定量或定性地分析樣本中的目標物質(zhì)。例如在檢測某種疾病相關(guān)蛋白時,樣本中的蛋白與微孔板上固定的抗體結(jié)合,后續(xù)的反應(yīng)步驟逐步放大信號,從而實現(xiàn)對低濃度蛋白的精確檢測。上海伊麗薩生物科技,進口ELISA試劑盒代理的信譽之選。北京專業(yè)ELISA試劑盒器材

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ELISA試劑盒的精密度是指在相同條件下多次重復測量同一樣本時,測量結(jié)果的分散程度。精密度包括批內(nèi)精密度和批間精密度。批內(nèi)精密度是指在同一批次的試劑盒內(nèi),對同一樣本進行多次檢測的結(jié)果的變異系數(shù)(CV)。批間精密度則是指不同批次的試劑盒對同一樣本檢測結(jié)果的CV。良好的精密度要求CV值較低,一般來說,批內(nèi)精密度的CV值應(yīng)小于10%,批間精密度的CV值應(yīng)小于15%。通過優(yōu)化試劑盒的生產(chǎn)工藝、保證原材料的一致性以及嚴格的質(zhì)量控制措施,可以提高試劑盒的精密度,確保檢測結(jié)果的可靠性,尤其是在大規(guī)模檢測項目中,精密度對于數(shù)據(jù)的準確性和可重復性至關(guān)重要。天津進口ELISA試劑盒的結(jié)果準確性上海伊麗薩生物科技代理進口ELISA試劑盒,服務(wù)生命科研工作者。

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ELISA試劑盒在心血管疾病的檢測中也有應(yīng)用。例如,在心肌梗死的診斷中,可以檢測心肌肌鈣蛋白(cTn),這是一種特異性很高的心肌損傷標志物。ELISA試劑盒能夠準確測量血清中的cTn水平,在心肌梗死發(fā)生后的早期就能檢測到其升高,有助于早期診斷和及時。此外,對于心力衰竭的診斷,ELISA試劑盒還可用于檢測腦鈉肽(BNP)及其前體(NT-proBNP),這些指標的升高與心力衰竭的嚴重程度相關(guān),通過檢測它們可以輔助診斷心力衰竭并評估病情的進展。

ELISA試劑盒中微孔板的設(shè)計是研發(fā)的一個重要方面。微孔板的材質(zhì)、形狀和表面處理方式都會影響檢測結(jié)果。材質(zhì)方面,常用的有聚苯乙烯等,這種材質(zhì)具有良好的化學穩(wěn)定性和生物相容性。形狀上,一般為96孔或384孔板,96孔板適用于中小規(guī)模的檢測,384孔板則更適合大規(guī)模高通量檢測。表面處理方式包括物理吸附和化學共價鍵結(jié)合等,目的是使抗原或抗體能夠有效地固定在微孔板表面。例如,通過對微孔板表面進行特殊的化學修飾,可以提高抗原或抗體的固定量和固定的穩(wěn)定性,從而增強試劑盒的靈敏度和特異性。蘇州Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動。

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ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。上海伊麗薩生物科技,在進口ELISA試劑盒代理方面經(jīng)驗豐富。福建專業(yè)ELISA試劑盒進貨價

試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。北京專業(yè)ELISA試劑盒器材

操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。北京專業(yè)ELISA試劑盒器材

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