加入20μteinaseK溶液，混勻。加入200μL緩沖液GB，充分顛倒混勻，在56℃放置14min（期間顛倒混合樣品數次），溶液應變清亮，若未完全變清亮，延長裂解時間至完全變清亮。加人200μL無水乙醇，充分振蕩混勻10s，此時可能會出現絮狀沉淀。將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm離心30s，倒掉廢液，將吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD（已加入無水乙醇），12,000rpm離心30s，棄廢液，將吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW（已加入無水乙醇），12,000rpm離心30s，棄廢液，將吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm（~13，400×g）離心2min。將吸附柱放置新的，以徹底晾干吸附柱中殘余的漂洗液。向吸附柱中懸空滴加50～200μL洗脫緩沖液，室溫放置2～5分鐘，12,000rpm（~13，400×g）離心2min，將溶液收集到離心管中，測定濃度及純度后，取3μL，加入到配制好的熒光PCR反應液，于ABI7500熒光PCR儀中進行擴增。用本發明和對照產品對8份樣本同時進行熒光PCR擴增。結果如圖6，本發明所有反應孔背景信號好、Ct值都在21～25之間，熒光擴增曲線呈典型的S型。然后將沾有口腔脫落細胞的拭子在潔凈通風處、至少一小時直至晾干，裝回采集管，完成取樣。河北泡沫口腔拭子

精細采樣，一步到位 —— 華晨陽 DNA 采樣口腔拭子

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